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如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余?

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质如血浆或血清等积累在反相色谱柱上,必须采用不同与其他物质的清洗方法。大部分情况下,纯有机溶剂如乙晴或甲醇不溶解多肽和蛋白质,因此不能有效地清洗柱子。反而,有机溶剂和缓冲液、酸、离子对试剂等的混合物则能有效地溶解。为确保液相色谱柱再生的效果,建议在使用溶剂冲洗色谱柱之前,了解色谱柱的填料类型以及确保使用的溶剂能与柱子的填料相容。硅胶基质的柱子通常来说都是相容的,但有机聚合物基质的柱子可能会在某些溶剂组合中膨胀或收缩,这样会影响色谱柱的柱效。在使用指定溶剂清洗反相色谱柱时,须对每个溶剂系统至少要冲洗20体积。由于有些溶剂系统黏性很大,冲洗......阅读全文

现代液相色谱进展

  色谱法最初仅仅是作为一种分离手段,是根据混合物中不同组分在流动相和固定相间具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些组分在两相间进行反复多次的分配,从而得到分离。直到五十年代,人们才开始把这种分离手段与检测系统连接起来,成为一种独特的分析方法,是几十年来分析化学中最富活力的领域之一,

食品安全检测技术综述

摘 要 目前,我国食品安全存在着巨大的隐患,情况不容乐观,三氯氰胺等恶性食品安全问题时常发生,冲击着消费者对食品生产企业的信任,随着重大食品安全案件的频频发生,我国食品检查相关部门相应的加大了管制的力度,科研所等机构在食品安全检测技术研究与开发上也加快了进程,虽然已小有成绩,但未来食品安全检测之路仍

液相色谱柱基础知识

有关色谱柱的内容,我们做过打开色谱柱知识“魔法口袋”、如何选择液相色谱柱保护柱?、色谱柱的使用和维护12要点、你可能遇到的360°全景式色谱柱问题、色谱柱保养心得等内容,今天我们把有关色谱柱的相关知识进行梳理,打包奉上,以飨各位。今天推送的主要内容包括:11月23日周四液相色谱柱基本理论知识常用液相

如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质如血

液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 &

HPLC维护知识问答

  1、为什么溶剂和样品要过滤?   溶剂和样品过滤非常重要,它会对色谱柱、仪器起到保护作用,消除由于污染对分析结果的影响。  色谱柱:由于填料颗粒很细,色谱柱内腔很小,溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。  仪器:溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损,同时也会增加泵头内的蓝

2011国家质检总局“科技兴检奖”获奖项目公示

  2011年度国家质量监督检验检疫总局“科技兴检奖”评审工作已经结束,共评审出拟获奖项目248项,现予以公示。自公示之日起一个月内为公示期。任何单位和个人对本公告公示的项目有异议,均可在公示期内,以书面形式向国家质量监督检验检疫总局科技司提出。   2011年度国家质量监督检验检疫总局“科技兴检

植物蛋白质组学和糖基化实验

实验材料链霉亲和素-过氧化物酶                                       &

植物蛋白质组学和糖基化实验2

3. 糖基释放后的蛋白质分析1 ) 糖基释放的化学处理方法还原性氨化反可应选择性的解离糖蛋白上的 O-糖苷(见注释 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,将其迁移情况与其糖基化形式的蛋白进行比较,电泳迁移率的增加是 O-连糖苷出现在蛋白上的证据(见注释 11)。( 1 ) 将 1

检测实验室的实验用水知识汇总

  所谓实验,是指对现象所推测的假设加以验证的动作。假设能否被证明为真理,与假设能否具有再现性的结果至关重要。实验的再现性除了要有良好的技巧,还受到所用化学试剂的纯度和分析仪器的精密度的影响。实验中用来配置溶液的化学试剂,及所使用的水的纯度也非常重要。假设水中污染物对实验检测会造成影响,就必须去除这

实验室用水知识大全

▼水中存在的杂质  •可溶性无机物:无机盐类、溶解气体、重金属、硬度成分(钙、镁等)  •可溶性有机物:木质素、单宁、腐植酸、内毒素、RNA分解酶、农药、三氯甲烷、环境荷尔蒙物质、界面活性剂、有机溶剂  •微粒子:铁锈、胶体、悬浮物、固体颗粒  •微生物:细菌类、藻类▼实验用水所要求的纯度  所谓实

