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RealtimePCR数据导出——ABI仪器篇(一)

1. Real-time PCR数据:Real-time PCR完成后,所有数据并非可以直接导出,由于每一次实验的情况都不相同,仪器的很多默认设定都会对最终数据结果造成重大偏差,所以在完成PCR过程后,需要人为对实验结果进行条件设置,才能提取到科学有效的实验结果,进而完成对实验结果的分析和判断。 2. 数据导出调整步骤:a调整参比荧光选项;b调整基线;c调整阈值 3. 概念: a.参比荧光(dye as the passive reference):参比荧光的作用是用来消除光程差,调整扩增曲线线形和溶解曲线峰形,与PCR反应所加荧光染料mix相关,不同公司品牌的mix所含参比荧光的种类不一样,如:Takara选用ROX,ABI则没有参比荧光,数据提取时,需注意下参比荧光选项,如选错,扩增曲线或溶解曲线或将无法正确呈现。 b.基线(Baseline):是指在PCR扩增反应的最初数个循环里,荧光信号变化不大。接近一条直线,这......阅读全文

Real-time PCR 数据导出 —— ABI仪器篇

  1. Real-time PCR数据:Real-time PCR完成后,所有数据并非可以直接导出,由于每一次实验的情况都不相同,仪器的很多默认设定都会对最终数据结果造成重大偏差,所以在完成PCR过程后,需要人为对实验结果进行条件设置,才能提取到科学有效的实验结果,进而完成对实验结果的分析和判断。