微生物培养基配制与灭菌方法及步骤

微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。为了达到特定要求的研究,需要进行培养基配制和灭菌,那么微生物培养基该如何配制与灭菌呢?1.配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分,对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化.并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。2.调节pH值用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,......阅读全文

微生物培养基配制与灭菌方法及步骤

 微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、

微生物培养基配制与灭菌方法及步骤

微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一

微生物培养基配置与灭菌方法及步骤

微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一

常用的微生物培养基及配制方法

  1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)  牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。  2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)  可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7

组织培养培养基配制、灭菌及保存

培养基的配制1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000

培养基的配制及高压蒸汽灭菌2

4.过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察.一般无特殊要求情况下,这一步是可以省去的;5.分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或者三角烧瓶内:(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的一半为宜。(2)固体分装分装试

培养基的配制及高压蒸汽灭菌1

培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配制而成的一种混合营养基质,用以培养或分离各种微生物。因此,营养基质应当有微生物所能利用的营养成分(包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素)和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。  一、按成分的不同分  1.天然培养基  

培养基的配制及高压蒸汽灭菌3

   在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时,压力与温度的关系见表Ⅵ-4。  一般培养基用1.05kg /cm2,121.3℃15―

配制培养基的方法和灭菌小知识

培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。 培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培

培养基配制和灭菌指南

培养基配制好后需要立即灭菌培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多,根据配

微生物实验培养基配制方法

  1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)  牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。  2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)  可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H

培养基的配制步骤

  玻璃器皿的洗涤和包装,玻璃器皿的洗涤,玻璃群皿在使用前必须洗剧干净,将锥形瓶、试管、培养皿、最筒等没人含有洗涤剂的水中,用毛刷洗,然后用自来水及蒸馆水冲净。移液管先用含有洗涤利的水浸泡,再用自来水及蒸馆水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘千后备用。  培养皿的包装,灭菌前玻璃器皿的包装,培养皿

配制培养基的步骤

1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化。并不断搅拌,以免

配制培养基的步骤

培养基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH:用1N的盐酸或1N的 NaOH把

微生物培养基常见的灭菌方法

  在发酵过程中,培养基灭菌主要有以下几个原因:如不灭菌,会使生物反应的基质或产物,因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降;杂菌也会产生代谢产物,这就使产物的提取更加困难,造成得率降低,产品质量下降;杂菌大量繁殖后,会改变反应液的pH值,使反应异常;有些杂菌会分解产物,使生产失败;如果发生噬菌体污染

组织培养中培养基配制灭菌及保存操作流程

培养基的配制 1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂  放在一边备用。 2、将1中称好的琼脂  加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入

培养基配制方法

配制培养基有两种方法可以选择:一是购买培养基中所有化学药品,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如MS、B5等。

LB培养基的配制实验步骤

实验步骤1. LB 培养基Tryptone10 gYeast Extract5 gNaCl10 g加水至 1000 mL(pH 7.2,固体培养基加 1.8% 琼脂粉)。2. LB 抗性筛选培养基待灭菌后的 LB 固体培养基温度降至 50℃左右,加入抗生素储存液至终浓度 50 µg/mL,即每毫升培

培养基灭菌方法

培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则

培养基灭菌方法

培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则

培养基灭菌方法

1.灼烧灭菌将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内,在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要

几种常见的微生物基础实验(一)

     本文介绍几种常见的微生物基础试验的目的、原理、内容等,以便刚刚接触微生物的同志们对试验有个基本的认识. 实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的    1、掌握配制培养基的一般方法和步骤;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法;    2、了解培养基的配制原理;了解常见灭菌

简介微生物培养基常见的灭菌方法有哪些

  (一)化学物质灭菌  原理:药物与微生物细胞中的成分反应,使蛋白质变性酶失活。使用范围:器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌,不能用于培养基灭菌。  常用的灭菌剂:甲醛 37%  戊二醛 2%  高锰酸钾 0.1%-0.25%  苯酚 0.1%-0.15%  漂白粉 5%  过氧乙酸 0.02%

DPBSA-的配制与灭菌

实验方法原理不断地搅拌将干粉溶解,调整至终体积,检测 pH 和传导率,按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉实验材料D-PBS 干粉超纯水试剂、试剂盒搅拌粒仪器、耗材容器抽吸器硼硅酸盐玻璃器皿传导率测量仪或渗透压计pH 计高压灭菌器高压灭菌胶带或无菌指示标签实验步骤1. 在容器中加入1L 超纯水

DPBSA-的配制与灭菌

实验方法原理不断地搅拌将干粉溶解,调整至终体积,检测 pH 和传导率,按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉实验材料D-PBS 干粉                                                                  超纯水            

DPBSA-的配制与灭菌

实验方法原理 不断地搅拌将干粉溶解,调整至终体积,检测 pH 和传导率,按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉实验材料 D-PBS 干粉超纯水试剂、试剂盒 搅拌粒仪器、耗材 容器抽吸器硼硅酸盐玻璃器皿传导率测量仪或渗透压计pH 计高压灭菌器高压灭菌胶带或无菌指示标签实验步骤 1. 在容器中加入1

DPBSA-的配制与灭菌

            实验方法原理 不断地搅拌将干粉溶解,调整至终体积,检测 pH 和传导率,按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉 实验材料 D-PBS 干粉

外周血培养基配制方法

一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(

常用培养基的制备、灭菌与消毒

一、实验目的 了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和

关于微生物培养的实验常用培养基的制备、灭菌与消毒

  一、实验目的  了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。  二、实验原理  培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、