MDCK细胞培养
本人具有数年的细胞培养经验，期间经历了无数次的失败和成功，回想起来有苦也有甜，现在把中国疾病预防控制中心和我自己的经验结合起来，制作成MDCK细胞培养SOP，欢迎大家参阅：一、目的MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二、适用范围适用于疾控中心所有技术人员 。三、程序（一）生物安全要求实验室生物安全级别：BSL-1所有操作必须在BSL-1实验室的生物安全柜里进行。（二）材料1. 生长成片的MDCK细胞2. 无菌的T25细胞培养瓶3. D-MEM培养液（含有L-谷氨酰胺）4. 青、链霉素母液（10000 U/mL青霉素G；10000µg/mL硫酸链霉素），分装后保存于-20℃5. HEPES缓冲液，1M母液6. 胎牛血清7. EDTA-胰酶（0.05%胰酶，0.53mM EDTA-4Na），分装后保存于-20℃8. 7.5%牛血清白蛋白组分V......阅读全文
MDCK细胞培养
本人具有数年的细胞培养经验，期间经历了无数次的失败和成功，回想起来有苦也有甜，现在把中国疾病预防控制中心和我自己的经验结合起来，制作成MDCK细胞培养SOP，欢迎大家参阅：一、目的MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二
MDCK细胞培养所需材料和操作步骤
MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二、适用范围适用于疾控中心所有技术人员 。三、程序（一）生物安全要求实验室生物安全级别：BSL-1所有操作必须在BSL-1实验室的生物安全柜里进行。（二）材料1. 生长成片的MDCK
MDCK（NBL-2）细胞，正常，狗肾细胞
MDCK(NBL-2)细胞，正常，狗肾细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。2.如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接
WAVETM 生物反应器中的 Cytodex™ 微载体细胞培养工艺（二）
用于MDCK和 Vero细胞的生物反应器 WAVE Bioreactor 系统由一个带有一次性塑料细胞培养袋的摇动平台组成，配备CO2 气体混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD™控制塔用于控制pH、温度、氧气和混合。MDCK细胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50
WAVETM 生物反应器中的 Cytodex™ 微载体细胞培养工艺（一）
摘要 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的培养。然而，用于细胞治疗和疫苗生产的多种细胞为贴壁依赖型的，需要一个可贴附的生长表面。在本研究中，Cytodex 微载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以扩增 Madine-Darby Canine Kidney
动物病毒毒力测定
实验方法原理 溶细胞性病毒的毒力与其致细胞病变的能力直接相关，固可用不同含量的病毒液接种敏感的宿主细胞培养物测定毒力。实验中病毒的毒力以其致细胞病变效应（cytopathic effect CPE）的程度确定，即观察病毒致细胞病变的最高和最低量，以半数细胞病变为病毒感染剂量。然而，实验中所能
WAVETM 生物反应器中的 Cytodex™ 微载体细胞培养工艺（五）
MDCK细胞的生长和放大（2% FBS） 为了研究在 Cellbag 生物反应器中 MDCK细胞扩增的可放大性，在两种不同大小的袋子之间比较最大细胞密度和细胞生长速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培养体积采用最大工作体积的40%（即Cellbag-1
动物病毒毒力测定实验——TCID50 的测定方法
病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一，通常采用测定实验动物的半数致死量（50％ lethel dose，LD50）和测定细胞培养物的半数组织（细胞）培养物感染量（50％ tissue culture infectious dose，TCID50）来评估病毒的感染能力（毒力）。用细胞培养物测定病
生物工程中的无血清细胞培养
无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑，其一般是在合成培养基的基础上，引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分，使培养基能满足动物细胞培养的要求，又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后，新的无血清培养基不断问世，人们经过研究发现，只要在培养基中增加某些适于细胞生长的
WAVETM 生物反应器中的 Cytodex™ 微载体细胞培养工艺（四）
微载体用量为3 g/l的 Cytodex3，接种细胞密度为0.3×106细胞/ml。培养条件为37℃，pH 7.3，5% CO2，采用光纤溶氧电极监测溶氧水平。培养基含有 2% FBS。每小时取样并用结晶紫染色测定总细胞密度，上清中的悬浮细胞和死细胞用台盼蓝染色。MDCK细胞在接种后1 h