非荧光标记的遗传标记分析技术

近年来,美国GENTEON公司采用激光致导的动态荧光检测技术(Dynamic fluorescence),结合多通道毛细管电泳技术,研制出Capella 400型全自动基因分析系统。该仪器采用动态荧光检测技术,彻底消除了传统荧光DNA标记检测的高成本和复杂性,可精确有效到检测未经标记的单链或双链核苷酸。Capella 400系统是全球迄今为止首创的第一台全自动384道毛细管电泳仪,该系统采用ZL化学品与一个具有精密光学结构的旋转圆柱状毛细管阵列相组合,同一系统可进行多种核酸的高通量分析,可应用于SNP、STR、RFLP/AFLP分析,寡聚核苷酸片段质量控制分析、PCR产物质量控制分析、基因表达分析、DNA测序等。......阅读全文

荧光二抗如何选择Dylight荧光与传统荧光标记的比较

荧光二抗的选择——Dylight荧光与传统荧光标记的比较顾名思义,荧光二抗通常指代的就是带荧光团标记的二抗,这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。常见的荧光团包括FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Cy系列等。比如FITC即异硫*酸荧光素,是目前应用最

分子遗传学词汇非选择性标记

微生物遗传学上:观察者在一次试验中没有使用的,观察对象具体的(遗传)标记。

无需荧光标记也能检测基因

美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料,开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法,有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。  科学家称,他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症,还能探测出在组织中存在的病毒,同时可用于法医

无需荧光标记也能检测基因

  据物理学家组织网近日报道,美国佐治亚大学的科研人员采用专门设计的纳米材料,开发出了无标记的新型DNA和RNA检测方法,有望降低常用基因检测技术的成本和复杂性。相关研究报告发表在近期出版的《美国化学学会期刊》上。   科学家称,他们的发现或可用于帮助医生诊断白血病和淋巴癌等特定的癌症,还能探测出

绿色荧光蛋白分子标记的研究

  分子标记  作为一种新型的报告基因,GFP已在生物学的许多研究领域得到应用。利用绿色荧光蛋白独特的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签(protein tagging),即利用DNA重组技术,将目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内

荧光标记杂交信号的检测方法

使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为D

标记抗体、配体等常用的荧光探针

 标记抗体、配体等常用的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜不仅可用免疫荧光分析固定的细胞或组织切片,还可用于分析活细胞,得到特异性抗体或其他荧光免疫探针识别靶分子的表达、定位、分布变化等信息。标记抗体、配体或蛋白质等较通用的有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC

荧光素标记试剂与酶标试剂

(1)酶标试剂:酶标抗体仅需适当底物和普通光学显微镜即可高度敏感地检出抗原。由于信号是通过吸收光的差异,而非发射光来检测,底物的不溶性显色产物分布在酶所在位置的周围区域,因此这种检测方法尚不能达到荧光技术的分辨率。 酶反应后出现沉淀,在酶所处位置周围产生不溶性显色产物,通过底物的显色来检出

FITC荧光素标记抗体的操作步骤

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般zui多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下:F

肿瘤细胞的标记及活体荧光成像

摘要 以绿色荧光蛋白( GFP) 作为标记基因转入人类肺癌细胞系(ASTC2a21) , 经800 mg/ L G418 筛选, 获得5 株高表达细胞系. 利用流式细胞仪对GFP 表达的稳定性进行了初步研究, 结果表明本实验中有些细胞株间GFP 表达稳定性有显著差异( P < 0101) . 将稳定

荧光染料CFSE活细胞标记的特点

荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强

荧光标记杂交信号的检测方法

使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为D

细胞骨架的荧光探针标记方法

细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微丝(microfilament, MF),中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组

荧光标记杂交信号的检测方法

由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在

荧光染料CFSE活细胞标记的特点

荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强

探针的非放射性标记技术2

一;仪器:同上 二:试剂:ECL标记盒,其余同上 三:操作:1:将待标记的DNA稀释至10ng/ml 2:将上述DNA在100℃5分钟,冰浴5分钟 3:离心后加入10ulECL标记混合物,混合均匀 4:加10ul戊二醛溶液混匀,37℃20分钟,此反应

探针的非放射性标记技术1

核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的寡核苷酸链。核酸探针有双链DNA探针、单链DNA 探针、RNA探针和寡核苷酸探针。特异性探针来源于目的核酸的酶切片断、dd-PCR等差异显示中出现的差异片断、AFLP、RFLP、RAPD、SSR、CFLP等标记实验中出现的特异性基因标记片断。可以通过人

概述荧光标记物种类及荧光免疫层析技术应用

  荧光免疫层析分析方法具有灵敏度高、稳定性好、受自然荧光干扰低等优点,成为食品质量安全快速检测分析研究的热点。用于荧光免疫分析的标记物主要包括荧光素、量子点、上转换纳米粒子等。

免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗...2

免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗体的方法 2P3(2)Chadwick氏法 试剂和材料:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸盐缓冲盐水、1%硫柳汞、离心机及离心管、三角烧瓶(25 ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500 ml

免疫荧光组织(细胞)化学技术——荧光素及其标记抗...1

制备荧光抗体是免疫荧光组织化学的重要技术之一,制备特异性强和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高效价的抗体。 一、荧光素 荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光,停止能量供给,发光也瞬时停止。可以产生明亮荧光的染料物质,称荧光素。目前主要常用于标记抗体的荧光素如下: 1、异硫氰酸

用于标记的荧光素应具备哪些条件

  1.应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,结合后不易解离,而未结合者易清除;  2.荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率;  3.荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明;  4.与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质;  5.标记方法简单、安全无毒;

免疫荧光标记技术是什么

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

免疫荧光标记技术是什么

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

免疫荧光标记技术的原理

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。

多肽荧光标记——FITC修饰和AMC修饰

  荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操

FITCAMC等荧光标记技术

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简

细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法

实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,

多肽荧光标记——FITC修饰和AMC修饰

  荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共

荧光探针标记基团fam和hex的区别

TAMRA和BHQ和引物关系不大,这个是淬灭基团。TAMRA主要淬灭FAM,HEX,VIC的荧光BHQ有3种BHQ1、BHQ2和BHQ3,其中BHQ1和TAMRA的淬灭波长相近引物设计和淬灭基团关系不大