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融合蛋白酶解实验

基本方案 用 Xa 因子 实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白 试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子/ml 反应缓冲液 2 × SDS 样品缓冲液 仪器、耗材 沸水浴 实验步骤 1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl......阅读全文

融合蛋白酶解实验

基本方案 用 Xa 因子             实验方法原理 实验材料

融合蛋白酶解实验

实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子/ml 反应缓冲液2 × SDS 样品缓冲液仪器、耗材 沸水浴实验步骤 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl 含有 1 μl 200μg /ml Xa 因子的 1 mg/ml 融合蛋白反应

融合蛋白酶解实验_ 用 Xa 因子

使用基因融合表达系统在大肠杆菌中表达外源基因已越来越受欢迎。其原因在很大程度上归因于融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白。谷胱甘肽转移酶以及硫氧还蛋白均被证实能非常成功地生产正确折叠、有生物活性的蛋白质。其中每一种都备有方便的纯化方法,可将融合蛋白与细胞污染物分开。所产生的蛋白质适用于进行其生物学

细胞融合实验

实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结

细胞融合实验

实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell  fusion),即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也

体细胞融合实验——悬浮培养细胞的融合

实验材料细胞试剂、试剂盒PEG1000仪器、耗材离心管实验步骤1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。2. 倒尽上清。3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,20

体细胞融合实验——单层培养细胞的融合

实验材料细胞试剂、试剂盒PEG-1000仪器、耗材培养基实验步骤1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养皿或瓶中

体细胞融合实验

单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合             实验材料 细胞

GST 融合蛋白沉降实验

实验材料 细胞裂解液其中蛋白质 35S 用标记试剂、试剂盒 裂解缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶探针GST 蛋白仪器、耗材 沸水浴翻转祥品旋转仪谷胱甘肽琼脂糖球珠实验步骤 材料缓冲液和溶液将缓冲液稀释到适当浓度。裂解缓冲液20 mmol/LTris-Cl(pH8.0)200 mml/L NaCl1 mm

体细胞融合实验

单层培养细胞的融合 悬浮培养细胞的融合             实验材料 细胞 试剂、试