从CBMNCs中分离CD34+细胞

试剂和材料:1. 培养基;2. 过柱缓冲液:pH7.2的PBSA,添加0.5%牛血清白蛋白和2mmol/L EDTA或0.6%枸橼酸葡萄糖A方(ACD-A)。用真空装置除去缓冲液中的气体;3. FcR阻断剂;4. CD34微球;5. 柱子(MS+/RS+或LS+/VS+);6. 磁珠细胞分离仪(如MiniMACS);7. 尼龙过滤网,30μm;实验方法:1. 准备过柱缓冲液,用抽真空装置去除气体;2. 每108个CB-MNCs用终体积300μl缓冲液重悬;3. 每108个CB-MNCs悬液加100μlFcR阻断剂,抑制CD34微珠非特异性结合或通过Fc受体介导与非靶细胞的结合;4. 每108个CB-MNCs悬液加100μlCD34微球进行细胞标记,充分混匀后在6-12℃冰箱放置30min;5. 加PBSA洗,室......阅读全文

从CBMNCs中分离CD34+细胞

试剂和材料:1. 培养基;2. 过柱缓冲液:pH7.2的PBSA,添加0.5%牛血清白蛋白和2mmol/L EDTA或0.6%枸橼酸葡萄糖A方(ACD-A)。用真空装置除去缓冲液中的气体;3. FcR阻断剂;4. CD34微球;5. 柱子(MS+/RS+或LS+/VS+);6. 磁珠细胞分离仪(如M

脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)的冻存与复苏实验

CB-MNCs冻存CB-MNCs的复苏实验方法原理实验材料CB-MNCs                                                          试剂、试剂盒FBS                                              

脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)的冻存与复苏实验

CB-MNCs冻存 CB-MNCs的复苏             实验方法原理 实验材料 CB-MNCs

从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验1

从CB-MNCs中分离CD34+细胞 实验材料 CB-MNCs 试剂、试剂盒 灭菌培养基过柱缓冲液FcR阻断剂CD34微球 仪器、耗材 柱子(MS+ RS+或LS+ VS+)磁珠细胞分离仪尼龙过滤网 30μm 实验步骤 (a)准备过柱缓冲液

从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)中分离并培养CD34+细胞

从CB-MNCs中分离CD34+细胞体外扩增CD34+细胞饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞实验方法原理实验材料CB-MNCs                                                          试剂、试剂盒灭菌培养基                

从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)中分离并培养CD34+细胞

从CB-MNCs中分离CD34+细胞 体外扩增CD34+细胞 饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞             实验方法原理

脐血脐带中干细胞分离实验—非限制性体干细胞的分离

实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤。(c)用起始培

脐血脐带中干细胞分离实验

实验方法原理 实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材 T25培养瓶实验步骤 (a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分

脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)的冻存与复苏实验

实验方法原理 实验材料 CB-MNCs试剂、试剂盒 FBS二甲基亚砜(DMSO)仪器、耗材 冻存管慢速冷冻盒(如Mr.Frosty程序降温盒)或控速降温仪耐液氮储存盒实验步骤 (a)准备冻存液:90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却,至少30min。(b)CB-MNCs细胞计数。(c)用

脐血脐带中干细胞分离实验

非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells,USSCs)的分离脐血来源胚胎样干细胞(cord blood-derived embryonic-like stem cells,CBEs)的分离脐血来源多能前体细胞(cord blood-derived multip

脐血脐带中干细胞分离实验

非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells,USSCs)的分离 脐血来源胚胎样干细胞(cord blood-derived embryonic-like stem cells,CBEs)的分离 脐血来源多能前体细胞(cor

饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞

试剂和材料:1. MSCs培养基;2. 6孔培养板;3. 丝裂霉素C,100μg/ml;4. 共培养的培养基:IMDM添加10%FBS,100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素;5. 细胞因子(干细胞因子,IL-6,Flt-3配体,促血小板生成素);实验方法:1. 将脐带血来源的间充质干细胞(C

脐血来源多能祖细胞的冻存与复苏实验_​CBMNCs的复苏

实验材料CB-MNCs试剂、试剂盒灭菌合适的培养基添加10%FBSPBSA70%乙醇仪器、耗材水浴锅实验步骤(a)将装有CB-MNCs的冻存管移入37℃水浴中。(b)先擦干冻存管,然后用70%酒精擦拭冻存管防止污染,打开冻存管。(C)迅速将细胞悬液(大约1mL)转移到装有1OmL预冷的10%FBS培

脐血来源多能祖细胞的冻存与复苏实验_CBMNCs冻存

实验材料 CB-MNCs 试剂、试剂盒 FBS二甲基亚砜(DMSO) 仪器、耗材 冻存管慢速冷冻盒(如Mr.Frosty程序降温盒)或控速降温仪耐液氮储存盒 实验步骤 (a)准备冻存液:90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却,至少30

非限制性体干细胞(USSCs)的分离

试剂和材料: 1. 起始培养基;2. 扩增培养基;3. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;4. PBSA;5. T25培养瓶;实验方法:1. 制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs);2. 如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤;3. 用起始培养基按5×106

脐血MSCs的分离

试剂和材料: 1. 培养基;2. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;3. PBSA;4. T25;实验方法:1. 为了获得新鲜制备的CB-MNCs,按密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs);2. 用培养基重悬新鲜分离或冻存的MNCs。冻存的MNCs在铺板前要37℃迅速复苏并用培养基洗一遍;3. 将重

脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源多能前体细胞分离

实验材料脐血来源的MNCs。试剂、试剂盒灭菌培养基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)分离和制备脐血来源的MNCs。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤。(c)细胞复苏后在30 min内,用台盼蓝染色进行活细胞计数。(d)

从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验2

体外扩增CD34+细胞 实验材料 CD34+细胞 试剂、试剂盒 灭菌培养基;完全IMDM细胞因子(Flt-3配体干细胞因子促血小板生成素IL-6) 仪器、耗材 培养瓶 实验步骤 (a)用添加细胞因子的培养基重悬细胞(50 ng/mL Flt

从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验3

实验材料CD34+细胞试剂、试剂盒灭菌MSCs培养基丝裂霉素C100μg mL共培养的培养基细胞因子(干细胞因子IL-6Flt-3配体促血小板生成素)仪器、耗材6孔培养板实验步骤(a)将脐带血来源的间充质干细胞(blood-derived mesenchymal stem cells, CB-MSC

脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离

实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物(10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体)ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白(HAG。用P

新生儿脑病或有新疗法

   近日,四川省干细胞库国家(地方)联合工程实验室与四川大学华西第二医院在荷兰《行为大脑研究》杂志上联合发表论文。相关研究显示,在缺氧缺血损伤的大鼠模型中,移植脐带血单个核细胞(CB-MNCs)和脐带间充质干细胞(UC-MSCs)可促进大鼠空间记忆的恢复,减少细胞凋亡,减少星形胶质细胞的数量。研究