用细胞染色技术分选细胞造血干细胞(HSC)和髓系祖细胞
实验概要识别/分离骨髓祖细胞技术和定量RT-PCR技术的结合将是理解造血分子机制基础的一个功能强大的工具。本实验,我们描述了用于荧光激活细胞分类(FACS)技术的的小鼠骨髓祖细胞标准染色程序。主要试剂1. 1×的PBS/2%胎牛血清(FCS,无菌)2. ACK缓冲液(41.45克NH4Cl,5克KHCO3,0.18克EDTA溶解于5升H2O中,储存在4°C,过滤,消毒)3. 碘化丙啶(PI,Sigma公司),制成500×的储备液(1.0mg/mL时)保存于通风柜中4. 抗体(本文所提供的抗体用量仅仅是一个例子。每次使用一个新的批处理时,即使是相同目录编号的抗体也需要重新测定用量)5. 三色(TC=藻红蛋白,PE-Cy5标记)标记的鼠抗CD3,CD4,CD8,CD19,B220和GR-1(Caltag公司)6. 别藻蓝蛋白(APC)标记的抗C-KIT(BD Pharmingen公司)7. FITC标记的抗CD34(BD Pharm......阅读全文
用细胞染色技术分选细胞造血干细胞(HSC)和髓系祖细胞
实验概要识别/分离骨髓祖细胞技术和定量RT-PCR技术的结合将是理解造血分子机制基础的一个功能强大的工具。本实验,我们描述了用于荧光激活细胞分类(FACS)技术的的小鼠骨髓祖细胞标准染色程序。主要试剂1. 1×的PBS/2%胎牛血清(FCS,无菌)2. ACK缓冲液(41.45克NH4Cl,5克KH
IMMUNITY:胎儿时期的红细胞髓系祖细胞可分化巨核细胞
胚外卵黄囊包含第一个确定的多能造血细胞,命名为红细胞髓系祖细胞。它们起源于造血干细胞出现之前的原位,并产生红细胞、单核细胞、粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞,后者以Myb转录因子独立的方式产生。 巨核细胞在血管发育过程中发挥关键作用,特别是在分离血液和淋巴网络方面,因此了解其发育过程至关重要。胚外卵
Nature子刊发现表观调控因子在抑癌方面的新作用
来自中科院北京基因组研究所精准基因组医学重点实验室,美国迈阿密大学米勒医学院的研究人员发表了题为“Loss of Asxl2 leads to myeloid malignancies in mice”的文章,揭示了急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)重现性突变
Nature:表观调控因子在造血干细胞功能维持中的抑癌作用
来自中科院北京基因组研究所,美国迈阿密大学等处的研究人员发表了题为“Loss of Asxl2 leads to myeloid malignancies in mice”的文章,揭示了急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)重现性突变基因ASXL2在正常造血干细胞
红系祖细胞的培养
骨髓:BFU-E:(25.3±7.6)个/2×105有核细胞MNC CFU-E:(141.6±68.4)个/2×105MNC 外周血:BFU-E:(26±4)个/2×105MNC 脐血:BFU-E:(76±7)个/2×105MNC
造血干细胞分化与调控造血祖细胞
造血祖细胞:造血干细胞在一定的微环境和某些因素的调节下,增殖分化为各类血细胞的祖细胞,称造血祖细胞(hemo——poietic progenitor),它也是一种相当原始的具有增殖能力的细胞,但已失去多向分化能力,只能向一个或几个血细胞系定向增殖分化,故也称定向干细胞(committed ste
慢性髓系细胞症状
