使用流式细胞仪进行人类单核细胞亚群的全血染色
一、材料与试剂1. 抗体（1）鼠抗人CD56FITC（BD,340410）（2）鼠抗人CD2FITC（BD555326）（3）鼠抗人CD19FITC（555412）（4）鼠抗人CD14PerCP（Invitrogen,MHCD1431）（5）鼠抗人CD16PacBlue（BD,558122）（6）鼠抗人HLA-DRAPC-Cy7（BioLegend,307617）2. 其他材料（1）带K3EDTA的玻璃全血管（BDVacutainer366450）（2）10×BDFACS裂解液（BDPharmigen349202）（3）20%甲醛（Tousimis1008A）（4）PBS（CalciumandMagnesiumfree,Gibco20012-027）（5）5 mL 聚丙烯管（BDFalcon352063）二、仪器1. BDLSRII流式细胞仪三、步骤1. 将人血加入到带K3EDTA的玻璃全血管，然后轻摇几次混合血液。2......阅读全文
使用流式细胞仪进行人类单核细胞亚群的全血染色
一、材料与试剂1. 抗体（1）鼠抗人CD56FITC（BD,340410）（2）鼠抗人CD2FITC（BD555326）（3）鼠抗人CD19FITC（555412）（4）鼠抗人CD14PerCP（Invitrogen,MHCD1431）（5）鼠抗人CD16PacBlue（BD,558122）（6）鼠
流式细胞仪检测细胞信号研究的几个优点
随着收集数据的能力，在单个细胞的水平，流式细胞仪检测细胞信号研究提供了几个优点流式细胞仪与裂解为基础的方法，有利于异构信号反应的检测和分析。因此，有可能区分一个强大的蛋白磷酸化响应于一个更小的，但更均匀的响应细胞与一小口。此外，特定的细胞表面标志物的复杂的细胞混合物，如全血细胞亚群内的荧光抗体，蛋白
如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析
简单的概括：1、先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞；2、然后把淋巴细胞显示到柱状图，gate出CD3阳性的（T细胞）；3、再把T细胞显示到散点图，横坐标，纵坐标分别为CD4和CD8。
采用－CytoFLEX－对－PBMC－的－T－细胞－受体进行表征分析
概述：如何借助 DuraClone 通过流式细胞术对人外周血单核细胞 (PBMC) 进行染色，以进行 T 细胞受体分析。如何运用 CytoFLEX 流式细胞仪和 DuraClone 对 TCR 亚群进行鉴定。介绍：T 细胞在免疫系统的功能与调控中扮演着重要角色。成熟的 T 细胞可以同时表达 CD
人末梢血微量全血培养染色体显示法
实验概要 人末梢血微量全血培养染色体显示法实验步骤1．培养液准备：取15ml培养瓶数个，每瓶内分别充入5ml培养液（pH 7.2），内含：1640培养液（含10％～15％小牛血清），PHA 0.1ml，青霉素100单位和链霉素100微克/毫升 培养液2．抽血针管准备：取2～5ml针管一
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉亲和素或
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
西工大团队研发太空乘员健康检测仪－实现在轨“验血”
西工大研制的全血全自动预处理样机 随着宇航技术的飞速发展，适用于普通人的太空旅行计划计日可待，但太空旅行短则几日长则一年，那么如何快速有效检测乘客在旅行途中身体健康情况？日前，西北工业大学空天微纳系统教育部重点实验常洪龙教授课题组与迈瑞医疗合作研制出适用于太空环境的健康检测仪，成功实现在微重力环
鉴定细胞产生的细胞因子等炎症介质的分析
各种激活类型的细胞可以分泌细胞因子，趋化因子和其他炎症介质，如穿孔素，粒酶免疫或炎症反应的一部分。如ELISA和BD?式微珠阵列（CBA）测量整个细胞群所产生的分泌蛋白的方法。与此相反，细胞内流式细胞仪允许于感兴趣的细胞群，表型鉴定的个别类型的细胞产生的细胞因子等炎症介质的分析。 流式细胞仪检测细
激活的淋巴细胞内细胞因子的检测
简介细胞因子是可溶性蛋白，在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。细胞因子可以调节细胞生长、分化以及一系列功能，并且介导正常与病理性免疫应答。细胞因子是具有效应及调节双重作用的独特蛋白。近来研究显示，细胞因子可以具有多重功能，作用于多个细胞亚群并可在不同亚群细胞表达。早期细胞因子表达与T细胞功能相关性
流式细胞仪检测外周血树突状细胞
概述树突状细胞（DC）的主要功能是吸收抗原，进行加工，并向T淋巴细胞呈递。其它抗原呈递细胞也有此功能，如B淋巴细胞和单核细胞。但是，与其它细胞不同的是，DC细胞具有诱导初发免疫反应的独特功能，例如，可以活化处女T细胞（Naive T cell）。DC细胞存在于外周淋巴组织中，已在血液和非淋巴器官中发
用母体血进行染色体异常的产前诊断实验
实验材料Ficoll 淋巴细胞分离液CD3、CD13 抗体均用生物素标记试剂、试剂盒PBS 溶液台盼蓝溶液. 量化链霉亲和素磁化稀土FBS溶液FITC 标记的 CD71 膜抗体多聚甲醛carnoy 固定液乙醇溶液仪器、耗材氩离子激光流式细胞仪直标探针实验步骤展
流式细胞仪实验方法（二）
第二部分 细胞因子 细胞内细胞因子的流式细胞仪检测 一、简介随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制
全血锰的概述
人体内含锰12-18mg。锰主要在肠道吸收，通过肝脏随胆汁排入粪便，少量可由肠道再吸收。经尿排泄的锰尚不到总排出量的10%。骨骼中锰积蓄量约占全身总量43%。由于锰参与多种酶的组成和激活作用，既与蛋白质合成有关，又可改善动脉粥样硬化者的脂质代谢。锰还能促进铁吸收和利用，参与黏多糖合成(黏多糖是软
全血输血的应用
