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用噬菌粒载体制备单链DNA

实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。 实验材料 大肠杆菌 F' 菌株 大肠杆菌 DH11S 试剂、试剂盒 卡那霉素 SDS 溶液 蔗糖凝胶加样缓冲液 仪器......阅读全文

筛选pⅧ噬菌粒库

实验概要大量的方法已经被设计用于筛选大规模的噬菌体肽库。其中最简单的形式就是使用直接吸附的方式将靶分子固定于一个固体支持物上,然后使其接触到噬菌体库。那些不能与之结合的噬菌体在一系列洗涤的过程中将会被除去,而可以结合的噬菌体克隆将在酸性洗脱后被重新获得。主要试剂1. 磷酸盐缓冲液2. PBS/0.1

关于噬菌粒的简介

  噬菌粒是一类人工构建的含有单链噬菌体包装序列、复制子以及质粒复制子、克隆位点、标记基因的特殊类型的载体。它是包含了丝状噬菌体大间隔区域的质粒,是一种双链质粒,含噬菌体来源的复制子,在细菌的细胞中出现有辅助噬菌体的情况下,可被诱导成单链DNA噬菌粒,同时具有噬菌体和质粒的特征,可以像噬菌体或质粒一

关于噬菌粒的特征介绍

  1、双链DNA既稳定又高产,具有常规质粒的特征;  2、免除了将外缘DNA片段从质粒亚克隆于噬菌体载体这一繁琐又费时的步骤;  3、由于载体足够小,故可得到长达10kb的外源DNA区段的单链。

关于噬菌粒的基本介绍

  噬菌粒(phagemid)是带有丝状噬菌体复制起始点的质粒。  噬菌粒本身不含噬菌体蛋白编码基因,在导入大肠杆菌后不产生子代噬菌体,感染时要用辅助噬菌体,辅助噬菌体编码的噬菌体蛋白可将单链噬菌粒DNA 包装成噬菌体病毒颗粒释放出来,能再次感染大肠杆菌而繁殖。

pⅧ噬菌粒库的构建

实验概要本实验构建了pⅧ噬菌粒库,主要包括:载体的准备,插入片段的准备,连接插入片段与BstⅪ消化的p8V5载体及扩增与储存。主要试剂p8V5噬菌粒载体(AHymaxlnc)LB氨苄青霉素培养基(1%蛋白胨,0,5%酵母提取物, 0.5% NaCl,100ug/m1氨苄青霉素)BstⅪ限制性内切酶(

噬粒(phagemid)

Phagemid Related Protocol (Erik)provides procedures for phagemid lysate preparation, titering phagemid, determining uracil incorperation and SS DNA pr

用噬菌粒载体制备单链DNA

实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。实验材料

用噬菌粒载体制备单链DNA

噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。本实验来源「分子克隆实验指

用噬菌粒载体制备单链DNA

            实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外,这些质粒通常是高拷贝数的,并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白,但含有全部的顺式作用序列,该作用是病毒 DNA

λ噬菌体噬菌斑的挑取实验

遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物,也可用于以后的分析。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个