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Vero细胞在WAVE反应器中的微载体球转球放大（二）

在瓶子内进行球转球实验 在 WAVETM 反应器内细胞密度达到需要的水平时，Vero 细胞微载体培养悬浮液即被转移到另外一个透明的瓶子中并移到生物安全柜中。后面的清洗和胰酶消化过程等均在生物安全柜内进行。在微载体沉降下来之后，去除上清。剩下的微载体被转移到 500 毫升无菌透明的瓶子内（这是根据 2 升培养体积所需的瓶子大小，不同的情况应有不同的需求）。尽量多地去除上清。加入 400 毫升 37°C 预热的含 0.02% EDTA 磷酸缓冲液 (PBS-EDTA), 适当混合，待微载体沉降后去除上清。以上同样的过程重复 3次以使微载体得到充分洗涤。 长有细胞的微载体在用 PBS-EDTA 充分洗涤之后，即用含 0.02% EDTA 的 0.25%胰酶消化。2 升的培养体积（6 克微载体），胰酶用量为 3......阅读全文