检测实验室的实验用水知识大全

  水的基本性质  •1个水分子(H2O)是由1个氧原子和2个氢原子弯曲键结而成。由于正、负电荷的中心不一致,因此属于极性分子。当2个水分子同时存在时,二者会由静电交互作用与氢键结合,互相吸引并保持一定的距离。而1个水分子可以同时与4个水分子结合,形成晶体般的整齐结构。  •水分子聚合体中,由于氢键

凝胶中蛋白质的洗脱实验

一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表,但当用于微量的蛋白质时,这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。这一领域较多的早期方法已经发表(HagerandBurgess,1980),但却需要重新讨论 (butbear

凝胶中蛋白质的洗脱实验

SDS-PAGE 在确定样品中多肽的数量和大小方面已被证明是极有用的分析方法。若能熟练运用的话, 它还具有分离许多大小不一的单体蛋白质的能力。许多人在凝胶电泳应用的早期希望可以利用凝胶的高分辨率特性来获得小量的纯净蛋白质。实验步骤一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由

凝胶中蛋白质的洗脱实验

实验步骤 一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质 将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表,但当用于微量的蛋白质时,这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。 这一领域较多的早期方法已经发

静水深流:沃特世Q-Tof和IMS的前世今生

  20多年前,沃特世推出全球第一台商品化Q-TOF质谱;2006年,沃特世推出全球第一台行波离子淌度质谱(IMS)。在Q-TOF推出20周年、离子淌度质谱推出10周年之际,分析测试百科网编辑采访了沃特世公司质谱产品市场总监舒放先生。如果把成功的产品比作海面上壮丽的冰山,那么质谱前辈们数十年来不断的

液相色谱柱的分类及常见填料分类

  一、色谱柱基本知识  色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,1

液相色谱柱的分类及常见填料分类

一、色谱柱基本知识色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10um等

蛋白质浓缩和溶质的去除实验

预计在新奇的一级分子和生物仿制药实体方面将会有突出的增长。一些进步的是改良的分析、开发和相互作用。现在已有许多用于去除關的方法,包括冻干、反向萃取、溶质析出,precipitation、透析(溶剂交换) 、超滤和层析技术。值得注意的是,在众多微和设备发展的支持下,小型化和高通量的蛋白质分析取得了极大

蛋白质浓缩和溶质的去除实验

蛋白质浓缩和溶质的去除实验             实验步骤 一、层

HPLC基础知识教程(十二)

  二、化学键合固定相  将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。  1.键合相的性质  目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或

第二届全国样品制备学术报告会(下)

     分析测试百科网讯 8月16日第二届全国样品制备学术报告会的下午报告内容精萃:北京大学白玉:基于新型纳米材料的磷酸化肽富集新方法研究  北京大学的白玉教授做题为《基于新型纳米材料的磷酸化肽富集新方法研究》的报告。

ICAS 2017分会(二):无处不在的质谱分析

  分析测试百科网讯 2017年5月7日,由国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)和中国化学会(CCS)主办的2017 年国际分析科学大会(ICAS 2017)质谱分析分会在海南国际会展中心举行。分会邀请了复旦大学教授杨芃原、俄罗斯科学院院士Evgeny Nikolaev、香港浸会大学化学系教授蔡宗

基因检测在遗传性耳聋中的应用

      由于导致语前聋的环境因素的存在,有时无法判断患者是否为遗传性聋,同时耳蜗结构复杂,耳聋听力表现难以区分,常规的电生理检测或生化检测均不能从病因学上给出满意的解释。这一切,都决定了遗传性耳聋基因检测是目前最为有效的病因学

第五届世界华人质谱会大会报告集锦

  分析测试百科网讯 2015年10月29日,2015 BCEIA召开之际,第五届世界华人质谱学术研讨会在北京国家会议中心举办。大会邀请到台湾国立中山大学化学系的谢建台、北京大学化学与分子工程学院的刘晓云、浙江大学化学生物学与药物化学研究所的潘远江等多人带来了精彩的大会报告。台湾

反渗透膜技术在食品工业中的应用

由于膜分离过程不需要加热,可防止热敏物质失活、杂茵污染,无相变,集分离、浓缩、提纯、杀菌为一体,分离效果高,操作简单、费用低,特别适合食品工业的应用。下面介绍近年来膜分离技术在食品工业中的应用状况。    4.1澄清    澄清工序是澄清汁生产的关键。传统的澄清方法如明胶单宁法、加热凝聚澄清法、冷冻