荧光素酶基因标记肿瘤细胞的实验步骤

肿瘤细胞的标记及活体荧光成像

摘要　以绿色荧光蛋白( GFP) 作为标记基因转入人类肺癌细胞系(ASTC2a21) , 经800 mg/ L G418 筛选, 获得5 株高表达细胞系. 利用流式细胞仪对GFP 表达的稳定性进行了初步研究, 结果表明本实验中有些细胞株间GFP 表达稳定性有显著差异( P < 0101) . 将稳定

肿瘤细胞的 “身份证”——生物标记物

　　抗肿瘤药物是当前创新药物研发最活跃的领域之一，也是生物标志物能够“大展拳脚“的领域。不同肿瘤患者的个体异质性和同一患者的组织异质性是有效治疗肿瘤的巨大障碍，依靠生物标记物区分癌种和确定药物响应是精准医疗、抗肿瘤药物开发的试金石。 　　图1. 肿瘤细胞生物标记物的应用1 　　生物标记物的发

肿瘤细胞的 “身份证”——生物标记物

抗肿瘤药物是当前创新药物研发最活跃的领域之一，也是生物标志物能够“大展拳脚“的领域。不同肿瘤患者的个体异质性和同一患者的组织异质性是有效治疗肿瘤的巨大障碍，依靠生物标记物区分癌种和确定药物响应是精准医疗、抗肿瘤药物开发的试金石。图1. 肿瘤细胞生物标记物的应用1生物标记物的发现发展在早期是具有挑战性

荧光素酶基因标记肿瘤细胞的实验步骤

哺乳动物生物发光，一般是将Firefly luciferase基因（由554个氨基酸构成，约50KD）即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株，当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。将标记好的细胞接种到实验动物

肿瘤标记物的种类

　　甲胎蛋白（AFP）　　（1）原发肝癌80%AFP>400ng/ml，近20%AFP正常。AFP可早于影像学6－12月出现异常，为肝癌的早期诊断提供重要依据，建议肝硬化患者定期复查AFP。　　（2）病毒性肝炎、肝硬化绝大部分AFP

肿瘤标记物的作用

　　在与恶性肿瘤的斗争中，医生、患者和家属往往最关心(1)如何尽早发现肿瘤的产生、发展、转移？(2)如何尽快知道治疗是否有效？(3)如何提高治疗效果？这些问题涉及到如何提高恶性肿瘤的早期诊出率，如何有效监测治疗效果、以随时调整治疗方案，和使每位患者从每种治疗中得到更多益处等多方面的问题。X线诊断机、

简述肿瘤标记物的作用

　　在与恶性肿瘤的斗争中，医生、患者和家属往往最关心(1)如何尽早发现肿瘤的产生、发展、转移？(2)如何尽快知道治疗是否有效？(3)如何提高治疗效果？这些问题涉及到如何提高恶性肿瘤的早期诊出率，如何有效监测治疗效果、以随时调整治疗方案，和使每位患者从每种治疗中得到更多益处等多方面的问题。X线诊断机、

肿瘤标记物的相关介绍

　　肿瘤细胞产生和释放的某种物质，常以抗原、酶、激素等代谢产物的形式存在于肿瘤细胞内或宿主体液中，根据其生化或免疫特性可以识别或诊断肿瘤。什么是肿瘤标记物 肿瘤细胞的生物化学性质及其代谢异常，因此在肿瘤病人的体液、排除物及组织中出现质或量上改变的物质，这些就是肿瘤标记物。肿瘤标记物在临床上主要用于对

生物标记物：识别肿瘤侵袭

　　早期结肠癌患者将来可以从特定额基因测试中获益，并帮助他们在化疗方面做出正确的决定。其中两种生物标记物是MACC1基因，高水平促进肿瘤的生长和肿瘤的转移，以及一种有缺陷的DNA不匹配修复(dMMR)系统，它在肿瘤的形成中起着重要的作用。患有dMMR肿瘤和低MACC1基因活性的患者的预期寿命更长。　

肿瘤生物标记物的定义

　　目前，如何定义肿瘤生物标记物尚存在争议，美国国家癌症研究所（NCI）将生物标记物定义为“在血液、其他体液或组织中发现的生物分子，该分子能够作为异常过程或疾病的征兆，生物标记物还可以用于判断机体对于治疗的应答。生物标记物或被称为分子标志物或分子标记”。 [21] 我们可以认为，肿瘤生物标记物是能够

肿瘤标记物检验--鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)

鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)介绍: 从子宫颈鳞状上皮细胞癌(简称鳞癌)组织中分离出的糖蛋白,是一种特异性很好的鳞癌肿瘤标志物。鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)正常值: 放射免疫法:小于1.5μg/L。鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)临床意义: 鳞状上皮细胞癌抗原最早用于诊断鳞癌。宫颈癌、肺癌、头颈部癌时,血

肿瘤检测--胰腺肿瘤标记（CA 19-9）介绍

胰腺肿瘤标记（CA 19-9）介绍：　　CA19-9是胰腺癌的相关抗原其表达依赖于lewis血型抗原的表达lewis阴性者CA19-9的检查也为阴性CA19-9诊断胰腺癌的敏感性特异性和准确性分别为83.1%73%75%而小胰腺癌病人CA19-9的水平不高小于2cm的腺癌阳性率仅60.7%而肿瘤较大

盘点癌症报警信号：肿瘤标记物

肿瘤标记物有哪些检查项目？

癌抗原72-4(CA72-4) 糖链抗原72-4,又称糖类抗原72-4、癌抗原72-4,其是一种高分子糖蛋白类癌胚抗原、糖链抗原72-4是胃肠道肿瘤和卵巢癌的标志物,对诊断胃癌的特...>> 详细癌抗原15-3(CA15-3) CA15-3是一种与乳腺癌等恶性肿瘤相关的抗原。取静脉血,分离血清,用放

概述肿瘤生物标记物的作用

　　肿瘤生物标记物的作用贯串整个肿瘤诊疗过程，从肿瘤风险预测、诊断到治疗方案选择和疗效预测都离不开它。更重要的是，肿瘤生物标记物的发现和应用，使得靶向治疗和免疫治疗成为可能并有效改善疗效。　　（1） 肿瘤风险预测　　目前已经发现一些可用于预测肿瘤高危的生物标记物，例如BRCA1/2基因突变阳性的患者

简单描述肿瘤标记物外科应用

肿瘤标记（tumor marker)是指肿瘤发生、增殖过程中，在宿主体液内出现的浓度异常的生化物质。 这些物质可以是肿瘤细胞的产物，如肿瘤相关抗原、异位激素等；也可以是宿主反应产物，如抗病毒抗体、急性反应期蛋白等。广义的肿瘤标记还应包括可释放入体液的肿瘤细胞表面抗原和胞质蛋白成分，以 及包括肿

肿瘤标记物检验--癌胚抗原(CEA)

癌胚抗原(CEA)介绍: 癌胚抗原最初发现于结肠癌及胎儿肠组织中,故名。血清CEA升高,除见于消化道癌外,也见于其他系统。连续监测癌胚抗原水平可用于肿瘤治疗的疗效观察及预后判断。一般病情好转时血清癌胚抗原水平下降,病情发展时升高。癌胚抗原(CEA)正常值: 

关于恶性肿瘤的肿瘤标记物检查方式介绍

　　虽然肿瘤标记物缺乏特异性，但在辅助诊断和判断预后等方面仍有一定价值。主要包括酶学检查，如碱性磷酸酶，在肝癌和骨肉瘤患者可明显升高；糖蛋白，如肺癌血清ɑ酸性糖蛋白可有升高，消化系统肿瘤CA19-9等增高；肿瘤相关抗原，如癌胚抗原（CEA）在胃肠道肿瘤、肺癌、乳腺癌中可出现增高，甲胎蛋白（AFP）在

肿瘤标记物升高一定是患肿瘤了吗？

肿瘤标记物（tumormarker）是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。此类物质可反应细胞恶变各个阶段的表型及基因特征性。主要包括糖类物质、蛋白质类和酶类肿瘤标记物等。目前我国体检机制逐渐完善，每年规范体检逐渐成为患者健康保驾护航的重要手段。体检项目中常规会含有甲胎

肿瘤检测--胰乳腺肿瘤标记（CA 15-3）介绍

乳腺肿瘤标记（CA 15-3）介绍：　　CA 15-3为一种乳癌的辅助检查。CA 15-3检查正常者，绝不可疏忽乳房自我检查。防治乳癌最重要是自我检查，一有怀疑，应立即就医，进一步做乳房X光摄影。CA 15-3的检查由于阳性率最高只达50%左右，用于筛检时应由专业人员小心判读，切勿自行解读。乳腺肿瘤

流式细胞光度数分析肿瘤细胞凋亡——修饰性核苷酸标记法

实验材料 肿瘤细胞悬浮液 试剂、试剂盒 福尔马林HBSS乙醇TdT反应缓冲液TdT贮存液抗生素蛋白液 仪器、耗材 离心机制冰机烧杯载玻片盖玻片荧光显微镜离心管FCM仪 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快

