如何进行免疫荧光三标？
做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。 一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。红绿二色的区分度很大，效果也比较理想。那么，如果是三标呢？请看看下面的一个图。 左侧的一个免疫荧光图片就包括了3种颜色，绿色FITC（FITC最大吸收光波长为490495nm，最大发射光波长520530nm，呈现明亮的黄绿色荧光）和红色罗丹明Rhodamin（最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光）的荧光均为荧光团标记的二抗，而第三种颜色则来自于负染细胞核的蓝色DAPI染料（DAPI......阅读全文
如何进行免疫荧光三标？
做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。 一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标
免疫荧光三标实验如何做？如何选择二抗？
免疫荧光三标？——蓝色荧光的AMCA与Dylight 405标记二抗做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别
酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)，它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体，抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色)，颜色的深浅与抗
免疫荧光双标技术中操作要点和经验
一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，不同点如下： 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色曾经作过脑组织的TUNEL，也指导过别人做心肌的TUNEL，谈谈我的意见：蛋白酶K37度30min，好像有点偏长，我是10min。你是NBT/BICP显色的话，这说明你用的是AP系统，而不是HRP这样的话就不是用3%H2O2来去除内源性酶的了，（H2O2是
免疫酶标技术
1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟，镜下控制染色
免疫酶标技术
中文名称免疫酶标技术英文名称immunoenzymatic technique定 义以酶标记抗体（或抗原），通过相应底物被酶解后的显色反应，对细胞和组织标本中的抗原-抗体复合体进行定位、定性分析和鉴定的方法。也可根据酶催化底物显色的深浅程度，定量测定体液标本中待测抗原或抗体的含量。应用学科细胞生物
免疫酶标技术
实验方法原理 先将酶与抗体结合形成酶标抗体，然后和相应的抗原反应，使抗原抗体复合物上带有酶分子，再与酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃联苯胺）发生显色反应，在显微镜下观察，根据颜色产物检测相应抗原。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBSH2O2血清仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本固定；2.
免疫酶标技术
免疫酶标技术1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟
免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项
一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化，不同点如下：1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其它相同。2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。4、免疫荧光在封片使用专用封片剂或甘油：0.0
免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项
一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，不同点如下： 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油
细胞免疫化学：免疫酶标技术
1） 直接法1．标本固定。2．PBS洗涤2×3分钟。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制内源性过氧化物，室温10～20分钟。4．正常血清（1：10）孵育，室温20分钟。5．滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6．PBS洗涤3×3分钟。7．DAB＋H2O2显色5～10分钟，镜下控制染色
金标免疫层析法简介
金标免疫层析法(goldimmunochromatographicas say，GICA)是20世纪90年代初发展起来的快速免疫分析技术，是一种建立在免疫层析技术、单克隆抗体技术和金纳米晶标记技术基础上的一种固相检测技术。 金纳米晶标记技术是以金纳米晶作为示踪标记物或显色剂，应用于抗原抗体反应
免疫酶标技术——直接法
实验方法原理先将酶与抗体结合形成酶标抗体，然后和相应的抗原反应，使抗原抗体复合物上带有酶分子，再与酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃联苯胺）发生显色反应，在显微镜下观察，根据颜色产物检测相应抗原。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定；2. PBS
免疫酶标技术——间接法
实验方法原理将酶标记在第二抗体上，再与已形成的抗原抗体复合物中的第一抗体反应。目前广泛应用的PAP法、ABC法是在间接法的原理和技术的基础上发展起来的。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定；2. PBS洗涤2×3 分钟；3. 1 %H2O2（或1 %
全自动荧光免疫分析仪工作原理（三）
冲洗水的水温自动控制到与恒温反应槽温度相近，保证反应系统的恒温，并增加去污力。急诊测定后采用针对性清洗，似乎比采用固定的全面清洗程序更有效率更经济。耗水量仪器间相差较大。ABBOTT AEROSET 自动生化分析仪等系统具有自动清洗功能(SMART WASH)和最佳标本顺序选择功能(OSS)
原子荧光Hg标样问题
天用原子荧光做自来水中的汞的时候，发现标准的0管的荧光值比样品的空白荧光值还要高，不知道这个是不是合理？ 1. 如果样品中汞含量极低，接近检出限，出现这种情况也有可能。 2. 说明样品浓度很低，或者空白被污染。 3. 此外，样品的酸度应该与标准溶液酸度一致。这样就可以排除是酸度引起的荧光值差异。 4
免疫组化方法免疫酶标方法简介
免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。该方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准
FCM对外周白细胞的免疫荧光分析（三）
若用单指标直方图，对 PBMC 而言，可以把淋巴细胞和单核细胞分开。见图 10-10 中的 A 、 B 图。但对红细胞溶解后的全血，单指标图分辨率则不够了（图 10-10 的 C 、 D 图），图 A 、 B 给出的是经 ficoll 后的 PBMC ；图 C 、 D 给出的是人外周血白
免疫酶标技术的技术特点
中文名称免疫酶标技术英文名称immunoenzymatic technique定 义以酶标记抗体（或抗原），通过相应底物被酶解后的显色反应，对细胞和组织标本中的抗原-抗体复合体进行定位、定性分析和鉴定的方法。也可根据酶催化底物显色的深浅程度，定量测定体液标本中待测抗原或抗体的含量。应用学科细胞生物
免疫酶标方法的方法原理
免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，
免疫酶标技术——双PAP法
实验方法原理这种方法可在复合物体系中连接更多的PAP复合物，对抗原可进一步放大，因此灵敏度更为增强，适用于微量抗原的检测。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清DAB苏木精仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定后，PBS洗涤；2. 1 %H2O2（或1 %H2O2甲醇）阻断内源性过氧化物，室
免疫荧光
Immunofluorescence Technique (Spector Lab)protocol for immunofluorescence on cells Immunofluorescence Protocol (Walter Steffen)Methanol fixationForma
荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibod