融合蛋白的酶解实验
实验材料 融合蛋白试剂、试剂盒 SDS仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机实验步骤 1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间： （1）反应1：20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白，室温下反应（2）反应2：5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白（模拟消化），室温下反应。 2. 分别在2、4、8和24 h取出5 μl 反应液，加2×SDS样品缓冲液5 μl，-20℃下冻存。3. 在24 h 时，将5 μl 反应2（模拟消化）液与5 μl 2×SDS样品缓冲液混合。4. 将5 μl 原始融合蛋白溶液与5 μl 2×SDS样品缓冲液混合。 5. 将所有样品于沸水浴中加热10 min，加样到SDS-聚丙烯酰胺凝胶上电泳，根据裂解程度确定适当的温育时间。 6. 确定了适当的裂解......阅读全文
融合蛋白的酶解实验
基本方案 辅助方案 备选方案1 辅助方案 备选方案2 备选方案3
融合蛋白的酶解实验
实验材料 融合蛋白试剂、试剂盒 SDS仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机实验步骤 1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间： （1）反应1：20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白，室温下反应（2）反应2：5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白（
融合蛋白酶解实验
基本方案 用 Xa 因子 实验方法原理 实验材料
融合蛋白的酶解实验1
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 SDS 仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机 实验步骤 1. 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间： （1）反应1：20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白，室温下反应
融合蛋白的酶解实验2
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 SDS盐酸胍CaCl2 仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机 实验步骤 1. 将融合蛋白在≥10倍体积的20 mmol/l Tris·Cl（pH7.4）/6 mol/l 盐酸胍中透析4 h，或将盐酸胍加入融合蛋白中至终浓度
融合蛋白的酶解实验4
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 SDS盐酸胍CaCl2 仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机 实验步骤 1. 将融合蛋白在≥10倍体积的20 mmol/l Tris·Cl（pH7.4）/6 mol/l 盐酸胍中透析4 h，或将盐酸胍加入融合蛋白中至终浓度
融合蛋白的酶解实验5
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 SDSGST清洗缓冲液GST洗脱缓冲液 仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机 实验步骤 1. 在20或50 ml 带球旋盖的试管中，用20倍体积含1%Triton X-100的PBS液洗涤结合在谷胱甘肽-琼脂糖珠的GST融
融合蛋白的酶解实验6
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 SDSCaCl2重组牛肠激酶 仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机 实验步骤 1. 做预试验监测肠激酶与融合蛋白按不同比例混合后的裂解效率，准备5个反应体系： （1）反应1至4：20 μl 融合蛋白；0.2 U、0
融合蛋白酶解实验
实验方法原理 实验材料 1 mg／ml 融合蛋白试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子／ml 反应缓冲液2 × SDS 样品缓冲液仪器、耗材 沸水浴实验步骤 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl 含有 1 μl 200μg /ml Xa 因子的 1 mg/ml 融合蛋白反应
融合蛋白的酶解实验3
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDS钠盐凝血酶裂解液凝血酶仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 准备两个小量预试验以确定最佳裂解反应条件： （1）反应1：20 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（在合适的缓冲液中）及0.2 μg 凝血酶。（2）反应2：5 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（模拟