CoIPProtocol3
免疫共沉淀技术路线准备工作：预冷PBS，RIPA Buffer，细胞刮子（用保鲜膜包好后，埋冰下），离心机1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次，最后一次吸干PBS；2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶，0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶)3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下，把悬液转到1.5EP管中，4℃，缓慢晃动15min（EP管插冰上，置水平摇床上）4. 4℃，14000g离心15min，立即将上清转移到一个新的离心管中5. 准备Protein A agarose，用PBS 洗两遍珠子，然后用PBS配制成50%浓度，建议减掉枪尖部分，避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠6. 每1ml总蛋白中加入100μl Protein A琼脂糖珠（50%），4℃摇晃10min（EP管插冰上，置水平摇床上），以去除非特异性杂蛋白，降低背景7. ......阅读全文
Co－IP－Protocol3
免疫共沉淀技术路线准备工作：预冷PBS，RIPA Buffer，细胞刮子（用保鲜膜包好后，埋冰下），离心机1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次，最后一次吸干PBS；2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶，0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿
Co－IP－Protocol2
Protocol1 调制protein A sapharoseprotein A sapharose 5ml 溶于20ml含0.02%NaN3的PBS离心2000转2分，去上清，在沉淀加0.02%NaN3的PBS，离心后去上清，重复2次，最后沉淀加20ml含0.02%NaN3的PBS，冷藏保存用单抗
Co－IP－Protocol1
一 原理：IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A"特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗
Co－IP－Protocol4
工作液配制：配制100ml的modified RIPA buffe：1. 称取790mg 的Tris-Base，加到75ml 去离子水中，加入900mg的NaCl，搅拌，直到全部溶解，用HCl调节PH值到7.42. 加10 ml 10%的NP-403. 加2.5 ml 10%的去氧胆酸钠，搅拌，直到
CoIP
Protocol for Co-IP of different proteins with RFP-MeCP2Preperation of cells (for p100):• 1st day split 293T EBNA cells in DMEM (high glucose +
免疫共沉淀(CoIP)
免疫共沉淀可应用于：（1）测定两种目标蛋白质是否在体内结合；（2）确定一种特定蛋白质的新的作用搭档；（3）分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。实验方法原理以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非
免疫共沉淀(CoIP)
实验方法原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如
免疫共沉淀(CoIP)
实验方法原理 以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果
免疫共沉淀（coIP）实验案例分享
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:
免疫共沉淀(CoIP)详细步骤教程（一）
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用
免疫共沉淀(CoIP)的原理及步骤
一．原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋
免疫共沉淀(CoIP)详细步骤教程（二）
注意：在准备做磷酸（酯）酶实验的时候，不加磷酸酯酶抑制剂工作液配制：配制100ml的modified RIPA buffe：1. 称取790mg 的Tris-Base，加到75ml 去离子水中，加入900mg的NaCl，搅拌，直到全部溶解，用HCl调节PH值到7.42. 加10 ml 10%的NP-
ELISPOT－Protocol
实验概要The Elispot (Enzyme Linked Immuno-Spot) assay provides an effective method of measuring the antibody or cytokine production of immune cells on t
ELISPOT－protocol
实验概要The procedure below is a general guideline procedure for ELISPOT. Abcam ELISPOT kits have been designed for detection of various cytokines and g
NAi－protocol
siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
ELISPOT－Protocol
实验概要The Elispot (Enzyme Linked Immuno-Spot) assay provides an effective method of measuring the antibody or cytokine production of immune cells on t
Immunoprecipitation－Protocol
实验概要Immunoprecipitation is a procedure by which proteins or peptides that react specifically with an antibody are removed from solution and examined
PCR－protocol
PCR reactionProtocol for 50µl reaction - adjust amounts if necessary, for a 20µl reaction use the same volumes of primer and dNTP-mix, but adjust the
RLGS－protocol
A. Preparation of DNA SolutionIn the case of rice, for example This method may be appllicable for many grass species and some other plants.
RNAi－protocol
siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
Immunoblot－Protocol
This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives. Investigators must be aware that they will need to tailor
ELISA－protocol
ELISA protocol：1.取5－10ul BMMY表达上清用0.05M NaHCO3稀释到100ul铺ELISA板，37度或室温振荡大于1小时。注意一定要做一个GS115空菌株表达上清作为阴性对照，最好还找一个带有histag的蛋白作为阳性对照。2.TPBS洗板3次，方法：倒掉铺板液，倒置于
大鼠IP10(IP10)ELISA检测法
大鼠IP-10(IP-10)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 IP-10(interferon-inducible protein 10) 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-10与单抗结合，加入生
大鼠IP3(IP3)ELISA检测法
大鼠IP-3(IP-3)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 IP-3(interferon-inducible protein 3) 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-3与单抗结合，加入生物素
猪IP10(IP10)ELISA试剂盒
猪IP-10(IP-10)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗猪 IP-10(interferon-inducible protein 10) 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-1
小鼠IP3(IP3)ELISA试剂盒
小鼠IP-3(IP-3)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 IP-3 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-3与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠IP-3，形成免疫复合物连接在板上，辣根过
人IP3(IP3)ELISA试剂盒
人IP-3(IP-3)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 IP-3(interferon-inducible protein 3) 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-3与单抗结合，加入生物素化的
人IP10(IP10)ELISA试剂盒
人IP-10(IP-10)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 IP-10/CXCL10(interferon-inducible protein 10) 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-10与
小鼠IP10(IP10)ELISA试剂盒
小鼠IP-10(IP-10)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 IP-10(interferon-inducible protein 10) 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 IP-10与单抗结合，加入生
Transformation－Protocol－for－Arabidopsis
Transformation Protocol for Arabidopsis – Abbreviated Germinate seed in pots ↓ 4 weeks Streak bacteria onto YM/MinA ↓ 2-3 days 28°C Spray/dip ba