限制酶使用说明

一、分类目前,已被发现的限制酶,根据其反应的必须因子和切断点等特性,被分为以下三大类:类 别反应必须因子切 点酶 例 I 型 s-腺苷基蛋氨酸、ATP、Mg2+ 识别部位和切点不同,切断部位不定 EcoB、EcoK II 型 Mg2+ 切断识别部位或其附近的特定部位 EcoR I、BamH I III 型  ......阅读全文

限制酶使用说明

一、分类目前,已被发现的限制酶,根据其反应的必须因子和切断点等特性,被分为以下三大类:类 别反应必须因子切 点酶 例        I 型    s-腺苷基蛋氨酸、ATP、Mg2+    识别部位和切点不同,切断部位不定    EcoB、EcoK       II 型    Mg2+    切断识别

限制酶特点

限制酶是识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反应过程中除需Mg2+外,还需要S-腺苷-L甲硫

限制[性酶切]图谱的概念

中文名称限制[性酶切]图谱英文名称restriction map定  义核酸经限制性内切酶消化成片段,用电泳等方法分离,不同的核酸形成的各自独特的条带图谱。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

DNA作图实验——限制酶部分消化

实验材料DNA试剂、试剂盒限制酶缓冲液仪器、耗材电泳仪实验步骤1.  用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2.  用32P末端标记消化产物,5’末端可先用小牛肠碱性磷酸酶处理。3.  用T4多核苷酸激酶进行标记。4.  3’末端可先用大肠扞菌DNA聚合酶ⅠKlenow片段或T4 DNA

DNA限制酶的功能和作用

限制性核酸内切酶(以下简称限制酶):限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶(“分子手术刀”)。发现于原核生物体内,现已分离出100多种,几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组DN

DNA限制性内切酶酶切分析

一、原理限制性内切酶和基因载体是DNA重组技术中的两个极其重要的方面。限制性内切酶是首先在大肠杆菌中发现的能够分解外来DNA的核酸酶。与核酸外切酶相比,该酶可从DNA双链内部特异的核苷酸序列处将DNA双链切断,产生带有粘性或平头末端的DNA片段。把要克隆的外来DNA和载体DNA用同一种限制性内切酶切

限制性酶切片段的定义

中文名称限制性酶切片段英文名称restriction fragment定  义核酸被限制性内切核酸酶消化所产生的片段。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

限制性内切酶简介

  限制性内切酶(restriction endonuclease)全称限制性核酸内切酶,是一种能将双股DNA切开的酶。切割方法是将糖类分子与磷酸之间的键结切断,进而于两条DNA链上各产生一个切口,且不破坏核苷酸与碱基。限制酶在分子生物学与遗传工程领域有广泛的应用。

限制性酶切作图的概念

限制性酶切作图,它是将限制性酶切位点标定在DNA分子的相对位置。最简单的构建限制图的方法是比较不同限制酶产生的DNA片段的大小。

限制酶在各种NEBuffer中的活性

限制酶在各种NEBuffer 中的活性 (NEBuffer Activity Chart for Restriction Enzymes) 对应每一种限制性内切酶,New England Biolabs 均提供彩色盖子的10X NEBuffer,以保

限制酶切割双链DNA的方式

限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesive terminus);第二种为平整切割。

DNA的限制性内切酶酶切反应

  [实验目的]   通过本实验学习DNA的限制性内切酶酶切反应的基本原理与实验技术。   [实验原理]   1.限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作

限制性内切酶酶切反应实验原理

  限制性内切酶已有百余种,每种酶有其特定的核苷酸序列识别特异性,酶的活性需Mg2+来激活。不同的酶也有许多差别:有些酶除需Mg2+外,还需ATP等其他辅助因子的激活;切割位点和识别序列间的距离不同;某些内切酶同时具有甲基化作用。根据这些差别,可将限制性内切酶分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。Ⅱ型限制性内切酶只需要

