培养细胞膜片钳记录实验

实验方法原理 培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细胞原代培养过程与急性分离细胞的过程基本一致,但前者需在无菌条件下进行实验材料 细胞试剂、试剂盒 细胞培养液一般用F-12medium细胞分离过程用液一般用Puck's溶液消化酶胰蛋白酶或木瓜蛋白酶(10ng ml)胶原酶(1mg ml)膜片钳仪器、耗材 膜片钳放大器微操纵器防振台显微镜离心机细胞培养箱等。其他辅材包括35mm细胞培养皿离心管游丝镊等实验步骤 1.将塑料盖玻片剪成边长为5-8mm的小玻片,均匀铺在35mm的塑料培养皿中。2.用75%酒精处理铺好玻片的培养皿30min,然后再用灭菌过的双蒸水洗1-2次,晾干后备用。3培养细胞前Id分别用PDL(poly-D-lysine)和Laminin处理有小玻片的培养皿各1次,中间用双蒸水洗l次。4.将所有取材所用器械在75%......阅读全文

培养细胞膜片钳记录实验

实验方法原理 培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细胞原代培养过程与急性分离细胞的过程基本一致,但前者需在无菌条件下进行实验材料 细胞试剂、试剂盒 细胞培养液一般用F-12medium细胞分离过程用液一般

培养细胞膜片钳记录实验

实验方法原理培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细胞原代培养过程与急性分离细胞的过程基本一致,但前者需在无菌条件下进行实验材料细胞试剂、试剂盒细胞培养液一般用F-12medium细胞分离过程用液一般用Pu

培养细胞膜片钳记录实验

基本方案             实验方法原理 培养细胞膜片钳记录是在无菌条件下将组织块经过机械分离和消化酶的处理后分离成单个细胞并在孵箱中培养数天后进行常规膜片钳记录的一种方法。细

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片钳技术与分散细胞膜片钳技术相比,具有的优点是组织薄片中的细胞更接近在体的原始环境,很好地保持了神经元之间的突触联系。实验材料神经细胞试剂、试剂盒孵育细胞外

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理 通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片钳技术与分散细胞膜片钳技术相比,具有的优点是组织薄片中的细胞更接近在体的原始环境,很好地保持了神经元之间的突触联系。实验材料 神经细胞试剂、试剂盒 孵育

组织薄片膜片钳全细胞记录实验

基本方案             实验方法原理 通过全细胞膜片钳技术来检测组织薄片(脊髓片或脑片)上神经元的突触后电位、突触后电流及该突触后电位或电流的可塑性改变等现象。组织薄片膜片

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料 细胞试剂、试剂盒 人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备

神经组织块膜片钳全细胞记录实验

基本方案             实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近

膜片钳记录技术

中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定  义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住(钳住)细胞膜片表面,然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

膜片钳记录技术的方法介绍

中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定  义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住(钳住)细胞膜片表面,然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

膜片钳记录和分析技术(一)

细胞是动物和人体的基本组成单元,细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的,离子和离子通道是细胞兴奋的基础,亦即产生生物电信号的基础,生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科—电生理学(electrophysiology),即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小

细胞内记录实验

实验方法原理膜电位的记录需要在细胞膜的两侧各放置一个电极形成一个环路,因此将一个电极插入细胞膜内进行相应电特性的记录时,这种记录方法即为细胞内记录法。使用该方法可以准确测量膜电位的绝对值,还能测定兴奋性突触后电位、抑制性突触后电位及动作电位实验材料细胞仪器、耗材微电极放大器玻璃微电极.微推进器实验步

细胞内记录实验

基本方案             实验方法原理 膜电位的记录需要在细胞膜的两侧各放置一个电极形成一个环路,因此将一个电极插入细胞膜内进行相应电特性的记录时,这种记录方法即为细胞内记录

细胞内记录实验

实验方法原理 膜电位的记录需要在细胞膜的两侧各放置一个电极形成一个环路,因此将一个电极插入细胞膜内进行相应电特性的记录时,这种记录方法即为细胞内记录法。使用该方法可以准确测量膜电位的绝对值,还能测定兴奋性突触后电位、抑制性突触后电位及动作电位实验材料 细胞仪器、耗材 微电极放大器玻璃微电极.微推进器

膜片钳的多种记录形式:细胞贴附模式、膜内面向外模...

