叶绿体色素含量的测定——分光光度法

叶绿体色素溶液各组成成分在可见光谱中具有不同的特征吸收峰。因此,应用分光光度计在某一特定波长下所测定的吸光度,根据经验公式即可计算出色素溶液中各色素浓度,不同溶剂所提取的色素吸收光谱有差异,因此,应使用不同的计算公式。叶绿体色素的提取常用丙酮和乙醇有机溶剂。叶绿体色素 80 %丙酮提取液中叶绿素 a 和 b 及类胡萝卜素分别在 663nm 、 646nm 和 470nm 波长下有最大吸收峰,而 95 %乙醇提取液中它们则在 665nm 石 49nm 和 470nm 波长下具有最大吸收峰,据此所测得的吸光度值代人不同的经验公式(见结果计算),计算出叶绿体色素丙酮(或乙醇)提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度,并依据所使用的单位植物组织(鲜重、干重或面积),求算出色素的含量。[ 实验目的 ]掌握分光光度法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算......阅读全文

叶绿体色素含量的测定——分光光度法

叶绿体色素溶液各组成成分在可见光谱中具有不同的特征吸收峰。因此,应用分光光度计在某一特定波长下所测定的吸光度,根据经验公式即可计算出色素溶液中各色素浓度,不同溶剂所提取的色素吸收光谱有差异,因此,应使用不同的计算公式。叶绿体色素的提取常用丙酮和乙醇有机溶剂。叶绿体色素 80 %丙酮提取液中叶绿素 a

叶绿体色素的定量测定

【原理】根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的光密度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即:D=kCL式中:k为比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,k为该物质的比

叶绿体色素的定量测定

实验方法原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的光密度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即:D=kCL式中:k为比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,k为该物质

叶绿体色素理化性质测定

【原理】   叶绿素是一种二羧酸—叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的二羧酸酯,故可与碱起皂化反应而生成醇(甲醇和叶绿醇)和叶绿酸的盐,产生的盐能溶于水中,可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开;叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性,具有各自特异的吸收光谱,可用分光镜检查或用分光光度计精确测定;叶绿素吸收光子而

叶绿体色素的理化性质测定

实验概要叶绿素是一种二羧酸—叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯,故可与碱起皂化反应而生成醇(甲醇和叶绿醇)和叶绿酸的盐,产生的盐能溶于水中,可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开;叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性,表现出一定的吸收光谱,可用分光镜检查或用分光光度计精确测定;叶绿素吸收光量子而转变成激发态,激

通过叶绿体色素含量的测定,可以解决哪些生产实践问题

根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长下测定其消光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯–比尔定律,某有色溶液的消光度 D 与其中溶质浓度 C 和液层厚度 L 成正比,即:D = kCL ( 17 – 1 )

叶绿体和光合色素

一、叶绿体 叶片是光合作用的主要器官,而叶绿体(chloroplast,chlor)是光合作用最重要的细胞器。(一)叶绿体的发育、形态及分布1.发育 高等植物的叶绿体由前质体(proplastid)发育而来,前质体是近乎无色的质体,它存在于茎端分生组织中。当茎端分生组织形成叶原基时,前质体的双层膜中

叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验

实验方法原理1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各种

叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验

实验方法原理 1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各

叶绿体色素的定量测定_混合液浸提法

实验方法原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的光密度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即:D=kCL式中:k为比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,k为该物质

叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验

实验方法原理1. 溶解性:叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂,常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种,如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中(即流动相和固定相)间有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的各种

叶绿体色素的提取与分离

植物叶绿体色素主要有三类:1)叶绿素 2)类胡萝卜素 3)藻胆素。高等植物叶绿体中含有前两类,藻胆素仅存在于藻类植物中。实验方法原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(

叶绿体色素的提取与分离

一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等

叶绿体色素的提取与分离

一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等

提取与分离叶绿体色素的原理

提取叶绿体色素的原理是叶绿素是叶绿酸的酯,在碱的作用下,可使其酯键发生皂化作用,生成叶绿酸的盐,能溶于水。分离叶绿体色素的原理是类胡萝卜素中,胡萝卜素是不饱和的碳氢化合物,β—胡萝卜素水解可生成2分子维生素A,叶黄素是由胡萝卜素衍生的二元醇,不能与碱发生皂化反应,根据这一点,可以将叶绿素和类胡萝卜素

