卵和胚胎细胞总RNA提取
试剂、试剂盒 Triton X-100匀浆缓冲液 酚氯仿乙酸钠 乙醇 氯化锂实验步骤 一 材料与设备1)5%TritonX-1002) 匀浆缓冲液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,(PH7.5),5 mmol/LEDTA(pH8.0),0.5%SDS,200ug/ml 蛋甶酶 K3) 酚：氯仿 (1:1)4)3mol/L 乙酸钠 (pH5.2)。5) 乙醇6)8mol/L 氯化锂二 操作方法1) 将待处理的组织放置下一个干烤过的玻璃匀浆器内，弃去无关的液体，用 0.5% TriwnX-100 洗涤蝇胚，以去除培养基。2) 加 10 倍体积的匀浆缓冲液、立即研磨使组织彻底匀浆化。3) 于 37℃ 将组织匀浆温育 l h, 间或混匀之。4）将匀浆移至离心管内，加等体积酚：氯仿（1:1)，剧烈振荡 1 min，用吊桶式转头于室温以 5000 g 离心 l0mim, 使水相和有机相分开。5) 将上层水相移至......阅读全文
卵和胚胎细胞总RNA提取
试剂、试剂盒 Triton X-100 匀浆缓冲液 酚 氯仿 乙酸钠 乙醇 氯化锂
卵和胚胎细胞总RNA提取
试剂、试剂盒 Triton X-100匀浆缓冲液 酚氯仿乙酸钠 乙醇 氯化锂实验步骤 一 材料与设备1)5%TritonX-1002) 匀浆缓冲液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,(PH7.5),5 mmol/LEDTA(pH8.0),0.5%SDS,200ug/ml
2.1.4 卵和胚胎细胞总RNA提取
本方法是分离蛙、海 胆 、被囊动物、蠕虫和蝇的卵母细胞、受精卵及其胎细胞 RNA 的简便有效的方法。试剂、试剂盒Triton X-100匀浆缓冲液酚氯仿乙酸钠乙醇氯化锂实验步骤一 材料与设备1)5%TritonX-1002) 匀浆缓冲液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,
从果蝇胚胎中提取总 RNA 或 poIy(A) +RNA
试剂、试剂盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸钠 苯酚 无 SDS 的结合缓冲液 含 SDS 的结合缓冲
从果蝇胚胎中提取总 RNA 或 poIy(A) +RNA
试剂、试剂盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸钠 苯酚 无 SDS 的结合缓冲液 含 SDS 的结合缓冲液 TE 缓冲液 SEVAG 漂白剂（Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蝇勻浆缓冲液实验步骤 一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/
2.3.1 从果蝇胚胎中提取总 RNA 或 poIy(A) +RNA
试剂、试剂盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸钠苯酚无 SDS 的结合缓冲液含 SDS 的结合缓冲液TE 缓冲液SEVAG漂白剂（Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蝇勻浆缓冲液实验步骤一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/
细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤：1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振摇15s。15－30℃下孵育2-3min，离心（4℃，12，000g，15min）。3) 离心后液体分为三层（上层－无色
TRIzol法提取组织和细胞总RNA
（一）试剂准备1 ． TRIzol 试剂。2 ．氯仿3 ．异丙醇4 ． 75% 乙醇（ DEPC H2O 配制）5 ． DEPC H2O （二）操作步骤 1 ． 样品处理： （１）培养细胞：收获细胞 1-5×10 7 ，移入 1.5ml 离心管中，加入 1ml Trizol ，混匀，室温
总细胞RNA的提取方法
实验概要总细胞RNA的提取在建库过程中，由于cDNA合成这一步将使用通用引物oligo dT，因此在总RNA提取这一步中，提取纯化mRNA不是非常必要的。提取高纯度的总细胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板，目前提取RNA的方法很多，也有不少商业化的试剂盒。实验步骤1. TRIZOL法 1)
总RNA提取（Trizol提取）
在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase 的作用。1. 提取组织RNA 时，每50～100mg 组织用1ml