全血是指血液的全部成分，包括各种血细胞及血浆中各种成分，还有抗凝剂及保存液。全血有保存全血及新鲜全血之分，常用的是保存4±2摄氏度的全血。新鲜全血定义难以统一规定，要依输血的目的而定，为了补充新鲜的红细胞，可用保存5天的ACD全血或10天的CPD全血；如同时还要补充血小板或白细胞，则应分别用保存1天
血涂片染色
（一）瑞氏染色法 1﹒原理 瑞氏（Wright）染液由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝溶解于甲醇而成。不同的细胞因所含化学成分不同，对各种染料的亲和力也不同，其中，碱性（阳离子）染料能与细胞内酸性物质，如核酸（DNA和RNA）、核蛋白、嗜碱性颗粒、中性颗粒等阴离子结合染成蓝灰色。酸
全血RNA提取
摘要： RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了，但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法，或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来，加白细胞分离液、离心等步骤，比较繁琐，如果能进行全血的提取，那就再好不过。RNA提取
流式细胞术应用－|－鉴别－NLRP3－敲除小鼠的循环髓系细胞群
实验简介表面标志物通常用于区分循环血液中的群体。使用表面标志物 Ly6C（造血细胞）、Ly6 G（粒细胞 / 嗜中性粒细胞）和 CD115（MCSF 受体），我们能够描述来自 C57BL/6J 野生型对照小鼠和 NLRP3 敲除样品的新鲜血液中的 循环细胞群。由于 NLRP3 可影响炎症小体形成，所
自动白细胞分类计数的技术现状和展望
随着细胞计数技术实现自动化后，1970年代对白细胞分类计数的自动化需求也随之增加，先后有两种不同的技术被引入该领域，其一为基于显微镜的自动方法，采用自动影像分析技术直接识别和分析染色的血涂片上白细胞；其二为所谓流式系统（flow system），基于自动细胞计数的原理，对白细
peprotech细胞因子注意事项（一）
目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析（limiting dilution analysis，LDA）和单细胞PCR，应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th2细胞，此方法可获得较强的细胞
利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡
一、基本原理流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核 的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核 的改变由于凋亡细胞核 的改变，造成各种染
利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡
一、基本原理流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变zui具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色
利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡
一、基本原理流式细胞仪检测细胞凋亡：PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染
16色人类免疫细胞亚群的抑制性受体特征
免疫 免疫是人体的一种生理功能，人体依靠这种功能识别“自己”和“
哪些受血者不宜应用全血？
（1）血容量正常的慢性贫血受血者。（2）低血容量已被纠正的急性贫血受血者。（3）贫血伴有心功能不全或心力衰竭的受血者。（4）年老体弱、婴幼儿需输血的受血者。（5）输血或多次妊娠已产生白细胞或血小板凝集素（抗体）的受血者（6）因血浆蛋白过敏引起荨麻疹反应，甚至重度过敏反应的受血者（7）可能实施造血干细
微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备
实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体（一抗），室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞，稳定和固定白细胞。4. 离心（800～1000rpm，5min）弃上清液，用PBS洗涤细胞2次。5. 加入
自动白细胞分类计数的技术现状和展望
胡晓波，上海交通大学医学院附属第三人民医院检验科主任，副主任技师。1993年毕业于上海第二医科大学，并留校任医学检验系教师。1999年至上海市临床检验中心，担任中心副主任，负责业务和部分行政管理工作。2006年至上海交通大学医学院附属第三人民医院检验科工作，担任科副主任、主任，负责业务和部分
如何选择流式细胞仪(2)
⑼、检测细胞内因子（TH1/TH2细胞检测）未活化的淋巴细胞所分泌的细胞因子极少，用流式细胞仪很难检测出来。因此，在检测前需刺激活化。活化所用的刺激素为PMA佛波酯+Ionomycin。淋巴细胞在刺激素的作用下活化，分泌细胞因子到细胞外。因流式细胞仪只能对细胞表面或内部的抗原进行检测，如细胞因子分泌
全血RNA快速提取
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示： 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X。 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现
为何全血并不全？
1. 血液离开血循环，发生“保存损害”； 2. 保存液是针对红细胞设计的，只对红细胞有保存作用； 3. 血小板需要在22±2℃振荡条件下保存，4±2℃保存有害； 4. 白细胞中的粒细胞是短命细胞，很难保存； 5. 凝血因子Ⅷ和Ⅴ不稳定，保存1-3天活性丧失50%.