叶绿体色素的分离(柱层析法)

原理 吸附剂如蔗糖、Al2 O3 、MgO、CaCO3 等对各种物质有不同的吸附力,吸附力的大小随吸附剂的种类而异;同一吸附剂在不同的溶剂中吸附力的大小也不同。被吸附的物质由于其结构中极性基团的种类和数量不同,吸附力也不相同。各种官能团的极性大小次序为;-CH2 -CH2 -<-CH=

叶绿体色素的分离纸层析法实验

叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构

叶绿体色素的分离纸层析法实验

实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。仪器、耗材色层分析用滤纸  

叶绿体色素的分离纸层析法实验

实验方法原理 叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。仪器、耗材 色层分析用滤纸培

拓展:叶绿体中色素的提取和分离

  色素的提取和分离是现在的考试模式中处于重要的地位的实验,有一次考试中出现了教材没有的答案“纸层析法”,所以,在教学中还需要适当拓展,甚至需要实验改进。  例如,有一次,学生问到定量测定色素含量实验如何进行,要回答这个问题,需要选修教材中学到的方法的灵活应用,如光密度值的定量测定,得到色素的含量情

细胞色素C溶液的含量测定方法

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液精密量取含铁量项下的供试品溶液1ml置50ml量瓶中,用鉴别(2)项下的磷酸盐缓冲液稀释至刻度,加连二亚硫酸钠约15mg,摇匀。测定法取供试品溶液,在约550nm的波长处,以间隔nm找出最大吸收波长,测定吸光度,按细胞色素C的吸收系数(E1)为23

测定植物光合色素含量用什么方法分离色素

柱色谱,薄层色谱等色谱法

叶绿体中色素的提取和分离知识总结!

  “叶绿体中色素的提取和分离”是高中生物教材中的一个关键实验,理解和记忆内容较多,尤其是其中的一些注意事项是考试中的一个热点,好的知识和大家一起分享。  一、 为什么要选新鲜绿色的幼嫩叶片?  因为叶绿色含N﹑Mg,而老叶中这两种矿质元素很多已经分解转移,所以鲜绿色的幼叶中叶绿素的含量高,适合于实

叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)

  原理   叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用丙酮提取。 分离色素的方法有多种,纸层析是其中最简便的一种。当溶剂不断地从层

细胞色素C的制备及含量、活力测定

一、实验目的  (1)通过细胞色序C的制备,了解制备蛋白质制品的一般原理和步骤(2)掌握制备细胞色素C的操作技术及含量的测定方法二、实验原理  细胞色素是一类含有铁 啉基团的电子传递蛋白,只存在于需氧细胞中。细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用。细胞色C (cytochrome c) 是细胞色素一

细胞色素C的制备及含量、活力测定

  一、实验目的    (1)通过细胞色序C的制备,了解制备蛋白质制品的一般原理和步骤    (2)掌握制备细胞色素C的操作技术及含量的测定方法    二、实验原理    细胞色素是一类含有铁 啉基团的电子传递蛋白,只存在于需氧细胞中。细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用。细胞色C (cytoch

叶绿素含量测定方法

叶绿素是光合作用所必须的物质,没有叶绿素,就不可能正常地进行光合作用,使光能转化为化学能。叶绿素可见于绿色植物,蓝绿藻等生物体,分为叶绿素a,叶绿素b,叶绿素c,叶绿素d四种。叶绿素存在于叶绿体的类囊体内。叶绿素含量测定的三种方法 叶绿素含量跟光合作用速率、植物营养状况等指标密切相关,通常,我们会通

叶绿体色素的提取与分离和理化性质

(一)原理: 叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,

注射用细胞色素C的含量测定方法

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品5支,各加磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠1.38g与磷酸氢二钠31.2g,加水适量使溶解并制成1000ml,调节pH值至7.3)适量使溶解,并全量转移至同100ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液稀释至刻度,摇匀。精密量取2ml,置10ml量瓶中,用上

细胞色素C注射液的含量测定方法

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液精密量取本品1ml,置50ml量瓶中,用磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠1.38g与磷酸氢二钠31.2g,加水适量使溶解并制成1000ml,调节pH值至7.3)稀释至刻度加连二亚硫酸钠约15mg,摇匀测定法取供试品溶液,在约550nm的波长处,以间隔0.5