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细胞复苏注意事项

1、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例,配置相应的完全培养基,确保细胞培养条件与说明书一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。每株细胞2支冻存管复苏时建议先只复苏一支,若首次复苏出现问题请及时与我们取得联系。2、取出冻存管,浸入37℃温水浴中,并不时摇动令其尽快融化,注意管口不要没入水面以下,以免造成污染。3、从37℃水浴中取出冻存管,用75%酒精擦拭冻存管表面,放入超净台内。吸出细胞悬液,转移至培养瓶内,补加6~8mL培养液,37℃温箱静置培养,隔天换新鲜培养液,以去除DMSO,或者复苏当时离心去除DMSO,并在显微镜下观察细胞状态和密度;对于贴壁展开较慢的细胞,建议复苏当时去除DMSO,待细胞贴壁展开后再换液。(原代细胞:细胞悬液离心后观察管底沉淀初步判断细胞量,后行台盼蓝染色以确定细胞存活率;接种后隔天观察细胞贴壁量,以判定细胞贴壁率)4、贴壁细胞:过夜培养后多......阅读全文

细胞的复苏

细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。一. 实验前准备: 将水浴锅预热至37℃2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离

细胞活化与细胞复苏

1. 收到细胞株包裹时, 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形, 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细

细胞活化与复苏

实验概要细胞的活化与复苏实验步骤1 收到细胞株包裹时, 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形, 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存(置于–70 °C, 隔夜后,     移到 liq N2)。 2  冷冻细胞解冻程序:     2.1 依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和

原代细胞复苏技术

. 原代细胞冻存复苏技术简介在ELISPOT检测的应用中,往往需要用到冻存的淋巴细胞样品作为检测细胞。由于ELISPOT检测的是细胞的免疫功能,不仅仅需要保持细胞的存活率,而且还要保证细胞的功能不发生变化。传统的细胞冻存方法通常是为了保存细胞株,对细胞存活率的要求不高,更没考虑保持细胞原有的免疫状态

细胞复苏操作流程

细胞复苏操作流程:1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻

细胞生物基本方法:复苏

复苏方法1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,

冻存细胞的复苏

            实验方法原理 冻存细胞应在流水中快速融化并加入生长培养液。实验者应配戴护目镜和手套,因为曾浸没在液氮中的冻存管中可能漏人液氮,而当融化冻存液时冻存管中的气体温度上升可导致爆炸。 实验材料

细胞冻存与复苏

细胞冻存1. 实验前准备:细胞室及工作台紫外线照射15min;培养液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒温水浴箱37℃预热备用;收集对数生长期细胞,在冻存前一天最好换液2.用吸管吸出培养瓶中的细胞培养液,PBS清洗2遍吸出冲洗液,加入适量胰蛋白酶消化。3. 适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。吸管

冻存细胞的复苏

冻存细胞的复苏可以用于:(1)在细胞的实验操作中,冻存的细胞要进行复苏,再培养传代。(2)持久地保留细胞系实验方法原理冻存细胞应在流水中快速融化并加入生长培养液。实验者应配戴护目镜和手套,因为曾浸没在液氮中的冻存管中可能漏人液氮,而当融化冻存液时冻存管中的气体温度上升可导致爆炸。实验材料冻存细胞试剂

冻存细胞的复苏

实验方法原理 冻存细胞应在流水中快速融化并加入生长培养液。实验者应配戴护目镜和手套,因为曾浸没在液氮中的冻存管中可能漏人液氮,而当融化冻存液时冻存管中的气体温度上升可导致爆炸。实验步骤 1) 调整水龙头温度为 40°C,在龙头下放置一广口烧杯。2) 从液氮中取出冻存细胞的冻存管。3) 将冻存管置于