高效液相色谱仪中反相色谱缓冲液的选择
反相色谱中缓冲液的选择化合物的划分通过HPLC分离的样品可根据其在分离系统(或流动相)中的状态分成中性样品和离子样品所谓中性样品是在分离条件下不能离解的化合物，而离子化合物可以离解离子。换句话说，离子样品指的是酸碱化合物，而中性化合物是其它化合物。有盐流动相好在那里反相色谱（RPC）主要是基于待分离化合物的极性。在其它类似条件(分子量、空间结构)下，强极性物质的保留值较小。对于中性样品，其极性取决于化合物本身，但对于离子化合物，其极性可以通过调节其是否离解或离解程度来调节，从而调节其保留值、分辨率和主链效应（一般来说，保留值的提高将导致骨干效应的提高）。在分离含有少量化合物的样品的情况下，通常可行的是使用无盐流动相(无论全部或部分化合物不是中性的)。由于需要分离的化合物较少，分离度的要求不太重要，通过调节流动相的洗脱容量和流速可以实现保留值的调节。...此时，您需要尝试使用SALT移动阶段，即使用缓冲区。但是，用无盐流动相分离多......阅读全文
高效液相色谱仪中反相色谱缓冲液的选择
反相色谱中缓冲液的选择化合物的划分通过HPLC分离的样品可根据其在分离系统(或流动相)中的状态分成中性样品和离子样品所谓中性样品是在分离条件下不能离解的化合物，而离子化合物可以离解离子。换句话说，离子样品指的是酸碱化合物，而中性化合物是其它化合物。有盐流动相好在那里反相色谱（RPC）主要是基于待分离
实验室高效液相色谱仪--如何选择缓冲液pH值
在选择缓冲液pH值之前,应先了解被分析物的Pka,高于或低于Pka两个PH值单位的,有助于获得好的、尖锐的峰,从公式:pH=pKa+log([A-]/[A])得知,溶液pH值高于或低于pKa两个单位,化合物中99%以一种形式存在,而一种形式存在的化合物才能获 得好的尖锐的峰。显示的是它的离子形式和中
高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法
高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法： 1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次，然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。 2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min
如何选择高效液相色谱仪？
高效液相色谱仪可以分为5大部分：高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元，下面我们来逐一分析，谈谈高效液相色谱仪的选型细则。 1、高压输液泵单元的配置选型： 高效液相色谱仪的高压输液方式分为等度方式、梯度方式两大类别。 等度方式：在色谱分析过程中，流动相中各个组分的比
反相色谱色谱柱的选择
色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30～250 mm,颗粒直径在1.6～5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优
反相色谱柱的选择
反相色谱柱的选择： 1.柱子的PH值使用范围 反相色谱柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。 一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要
反相色谱柱的选择
1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷
高效液相色谱仪分离条件的选择
高效液相色谱仪分离条件的选择包括减小柱内和柱外展宽等条件。一、 减小柱内展宽： 1、固定相： 选用粒径小、分布均匀的球形固定相。 首选化学键合相，匀浆法装柱。 2、流动相： 选用低粘度的流动相，有利于增大组分在溶剂中的扩散系数，减少传质阻力。 3、
反相高效液相色谱
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合
高效反相液相色谱
实验方法原理反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反