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标记的链霉卵白素生物素法(LSAB)

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术,20世纪80年代开始采用。基本试剂:① 第一抗体;② 生物素化第二抗体;③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法:1. 将固定后的标本用PBS漂洗;2. 于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过氧化物酶;3. TBS漂洗3次,每次1min;4. 在室温下用二抗的正常血清孵育20min;5. 滴加一抗后在室温下放置1h或4℃冰箱内过夜;6. TBS漂洗3次,每次1min;7. 滴加二抗后于室温放置30min;8. 将标本于生物素化的第二抗体在室温孵育10min;9. TBS冲洗3次,每次1min;10. 再与稀释的LSAB在室温孵育10min;11. 重复步骤9;12. 用DAB......阅读全文

免疫细胞化学SP法与SABC法的区别

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。免疫组织化学的方法有多种,其实都大同小异,不同点只是在于显色基团!SP法1)脱蜡、水化;2)PBS洗2~3次各5分钟;3)3%H2O2(80%

IHC-石蜡技术

实验概要免疫组织化学  (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA  等免疫测定方法低,但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此,从 IHC 获得的信  息结合显微技术

IHC-石蜡技术

实验概要免疫组织化学  (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA  等免疫测定方法低,但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此,从 IHC 获得的信  息结合显微技术

免疫酶组织化学技术

免疫酶组织化学技术 1.酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上,创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2.PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上,建立了非标记抗体法,先将HRP免