生物技术常用实验操作简单介绍
一、总RNA的提取（Trizol法提取）在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。1. 提取组织RNA时，每50～100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞；2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟；3. 在上述EP管中，按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿，盖上EP管盖子，在手中用力震荡15秒，在室温下（15℃～30℃）放置2～3分钟后，12000g（2℃～8℃）离心15分钟；4. 取上层水相置于......阅读全文
RNA提取与纯化
实验概要掌握RNA提取的基本技术，了解RNA提取过程中的各种注意事项。实验原理RNA提取是分子生物学实验中难度较大的实验技术。 RNA提取和DNA提取有类似的地方，因为它们都是核酸，都具有较好的水溶性。提取RNA首先破碎细胞，然后用提取液将RNA溶出，反复抽提去除蛋白质，加入乙醇沉淀RNA，将RNA
动物组织RNA提取及纯化
实验概要提取样品组织中的RNA并消除DNA污染实验原理Trizol裂解细胞使RNA释放beta巯基乙醇一直RNase活性酚-氯仿抽提分离RNARNase-Free DNase消除DNA污染主要试剂Trizol无水乙醇氯仿（三氯甲烷）异丙醇RQ1 RNase-Free DNase（Promega，M6
RNA 的提取和纯化实验
虽然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位点，但并不推荐使用 poly(A)+RNA，因为在反转录反应中可能污染寡核苷酸，并因此增加假阳性的概率。所以建议使用总 RNA 做 FDD 分析。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿焦
RNA 的提取和纯化实验
试剂、试剂盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 异丙醇 苯酚-胍盐单相溶液 磷酸盐缓冲液
RNA 的提取和纯化实验
试剂、试剂盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇异丙醇苯酚-胍盐单相溶液磷酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机和转头移液器离心管锥形管平板匀浆器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液（用 DEPC 处理过的 H20 配制）
信使RNA的mRNA提取分离纯化
真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A）尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。这种结构为真核mRNA的提取 ，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或寡聚（U）
RNA提取纯化的注意事项
由于RNA酶的广泛存在与难以灭活的顽固特性。使得RNA的提取纯化和后续工作变得非常困难。关于 RNA and RNases，你应该了解些什么？RNases 是非常稳定和活跃的一种酶，一般不需要辅助因子的功能，因而在实验室内 RNA 很容易被降解如果不预先消除可能的 RNase 污染，请不要使用任何塑
DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术
核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一，目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系统，磁珠法由于操作简便、快速，能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化，因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
Trizol法提取总RNA的纯化要求
1.纯化后不应存在对酶（如逆转录酶）有抑制作用的物质。2.排除有机溶剂和金属离子的污染。3.蛋白质、多糖和脂类分子等的污染降到最低程度。4.排除DNA分子的污染。
常规组织样本核酸（DNA/RNA）提取纯化
20 分钟内快速纯化高品质，高产量，即用型 DNA（见图 20）多种规格可选择：Mini Kit 可处理 25 mg 组织，Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织完全去除污染物和抑制剂可在 QIAcube 上进行自动化纯化表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量样