DNA的限制性内切酶酶切分析

限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割 DNA分子,

限制性内切酶(restriction-enzyme)酶谱分析

一、实验目的在DNA上以限制性内切酶的酶切位点作为标记所绘制的物理图谱就是限制性内切酶图谱,限制性内切酶图谱与其他相关资料联合使用,可用于基因克隆、分离和基因功能研究。二、实验原理(一)酶切图谱的构建限制性内切酶在DNA上有特异的识别和切割位点,可将DNA切开而得到两个或两个以上的大小不同的片段,这

RNA限制性酶的基本信息

中文名称RNA限制性酶英文名称RNA restriction enzyme定  义能对RNA分子进行选择性、限制性切割的内切酶。包括:①一些具有内切酶活性的核酶,如L-19 RNA;②通过将RNase H与特定寡聚体共价连接而人为制造的RNA内切核酸酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(

限制[性酶切]图的表达形式

中文名称限制[性酶切]图英文名称restriction map定  义基因组物理图的一种。标明DNA分子上的限制位点、数目、限制片段大小及其排列顺序的图谱。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

限制性核酸内切酶的定义

用来识别特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶

限制性核酸内切酶的来源

一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI、H

限制性内切酶的用途

  用于DNA基因组物理图谱的组建;基因的定位和基因分离;DNA分子碱基序列分析;比较相关的DNA分子和遗传工程。  限制性核酸内切酶是由细菌产生的,  限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA。

限制酶的的重要用途的介绍

  ①首先不论DNA的来源如何,用同一种内切酶切割后产生的粘性末端很容易重新连接,因此很容易将人和细菌或人和质粒任何两个DNA片段连接在一起,即重新组合,这是重组DNA技术的基础。  ②人类的基因组很大,不切割无法分析其中的基因。限制酶能把基因组在特异的部位切开,即切割不是随机的,因而从每个细胞的基

限制性酶切分析的方法特点

中文名称限制性酶切分析英文名称restriction analysis定  义基因组或一段核酸用限制性内切酶消化产生的片段经电泳等方法分离形成独特的条带图谱,对DNA序列的特征进行的分析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

限制酶所识别的序列有什么特点

并非必须是偶数但是必须反向对称,你把它想得简单一点就好,因为他识别序列的只是一种序列,比方说gaattc,那么他就只能识别它并且切开,如果一条链是一种序列,另一条是另一种序列,那么是无法切开的。

RNA限制性酶的基本信息

中文名称 RNA限制性酶英文名称 RNA restriction enzyme定  义 能对RNA分子进行选择性、限制性切割的内切酶。包括:①一些具有内切酶活性的核酶,如L-19 RNA;②通过将RNase H与特定寡聚体共价连接而人为制造的RNA内切核酸酶。、应用学科 生物化学与分子生物学(一级学

限制性内切酶切割DNA

一、实验目的1.通过对DNA的酶切,学会设计构建体外重组DNA分子;2.根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶;3.掌握DNA的酶切技术。 二、实验原理 限制性内切酶是从细菌中分离出来的一种能在特异位点切割DNA分子的核酸内切酶,目前已从多种细菌中分离出超过400种,识别各自不同

质粒DNA的限制性内切酶酶切分析

实验目的学习和掌握限制性内切酶的特性掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。相关基础知识限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。它是基因工程中用于体外剪切基因片段的重要工具酶。上世纪七十年代,当人们在对噬菌体的宿主

关于DNA的限制性内切酶酶切分析

  限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,然

DNA的限制性内切酶酶切反应实验

[实验目的]通过本实验学习DNA的限制性内切酶酶切反应的基本原理与实验技术。[实验原理]1.限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP 的

DNA的限制性内切酶酶切反应技术

限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)是指识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。本实验是掌握DNA的限制性内切酶的酶切技术。DNA的限制性内切酶酶切反应技术[实验原理]1. 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位

质粒DNA的限制性内切酶消化酶解

原理 限制性核酸内切酶能特异地识别双链DNA中的碱基序列,通过“切割”双链DNA中每一条链上的磷酸二酯键使DNA断裂。利用它可方便地按需要对DNA进行“剪切”加工。限制性核酸内切酶单位的定义为:在限定的温度和反应环境中,1小时消化1μg DNA所需的酶量为一个酶单