相对RTPCR:样品定量实验

试剂、试剂盒 双蒸水RT-PCR 缓冲液MMLV 逆转录酶SUPERaseINRNA 酶抑制剂 Taq DNA 聚合酶总 RNA 随机引物dNTP 混合物 基因特异的正向引物基因特异的反向引物[a-32P]dCTP仪器、耗材 Quantu mRNA Universal 18S standards PCR 管 PCR 仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去除 RNA 酶的双蒸水10XRT-PCR 缓冲液(100 mmol/LTris-HCl、pH8.3,500 mmol/LKCl,15 mmol/LMgCl2)2. 酶和酶缓冲液MMLV 逆转录酶(100-200U/ul)SUPERaseINRNA 酶抑制剂(20U/ul;Ambion)Taq DNA 聚合酶(5U/ul)3. 核酸和寡核苷酸总 RNA(每个样品达到 2.5ug)随机引物(50umol/L)dNTP 混合物(10 mmol/L,包含所有四种 dNTP)基因特......阅读全文

相对-RTPCR:-样品定量实验

            试剂、试剂盒 双蒸水 RT-PCR 缓冲液 MMLV 逆转录酶 SUPERaseINRNA 酶抑制剂 Taq DNA 聚合酶 总 RNA

相对-RTPCR:-样品定量实验

已知线性范围的循环参数和 18SrRNA 引物与竞争子的比例,就可以用自己的样品去做相对定量 RT-PCR。下面配制的 PCR 反应混合物包含 9 个反应(4 个样品、4 个非反转录对照、1 个不加模板的对照)及 10% 的额外份额。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂

相对-RTPCR:-样品定量实验

试剂、试剂盒 双蒸水RT-PCR 缓冲液MMLV 逆转录酶SUPERaseINRNA 酶抑制剂 Taq DNA 聚合酶总 RNA 随机引物dNTP 混合物 基因特异的正向引物基因特异的反向引物[a-32P]dCTP仪器、耗材 Quantu mRNA Universal 18S standards P

蛋白样品的定量

目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所

定量PCR实验

实验材料 限制性内切核酸酶反转录酶热稳定 DNA 聚合酶dCTP靶核酸试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 贮存液胎盘 RNase 抑制剂仪器、耗材 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶屏蔽型枪头离心管正向排液式移液器PCR 仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液与溶液10X 扩增缓冲液4 种 dNTP 贮存液(20

样品制备影响XRF定量精度的介绍

  XRF样品制备简单,但并非无需样品处理,XRF对样品中元素分布均匀性、样品颗粒度、样品表面光滑度、表面粉尘、矿物效应等有要求,这些方面都会不同程度影响分析精度,使用者可以通过相关的样品制备方法消除或者改善这些影响,譬如:研磨、压片、抛光、熔片等方法是XRF通常采用的样品制备方法。

PCR-产物定量实验

测序之前对模板精确定量至关重要。根据 DNA 用量的多少,有几种不同的方法可供选择。下面介绍另外两种方法:荧光测定法和比较溴化物染色法。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒DNA 标准TEPCR 产物仪器、耗材荧光计金属箔纸微量离心管实验步骤方法 A: 荧光测定

PCR-产物定量实验

试剂、试剂盒 DNA 标准TEPCR 产物仪器、耗材 荧光计金属箔纸微量离心管实验步骤 方法 A: 荧光测定法荧光测定法可以在纳克级范围精确定量。荧光计和 DNA 定量试剂盒许多公司都有出售。确定荧光计是否安装了适合于特定染料的激发和发射的部件至关重要。该方法在设计上适用于配有带蓝色 LED

PCR-产物定量实验

            试剂、试剂盒 DNA 标准 TE PCR 产物 仪器、耗材 荧光计 金属箔纸

荧光定量pcr-cdna样品为什么要稀释

没有太大的差别。只是作为定量或者半定量的cdna,要求质量比较高,才能使结果更可靠。非定量普通pcr的cdna要求没那么严格,只要能正常扩增出目标片段即可。

实验室分析方法红外光谱多组分样品的定量分析

1.解联立方程方法多组分样品定量分析的经典方法是解联立方程组,该法主要用于处理二元成三元混合体系,若方程组出现“病态”时,往往出现较大的偏差,为避免这种现象,应考虑以下条件:①在分析峰位置处的吸光度A对浓度c的关系尽量符合吸收定律:②分析峰处各组分之间的吸收系数差别要大③分析峰的位置应尽量选在“峰尖

蛋白质定量实验

考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法 碱性铜还原分析法 胺衍生法             实验方法原理 蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基,其化学结构中

