Antpedia LOGO WIKI资讯

流式细胞仪PI染色死细胞方法

PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。Ⅰ、材料1、 PI(e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA)2、 缓冲体系:1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scientific,Santa Ana,CA)+2%新鲜小牛血清+0.1%叠氮钠A、 PI缓冲液用缓冲液将PI溶解至终浓度为1mg/ml中,于4℃下密封避光保存1个月。B、 PI浓缩液用缓冲液将PI溶解至终浓度为500mg/ml,于4℃下密封避光保存。我们已经检测过将PI浓缩液放置数月后,并无观察到染色活性的丢失。Ⅱ、方法:将样品细胞按......阅读全文

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤介绍

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。   第一种 细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

DNA Ladder的测定方法是怎么一回事?

  不同细胞不同状态是有不同死法的,具体是细胞凋亡、坏死、还是程序性坏死,需要进一步排查分析来确定。而细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。那如何去确定哪条途径被触发,在哪个步骤被阻断,以及抑制剂是否能够抑制呢?下面介绍几种常用的测定方法。  一:细胞凋亡的形态学检测  发生

流式细胞仪之细胞凋亡检测的PI双染色法

流式细胞仪是检测悬浮的单细胞或微粒的信号分析技术,被誉为实验室的“CT”,可用于细胞凋亡检测 、细胞分选、单细胞内细胞因子表达分析等。这里简单介绍下流式细胞仪检测细胞凋亡的两种方法。第一部分 流式细胞仪 检测细胞凋亡:Heochst 33342/PI双染色法一、基本原理

检测细胞凋亡的实验方法比较-3

◆ 细胞坏死与细胞凋亡细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞

细胞凋亡的检测方法综述-5

4、检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂

常用细胞凋亡检测方法(图)-2

细胞凋亡的图片5细胞凋亡的图片6细胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察(普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜)进行定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。二、区分凋亡和坏死可将二

常用细胞凋亡检测方法(图)

一、细胞凋亡的形态学检测1、光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋

侧群干细胞(sp细胞)的分离与分选-2

这是我收集的SP分选的方法:与大家共享。 一 Hoechst染色方案 1. 在37℃循环水浴箱中预热DMEM+培养基。确保温度为37℃。 2. 重悬细胞于预热的DMEM+培养基中,浓度为106/ml,为了避免细胞留在试管中,所以在Hoech

细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)-2

2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A

细胞凋亡(TUNEL,TUNEL染色)检测技术

细胞凋亡是指为维持内环境稳定,  生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。细胞凋亡是程序性死亡过程的一种主要形式,它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合,最

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(一)

细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。第一种 细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1 光学显微镜和倒置显微镜

CD34阳性细胞计数-2

其他研究组也对影响计数结果的因素进行了广泛的检查,如通过提供统一试剂或发行标准分析方案来进行。尽管这些研究减少了一些检测差异,但要进一步地提高实验的精确性需对各个检测中心进行全面的培训并发展标准的计数方案。此项工作由Nordic Myeloma研究组广泛开展,他们组织了两个协作组来制定计数标准方案并

流式细胞仪检测细胞凋亡――Heochst 33342/PI双染色法

基本原理  经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色法

基本原理  经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)实验步骤注意事项

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜 的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细

流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)实验步骤

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色法

基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据细胞

流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色

基本原理  经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

PBMC细胞的精确计数和活性分析(二)

三、如何精确计数PBMC和活力分析检测通过AOPI染料进行双荧光计数和活力分析,是可以排除红细胞、血小板、细胞碎片等污染的精确计数方法。AO(吖啶橙)和PI(碘化丙啶)是可对DNA染色的细胞核染色试剂。其中AO可以通过完整的细胞膜,嵌入所有细胞(活细胞和死细胞)的细胞核,呈现绿色荧光;PI只能通过不

三种流式方法检测细胞凋亡

一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关

细胞凋亡的检测方法

(一) 测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜 的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。(二) 用价值流式细胞仪检测有下列特点:(1)检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的

流式细胞仪检测细胞凋亡:Heochst 33342/PI双染色法

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

Caspase活化、核染色质固缩及DNA片段化

Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础,具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证,包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选,能够实现各种细胞功能的分析:细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞

无需染色的细胞活力检测

细胞活力是总细胞中活细胞所占的百分比,其中台盼蓝染色方法最常见。台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色,而活细胞能阻止染料进入细胞内,故可以鉴别死细胞与活细胞。激光全息细胞成像及分析系统可以实时监测细胞死亡过程,以及通过图像进行记录。 全息技术无需荧光和染料标记就可以得到细

细胞凋亡的三种流式检测方法

一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点:1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相

流式细胞仪检测细胞凋亡实验——Heochst 33342/PI双染色法

实验方法原理流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细胞”,因此正常细胞和凋亡细胞归为活细胞。活细胞染料如Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高,Hoechst 33342在凋亡细

流式细胞仪检测细胞凋亡实验-Heochst 33342/PI双染色法

实验方法原理流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细胞”,因此正常细胞和凋亡细胞归为活细胞。活细胞染料如Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高,Hoechst 33342在凋亡细

流式检测细胞周期

线粒体膜电位(MMP):使用几种染料中的其中一种就可以检测到细胞在凋亡过程中MMP的降低,如双氰基-双己氧基羰基靛蓝,它能够隐藏在活细胞的线粒体内。当MMP体系崩溃时,细胞的荧光就会减少。磷脂酰丝氨酸(PS)在细胞表面的分布情况:PS一般分布在质膜的内侧上。在细胞凋亡过程中,PS残余物会曝露在细胞表