膜片钳的多种记录形式:细胞贴附模式、膜内面向外模式、膜外面向外模式和穿孔膜片模式 在膜片钳技术的发展过程中,主要形成了四种记录模式,即细胞贴附模式(cell-attached mode或on-cell mode)、膜内面向外模式(inside-out mode)、膜外面向外模式(outsid

电生理专题——膜片钳记录的几种形式

  高阻封接问题的解决不仅改善了电流记录性能,还随之出现了研究通道电流的多种膜片钳方式。根据不同的研究目的,可制成不同的膜片构型。  (1)细胞吸附膜片(cell-attached patch)  将两次拉制后经加热抛光的微管电极置于清洁的细胞膜表面上,形成高阻封接,在细胞膜表面隔离出一小片膜,既而

什么是全细胞膜片钳实验

  膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。  传统膜片钳技术每次只能记录

膜片钳操作实验

运用膜片钳进行膜离子通道特性的研究,是一项艰辛、细致、繁杂的工作,要求较高的技术水平和实验条件作保证,现在大致介绍一下膜片钳实验的过程,粗略地包括以下几个方面。 1. 标本制备 根据研究目的的不同,可采用不同的细胞组织,如心肌细胞、平滑肌细胞、肿瘤细胞等,现在几乎可对各种细胞进行膜片钳的研究

膜片钳操作实验

膜片钳技术可应用于:(1)膜离子通道特性的研究;(2)药物筛选。实验方法原理膜片钳技术是用微玻管电极(膜片电极或膜片吸管)接触细胞膜,以千兆欧姆以上的阻抗使之封接,使与电极尖开口处相接的细胞膜的小区域(膜片)与其周围在电学上分隔,在此基础上固定点位,对此膜片上的离子通道的离子电流(pA级)进行监测记

膜片钳实验操作

运用膜片钳进行膜离子通道特性的研究,是一项艰辛、细致、繁杂的工作,要求较高的技术水平和实验条件作保证,现在大致介绍一下膜片钳实验的过程,粗略地包括以下几个方面。1. 标本制备 根据研究目的的不同,可采用不同的细胞组织,如心肌细胞、平滑肌细胞、肿瘤细胞等,现在几乎可对各种细胞进行膜片钳的研究。对所

膜片钳实验操作

运用膜片钳进行膜离子通道特性的研究,是一项艰辛、细致、繁杂的工作,要求较高的技术水平和实验条件作保证,现在大致介绍一下膜片钳实验的过程,粗略地包括以下几个方面。 1. 标本制备 根据研究目的的不同,可采用不同的细胞组织,如心肌细胞、平滑肌细胞、肿瘤细胞等,现在几乎可对各种细胞进行膜片钳的研究。对所

在体动物的细胞外记录实验

实验方法原理细胞外记录(extracellular recording)是把引导电极放置在神经细胞或神经组织的表面或邻近部位,引导与记录有关的放电活动。由千神经细胞或组织发生兴奋性活动时,活动部位的神经元产生去极化,未活动的部位处于正常极化状态,在容积导体中两部位间的电位不同,电流从一点流向另外一点

在体动物的细胞外记录实验

实验方法原理 细胞外记录(extracellular recording)是把引导电极放置在神经细胞或神经组织的表面或邻近部位,引导与记录有关的放电活动。由千神经细胞或组织发生兴奋性活动时,活动部位的神经元产生去极化,未活动的部位处于正常极化状态,在容积导体中两部位间的电位不同,电流从一点流

在体动物的细胞外记录实验

基本方案             实验方法原理 细胞外记录(extracellular recording)是把引导电极放置在神经细胞或神经组织的表面或邻近部位,引导与记录有关的

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验

实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养;肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材

特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验

实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每

细胞培养实验

贴壁细胞培养 悬浮细胞培养             实验方法原理 实验材料

细胞培养实验

实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起