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IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗原修复具体该用什么样的方法及条件等等一系列的问题都需要考虑。因此在开始实验之前，最好先掌握以下几组免疫检测技术中的常识，能够分清它们的特点将使你做出更好的实验设计，提高实验成功率。石蜡切片VS冰冻切片▶ 石蜡切片石蜡包埋是最廉价且常用的组织包埋法，适用于需要长期保存的标本。在包埋之前须先将样本固定，固定时间通常在4~24小时，需要考虑过度固定导致的抗原被遮蔽。在不能立即包埋的情况下，固定完成后的组织可以暂存在乙醇中。如果用树脂替代石蜡做包埋剂，可以得到更薄的组织切片（1.5μm vs. 5μm）。石蜡切片步骤繁多，制片中抗原活性有所减......阅读全文
一抗的选择要点1.选择单克隆还是多克隆抗体？由一种B细胞产生的单一特异性抗体叫做单克隆抗体，单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种B细胞产生抗体，形成抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