慢性髓系细胞症状 常见表现有容易感到疲劳、劳动力减低、厌食、腹部不适和胃部饱胀、体重减轻和大量出汗,但这些症状均为非特异性,发展缓慢。查体时常见面色苍白,就诊时约90%的患者有脾肿大、胸骨压痛,特别是胸骨下段压痛很常见。少见症状有类似于甲状腺功能亢进的高代谢症状(盗汗、体重减轻等),急性痛风性关节炎
粒系、红系祖细胞体外培养
【参考值】 粒系祖细胞体外琼脂培养: 正常骨髓:细胞丛与集落数之比为5~20:1CFU-C 约为50~70/105有核细胞。CFU-C浓度约为骨髓的1/10。CFU-E 为66/105有核细胞: BFU-E 正常外周血: 集落的产率影响因素很多,各实验室报告均不一致,所以各实验室
髓样祖细胞的基本信息
中文名称髓样祖细胞英文名称myeloid progenitor定 义能分化发育成多种髓系细胞的早期细胞。应用学科免疫学(一级学科),免疫系统(二级学科),免疫细胞(三级学科)
胎肝造血干细胞扩增功能单元“HSC-PLUS”
血液作为生命的河流,源源不断地为机体提供营养物质和免疫保护。作为血液源头的造血干细胞,具有自我更新和多向分化的能力,不仅能够维持机体的终身造血,也是恶性血液疾病移植治疗的重要细胞来源【1,2】。但是,造血干细胞来源不足却是限制其推广的瓶颈。如何扩增足够数量的功能性造血干细胞,一直是基础科学研究的
小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤
小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤: 1) 取小鼠骨髓用BD染色液制成约2×108单细胞悬液 2) 阻断:加入Ms Fc BlockTM置冰上15min,0.25mg/106细胞 3) 加入Lineage Panel中biotin-mAb, 每种2ml/ 106细胞,冰上15mi
Nature子刊:调控造血干细胞髓系分化潜能的分子机制
造血干细胞通过调节自我更新和分化来维持造血系统的稳态。在应急情况下,处于静息状态的造血干细胞能够快速激活,分化产生所需要的各种血液细胞,这一过程是如何调控的并不清楚。 来自中科院生物化学与细胞生物学研究所,四川大学华西医院的研究人员发表了题为“Med23 serves as a gatekee
血细胞发生的阶段
各种血细胞都起源于由间充质发生的多能干细胞。由它逐步分化成多种血细胞。血细胞的发生可以划分为三个阶段:多能造血干细胞,造血祖细胞和造血细胞(见表)。 多能造血干细胞 胚胎早期发生于卵黄囊壁的间充质。随后,经血液迁入肝、脾、胸腺和骨髓等造血器官。在造血器官中增殖、分化为造血祖细胞和持续地产生各
两篇Nature文章:干细胞命运调控者
一些不同的脊椎动物模型研究表明,造血干细胞至少部分起源于第一功能性胚内血管:背主动脉(DA)。然而,对于在背主动脉中促进造血干细胞生成的细胞类型和信号分子却并不是很清楚。发表在《自然》(Nature)杂志上的两篇新研究论文表明,包括椎骨和骨骼肌在内的许多组织的前体——一种叫做体节(somite)
细胞分选技术介绍
中文名称细胞分选英文名称cell sorting定 义根据细胞的属性,将混合细胞分为具有不同特性的几个不同类群的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
Nature:揭示在胚胎中,造血干细胞为何不产生淋巴细胞
2018年1月23日--造血 干细胞(HSC)一直被认为是所有血细胞的祖先。在我们出生后,这些多能性 干细胞产生了我们的所有血细胞谱系:淋巴系细胞(lymphoid cell)、髓系细胞(myeloid)和红系细胞(erythroid cell)。血液学家们长期以来一直致力于追踪HSC在胚胎中的
动物所揭示Ncor2调控斑马鱼造血干细胞产生的机制
