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铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤

实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。主要试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante ,XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸盐缓冲液将XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必须特别清洁,配制后放置4℃数天,以不出现沉淀为准。如出现沉淀XC的多聚体形成,应重配。5.0.30Mol/L pH 9.5硼盐酸缓冲液6.0.1Mol/L硫酸铵液7.0.05Mol/L pH7.4 PBS液实验步骤1.铁蛋白的提取 1) 配制2%硫酸铵液,并以1mol/L的NaOH或HCl调pH值,正好为5.85。取1g铁蛋白溶于100ml的2%硫酸铵液中。 2) 加入20%硫酸镉,使最终浓度......阅读全文

细数铁蛋白临床价值多面性

铁蛋白主要存在于肝脏、脾脏和大脑的锥体外侧束的细胞核中,构成铁蛋白的两个亚型:一个是L亚型,相对分子质量19000,另一个是H亚型,相对分子质量21000。H和L亚型组成比例不同会产生不同的异铁蛋白,H和L比例取决于组织类型,同时随着炎症和感染情况而改变。血清铁蛋白是体内较为稳定的铁的贮存形式,在多

两项中国科学家肿瘤药物输送成果获国际认可

药物输送系统是国际肿瘤研究的热点之一,肿瘤靶向性药物输送体系的研究和应用更是癌症治疗研究领域中备受关注的部分。 近期分别来自中科院生物物理所和南京大学配位化学国家重点实验室的研究人员在肿瘤靶向性药物输送体系方面获得的新进展,并分别获得了《美国国家肿瘤研究所杂志》和英国皇家化学学会的生物化学新闻专栏

免疫铁蛋白技术

实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术,铁蛋白免疫电镜技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。主要试剂1. 马脾铁蛋白2. 硫酸铵3. 硫酸镉4. 双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol

免疫铁蛋白技术

实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术,铁蛋白免疫电镜技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。主要试剂1. 马脾铁蛋白2. 硫酸铵3. 硫酸镉4. 双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol

铁蛋白免疫电镜实验

铁蛋白免疫可应用于:(1)检测抗原;(2)定位细胞内铁蛋白抗体位置。实验方法原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。实验材料马脾铁蛋白试剂、试剂盒硫酸铵硫酸镉双异氰酸镉二甲苯硼盐酸缓冲液硫酸铵液 PBS蒸馏水

铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤

实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。主要试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante

铁蛋白免疫电镜技术原理、材料试剂和操作方法

(一) 原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。(二)材料与试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante ,XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸盐缓冲液

铁蛋白免疫电镜技术

(一)  原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。(二)材料与试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante  XC)

铁蛋白免疫电镜实验

实验方法原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。实验材料 马脾铁蛋白试剂、试剂盒 硫酸铵硫酸镉双异氰酸镉二甲苯硼盐酸缓冲液硫酸铵液 PBS蒸馏水仪器、耗材 离心机显微镜微孔滤膜实验步骤 一、材料与试剂准备 

铁蛋白免疫电镜技术

一、 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。 二、材料与试剂 1.马脾铁蛋白 2.硫酸铵 3.硫酸镉 4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante  XC)以0.30Mol/L p

免疫学技术:铁蛋白免疫电镜技术

一、 原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。二、材料与试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante  XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸

电子显微镜免疫细胞化学技术-1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

电子显微镜免疫细胞化学技术-1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

电子显微镜免疫细胞化学技术概述

第七章 电子显微镜免疫细胞化学技术第一节 电子显微镜免疫细胞化学技术概述免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细

免疫细胞电镜技术

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发

免疫电镜技术

近年来,免疫学方法与电镜技术相结合,形成了一种免疫电镜技术(Immunoelec-tronmicroscopy,IEM),使抗原定位达到了亚细胞水平。该技术由以下环节组成:(一) 组织准备 用于免疫电镜检测的组织多种多样,所以各自在组织制备时都具有其特点。一般讲,组织力新鲜并进行无活动力状态处理,例

免疫铁蛋白电镜技术

1.基本原理 铁蛋白的分子量460kD,为一种含铁(约占23%)的蛋白质。直径10―12nm。目前常用的间接免疫染色技术是应用低分子量的双功能试剂将第二抗体与铁蛋白相连,制备标记抗体。此复合物既保留了抗体的免疫活性,又因铁蛋白含有2000―3000个铁原子的致密铁离子核心,形成四个圆形致密区,所以

免疫电镜原理和影响因素

(一) 原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电子显

免疫电镜(Immune electron microscopy)原理

(一)  原理 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标

免疫电镜(Immune electron microscopy)原理

(一)  原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结

免疫电镜技术关键的几个问题

  免疫电镜技术关键的几个问题   免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几

细胞化学技术-2

二、 免疫细胞化学技术 免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗原抗体特异结合的特性定位组织和细胞中特异大分子的一类技术。它包括光镜水平(简称免疫组化)和电镜水平(简称免疫电镜)的免疫细胞化学技术。应用免疫细胞化学技术可在原位检测细胞的各种大分子,

免疫电镜技术关键的几个问题

免疫电镜技术关键的几个问题免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几个问题进行探

电子显微镜免疫细胞化学技术-3

2.LR White 和Lr gold 是一种混合的丙烯酸单体的透明树脂,具有极低的粘度(8cps)和较强的嗜水性,因此有较强的穿透性,有利于抗体(或抗原)和免疫化学物质穿过LR树脂,达到组织结合部位。在免疫细胞化学的光镜(半薄切片)和电镜水平应用都具有良好效果。标本脱水至70%乙醇即可,能较好

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

免疫组化技术全程原理剖析以及案例解答

1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞

免疫电镜相关技术实验—病毒颗粒免疫电镜技术

病毒是极微小的生物体,用电镜观察时,由于其变形、损伤或杂质的存在,以及标本中病毒的数量有限,只靠其形态特点较难确切辨认。为了提高辨认的准确性,可应用特异性抗体,使其与病毒结合,在电镜下可清晰地辨认特异性抗体及其结合的病毒。这种将免疫学检测方法应用于电镜检查的技术就是免疫电镜技术 (Immunoele

尿液蛋白质检查(2)

二、尿液微量白蛋白测定1982年Viberti在研究糖尿病性肾病时,首先提出了微量白蛋白尿的概念,以区别于临床蛋白尿,经后微量白蛋白尿这一概念界定为尿中白蛋白排出量在3.2-22.6mg/mmolGr(30-200mg/gGr),或排出率在20-200μg/min这一范围内。即超过尿蛋白正常范围的上

免疫细胞化学在神经科学中的应用-2

七、个体和种族发育的研究  神经系统是一个历史发展的产物,有种族发育和个体发育的历史。在种系发生方面,有不同的发育规律,如一些神经肽自腔肠动物已经发生,而VIP自鱼类才开始发生。免疫反应的强弱和神经肽的含量亦因种属不同而异,如笔者对输精管的神经支配的研究表明,在大鼠、豚鼠和猫等动物,输精管管壁内有丰

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半