蛋白质定量实验

试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G250乙醇磷酸实验步骤 (1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品,可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度(microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比

核酸的定量测定实验

实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定

定量PCR实验技术分享

1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决?ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。解决办法可以将模板加以浓

核酸的定量测定实验

紫外分光光度法 地衣酚显色法 二苯胺法             实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即:D=kCL式中k为比例常数,当溶液浓度以重量百分

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理 根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即:D=kCL式中k为比例常数,当溶液浓度以重量百

定量PCR实验技术分享

1.  如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决? ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。 解决办法可以将模

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即: D=kCL 式中k为比例常数,当溶液浓度以重量

荧光定量PCR实验步骤

  1、总RNA抽提(枪头和离心管均经过湿热灭菌,无RNA酶)  1)取匀浆器,加入1ml的Trizol Reagent,置冰上预冷。  2)取100mg组织,加入到匀浆器中。  3)充分研磨直至无可见组织块。  4)12000rpm离心10min取上清。  5)加入250 μl三氯甲烷,颠倒离心管

样品适应性影响XRF定量精度的介绍

  即使建立可靠的定量模型,但对目标样品适应性也非一劳永逸,也要充分考虑目标样品的物理形态、元素含量范围、基体与标准样品一致性等条件,这些条件与建立定量模型采用的标准样品不一致,会一定程度造成定量误差。

在样品前处理前加入内标如何定量

1.这样的话不就是把内标当作了回收率指示物了嘛?目标物会损失,内标物也会损失,前处理前加内标是为了校正整个前处理过程目标物的损失。也可以像您说的内标顺带作回收率指示物(如果内标加入浓度和上机测试浓度都知道的话。)2.内标物在前处理加的话,处理过后会有损失,内标物就不准了,也就无法知道内标物浓度,如何

COD实验样品的测定

 COD实验样品的测定1.无氯水样的测定 1)向消解管内加入1mL相应浓度氧化剂及4mL催化剂,具塞摇匀.再取2mL水样置于清洗干净的消解管中具塞充分摇匀。2)将消解管插入消解炉孔内,盖上防护罩,待温度稳定在设定值后按“开始”键,仪器自动定时消解,消解完毕后蜂鸣器报警。3)取出消解管至试管架,冷至室

XRD实验样品如何制作

XRD衍射试样可以是金属、非金属的块体、片体或者粉末。 对于块状、板状、圆柱状样品,必须将其磨成一个平面,面积不能小于10*10mm。如果面积太小可以用几块粘贴在一起。 如果是片状、圆柱状样品可能会存在严重的择优取向,衍射强度异常,给定性定量分析带来麻烦。因此测试时应该合理选择响应的方向平面。 对于

实验样品空白的意义

1、样品空白是由样品本身决定的,即使是无吸光值的蒸馏水,在实验的过程中如若不进行校正,那么分析的结果就会有误差,进而影响分析数据的准确性;2、减少分析过程中出现的误差;3、减少开支;4、简化分析操作过程。

XRD实验样品如何制作

XRD衍射试样可以是金属、非金属的块体、片体或者粉末。 对于块状、板状、圆柱状样品,必须将其磨成一个平面,面积不能小于10*10mm。如果面积太小可以用几块粘贴在一起。 如果是片状、圆柱状样品可能会存在严重的择优取向,衍射强度异常,给定性定量分析带来麻烦。因此测试时应该合理选择响应的方向平面。 对于

核酸透射电镜样品制备实验——核酸样品

实验方法原理很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜,在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层,由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于蛋白质的氨基酸碱性侧链基团的作用,使得核酸从三维空间结构的溶液构型吸附于肽链网而转化为二维空间的构型,并从形态到结构均能

气相色谱定量环是否会有样品残留现象

但实际上根据样品的吸附能力的不同,或多或少会有残留,样品吸附能力差,定量管惰性好,残留就少,样品吸附能力强,定量管惰性差,残留就多,这个是没办法避免的,所以理论上在进样后通过阀切换,载气会将定量环中的残留样品吹干净,这个只是理论上,实际上做不到,只是某些样品的残留可以忽略不计,某些样品残留一大就得冲

检测样品的定性定量怎么建立气相分析方法?

本文主要介绍气相色谱仪在检测一个样品,我们该怎样定性和定量?怎么建立一套完整的分析方法,以及气相色谱基本原理是什么,气相色谱有哪些分类,以及建立分析方法后具体步骤有哪些?一、气相色谱基本原理   气相色谱分析是使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动的(固定相),另一相(流动相)携带