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乳腺干细胞的培养实验

乳房缩小整形术组织标本中上皮细胞的制备IrECM三维培养乳腺干细胞实验方法原理实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐 CMD3培养基 胶原酶 900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培养瓶 625px2 Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材摇床 离心管实验步骤(a)手术后，立即将组织标本转移至DMEM/F12(1:1)。(b)用两把解剖刀（每只手一把）将组织剪成约2 mm的小块。(c)置摇床上（60 r/min)，37℃,胶原酶消化24〜48h。(d)离心消化物数秒钟，175g，脂肪和富含脂质的细胞漂浮于上清液的上方，将其弃去；上清液中主要含有血管来源的小粒和单个细胞；沉淀中含有血管和上皮来源的较大组织样颗粒。(e)用10ml DMEM/F12重悬沉淀。在30s内，上皮来源的组织样大颗粒会沉淀，血管来源部分则悬浮......阅读全文