用[32P]磷酸标记细胞实验_标记单层培养细胞

实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒FCS磷酸盐仪器、耗材无磷酸培养基实验步骤1. 在含 10% FCS 的培养基中单层培养 HeLa 细胞至铺满 50% 左右。2. 倒掉完全培养基，加入新鲜的无磷酸培养基，培养 3~4 小时以耗尽胞内的磷酸储备。3. 换新鲜的无磷酸培养基，并加 32P 磷酸盐至 2

临床检验知识点：肿瘤标记物

肿瘤标记物通常指细胞癌变过程中所产生的正常细胞缺乏或含量极微的特异性和相对特异性的物质，也有可能是宿主细胞针对癌细胞所产生的正常细胞成分，但在量和质上与正常状态或良性疾病时明显不同。存在于肿瘤细胞表面、血液或体液中，如肿瘤的 TSTA、TAA、TSA、激素、酶（同功酶）等。1.应用（1）早期诊断

寻找快速的肿瘤标记物检测技术

从上世纪30年代来，癌症的死亡率没有得到很大的改观。科学家们希望能通过从复杂的生物样本中分离鉴定出敏感特异的肿瘤特有的标记，来帮助肿瘤诊断，评估预后，评估肿瘤的分期，复发，药物靶位点等——这就是肿瘤标记物，肿瘤标记物首先是通过利用从肿瘤细胞中提取的单克隆抗体发现的。在获得抗血清后，通过免疫吸附去掉正

肿瘤标记物检验--血清铁蛋白

血清铁蛋白介绍: 铁蛋白是铁贮存于人体的主要形式之一。具有结合铁和贮备铁能力,以维持体内铁的供应和血红蛋白的相对稳定。血清铁蛋白测定是检查体内铁缺乏的最灵敏的指标,用于诊断缺铁性贫血、肝病等,也是恶性肿瘤的标志物之一。血清铁蛋白正常值: 男 性:15-200μg/L;  女 性:12-150μg/L

临床化学检查方法介绍--卵巢肿瘤标记

卵巢肿瘤标记介绍：　　卵巢肿瘤标记(CA125)是一种糖蛋白，存在于体腔上皮及苗勒氏管中，当这些器官发生病变时血清CA125相应升高，尤其以上皮性恶性卵巢肿瘤升高为显著，所以CA125又称上皮性恶性卵巢肿瘤的相应抗原。CA125在卵巢癌的早期诊断中具有重要意义，它是卵巢肿瘤细胞表面肿瘤相关抗原.存在

卵巢肿瘤标记的化学检验项目介绍

卵巢肿瘤标记介绍：　　卵巢肿瘤标记(CA125)是一种糖蛋白，存在于体腔上皮及苗勒氏管中，当这些器官发生病变时血清CA125相应升高，尤其以上皮性恶性卵巢肿瘤升高为显著，所以CA125又称上皮性恶性卵巢肿瘤的相应抗原。CA125在卵巢癌的早期诊断中具有重要意义，它是卵巢肿瘤细胞表面肿瘤相关抗原.存在

肺癌相关的肿瘤标记物大盘点

李贺  青海大学附属医院在呼吸科，肺癌可谓屡见不鲜，肺癌是当今世界发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，而大多数肺癌患者早期症状无特异性，待等到确诊之时已基本属中晚期，所以肺癌的早期诊断就显得尤为重要。比起肺癌的其他的检查手段，肿瘤标记物的检测一般早于胸部CT的异常，且具有操作简便、无创伤等优点，所以在临床

独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对...

独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对其进行成像分析简介基于细胞成像的分析技术一般需要使用荧光染料进行标记，一些荧光标记可能对活细胞具有毒性或者只能用于固定过的细胞进行染色。无标记细胞分析技术使得研究者既无需耗时耗力的染色流程也无需担心染料对正常细胞活力的影响，就可以计算出细胞数目和细胞汇

良性肝肿瘤的血液酶学及其他肿瘤标记物检查

　　肝癌病人多种血清中Y-谷氨酰转肽酶及其同工酶异常凝血酶原αl—抗胰蛋白酶α-L-岩藻糖苷酶酸性同工铁蛋白碱性磷酸酶-核苷酸磷酸二酯酶同工酶V和乳酸脱氢酶同工酶等可高于正常但由于缺乏特异性多作为辅助之一诊断用于与AFPAFP异质体等联合检测应用结合AFP分析有助于提高肝癌的确诊率。