造血干细胞是一群维持生命体正常生理功能所必需的多能造血祖细胞,可以发育成各种成熟的血细胞,包括:红细胞、髓系细胞和淋系细胞等。斑马鱼的造血过程分为两个阶段,即:初级造血和次级造血。以前的研究表明转录共抑制因子Ncor2在初级造血中发挥作用,但其对次级造血的影响,尤其是对造血干细胞产生的作用还不清
染色质基因分析可识别癌症起源确定白血病源头细胞类型
美国杰克逊实验室(JAX)的研究人员开发出一种新方法,通过对开放染色质进行全基因组分析,来确定导致既定类型白血病的细胞类型。这一方法对白血病的诊疗具有重要作用。相关研究11日发表在《自然—通讯》杂志上。 每种癌症都始于一个单细胞的异变。知道了癌细胞的起源细胞,研究人员就可以分析出癌症的亚型,进
染色质基因分析可识别癌症起源
近日,美国杰克逊实验室(JAX)的研究人员开发出一种新方法,通过对开放染色质进行全基因组分析,来确定导致既定类型白血病的细胞类型。这一方法对白血病的诊疗具有重要作用。相关研究发表在《自然—通讯》杂志上。 每种癌症都始于一个单细胞的异变。知道了癌细胞的起源细胞,研究人员就可以分析出癌症的亚型
巨核系祖细胞培养参考值
各个实验室报道的结果差别较大骨髓:(16.4±10.3)个2×105个MNC
SETD2调控骨髓增生异常综合征转白血病新机制
MDS是最常见的髓系恶性肿瘤之一,是起源于造血干细胞的一组异质性髓系克隆性疾病,其特征是骨髓细胞分化及发育异常且高风险向AML转化。组蛋白H3赖氨酸36甲基转移酶SETD2,在血液系统恶性肿瘤的发病过程中起着重要作用,在AML和慢性淋巴系白血病(CLL)中,SETD2低表达都显著促进白血病的发生
急性髓细胞白血病的造血干细胞移植治疗介绍
此疗法不仅可提高生存率,而且有可能使白血病根治。急性骨髓移植的患者常发生移植物抗宿主病(GVHD),5年内复发率也高达70%,因此大多数人主张如有条件应在第1次缓解(CR1)后进行骨髓移植。此时BMT治愈率高,复发率低;由于身体状况尚可,耐受性强,死于并发症者较少。但对于儿童患者,随着大规模的临
点突变小鼠助力红白血病发病机制研究
急性红白血病(AEL)通常涉及到髓系和红系的双谱系转化,但导致AEL的突变及维持双谱系白血病表型的细胞仍然未知。英国牛津大学Claus Nerlov教授领导的研究团队通过协同转录和表观遗传重编程,发现了白血病早期的祖细胞。中性粒细胞-单核细胞祖细胞(NMP)中CEBPA和GATA2突变分别通
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小液滴。然后根据上一步检测的
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小
关于造血干细胞与与肿瘤关系
大部分白血病,特别是急性髄系白血病(AML)以及慢性髄性白血病(CML)的发生,都直接或间接与造血干细胞异常相关。CML是最经典染色体易位导致造血干细胞恶变的一类常见白血病,其他多数急性髓系白血病由祖细胞直接恶变而来。造血干细胞最先获得染色体易位等主要的致病突变,但并不影响其分化为正常功能的成熟
关于造血细胞与肿瘤关系的介绍
大部分白血病,特别是急性髄系白血病(AML)以及慢性髄性白血病(CML)的发生,都直接或间接与造血干细胞异常相关。CML是最经典染色体易位导致造血干细胞恶变的一类常见白血病,其他多数急性髓系白血病由祖细胞直接恶变而来。造血干细胞最先获得染色体易位等主要的致病突变,但并不影响其分化为正常功能的成熟
造血干细胞与肿瘤关系介绍
大部分白血病,特别是急性髄系白血病(AML)以及慢性髄性白血病(CML)的发生,都直接或间接与造血干细胞异常相关。CML是最经典染色体易位导致造血干细胞恶变的一类常见白血病,其他多数急性髓系白血病由祖细胞直接恶变而来。造血干细胞最先获得染色体易位等主要的致病突变,但并不影响其分化为正常功能的成熟细胞