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体细胞融合实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 PEG-1000仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养皿或瓶中加 5 ml 完全培养基以稀释 PEG 溶液。4. 吸净培养皿或瓶中的液体,再加 5 ml 培养基洗涮细胞,进一步稀释 PEG。5. 再洗一次细胞,之后,加 5 ml 新培养基。6. 细胞放回 37℃ CO2 培养箱,过夜。7. 恰当地处理细胞:可以消化细胞并重新接种和/或进行生化筛选。8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。......阅读全文

细胞融合技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以

PEG介导的动物细胞融合(cell fusion)技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以融合,

细胞融合实验

实验概要掌握细胞融合原理、应用融合细胞的方法以及细胞融合率的计算。实验原理细胞融合(Cell  fusion),即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细

案例解析 | 抗病毒生物大分子制药治疗

  近期爆发的新型冠状病毒肺炎(COVID-19,对应的病毒为SARS-CoV-2)突出了开发有效治疗方法的重要性。在近期的公众号中,我们向大家介绍了“人民的希望”瑞德西韦的工作机制[1],在此,我们结合疫苗、血清、多肽和单抗的研究案例,向大家继续介绍靶向病毒的大分子治疗和我们的解决方案是如何推动下

植物原生质体融合技术的研究进展

  01  —  原生质体制备  1.材料的选择及预处理  许多研究表明,在原生质体分离之前,先对植物材料进行预处理能够有效提高原生质体的游离效率,在同等材料用量下可以分离出较多的原生质体。柳玉晶等[1]的研究表明,在分离百合叶片原生质体前对其进行13%甘露醇预处理和黑暗处理能显著提高原生质体产量。

植物原生质体融合的原理及进展

  摘要  本文对植物的原生质体融合技术得研究进展进行了综述。阐述原生质体制备、培养方面的研究进展,随后介绍了原生质体融合方法、融合机理和融合方式等的研究进展,最后对其今后的应用前景进行了展望,为原生质体融合技术的发展提供了参考。  关键词  原生质体 融合技术 研究进展  01  —  原生质体制

周琪最新综述—体细胞重编程研究必看

  多细胞生物个体的分化细胞均通过一系列动态调控机制维持其稳态, 不同类型分化细胞之间的转化在自然条件下不会自发发生. 通过实验手段可以逆转细胞分化的进程使之改变状态, 从一种基因表达谱转换成另一套表达谱, 从而实现细胞类型的转化也即重编程.  目前已知可以通过4种不同途径, 即核移植、细胞融合、胞

中国最早人兽胚胎研究缘何被中断

首个正式发表论文的带头人盛慧珍因多种原因离开团队  最近英国原则上批准了一类人兽混合胚胎实验。其实类似的研究在中国早已进行,并发表了论文。但由著名科学家盛慧珍领导的这一工作目前已基本中断,整座大楼显得空空荡荡。 9月5日,英国“人工受精与胚胎学管理局”(HFEA)原则上批准了一类人兽混

新方法或有助帕金森氏症治疗

  向大脑移植未发育的神经前体细胞来修复损失的脑神经细胞,是目前治疗帕金森氏症、亨廷顿舞蹈症等脑神经退化疾病的一个方法,但多数移植手术效果不明显。其原因何在?德国研究人员近日发现了其中的机制,并找到破解方法。   一直以来,医学界认为移植神经前体细胞的治疗效果不佳,是因为大脑内环境不利于吸收由前体

我国近2000项空间技术已移植国民经济

图为经过太空育种而成的超级南瓜依靠航天科技进行生物制药,疑难杂症治疗现曙光天气预报,都是卫星在帮忙卫星导航系统已成为人们出行必备  神舟九号飞天,“天神”对接,举世瞩目的发射,中国首位女航天员进驻太空等话题之外,关于此次飞行所承载的科研任务在实际民生中的应用也是众人关注的命题。  中

回顾神一到神九空间生物学试验

  神舟一号(1999年11月)   飞船搭载一些农作物种子,包括各10克左右的青椒、甜瓜、番茄、西瓜、豇豆、萝卜等品种以及甘草、板蓝根等中药材,此外,还搭载了有利于心脑血管疾病药物开发的Monascus生物活性菌株。神舟一号科研实验相对较少,但自此开启的“太空诱变育种”实验影

“灵长类体细胞克隆猴”科研团队先进事迹

  “位于上海的中国科学院神经科学研究所孙强团队,经过5年不懈努力,突破了体细胞克隆猴的世界难题,成功培育出世界首个体细胞克隆猴。这标志着中国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代。该项成果于1月25日以封面文章在线发表在生物学顶尖学术期刊《细胞》上。”  当天,《人民日报》、中央电视台等各大中央媒

“动物细胞融合与单克隆抗体”教学案例

  1.情境导入,类比学习   有趣的引入,是课堂教学成功的一半。一节课的导入恰如其分,就能使课堂气氛变得轻松、活泼,牢牢吸引学生的注意力,使其产生浓厚的兴趣和强烈的求知欲,从而活跃思维,充分发挥主观能动性。为了达到上述目的,我提前到达A3阶梯室,播放准备好的《今天我要嫁给你》的MV,MV

克隆技术研究现状

一、克隆的早期研究    克隆一词是英文单词clone的音译,作为名词,c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的,例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆,例如:同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而,天然的哺乳动物克隆

小鼠破骨细胞分化方案

破骨细胞是高度分化的多核巨细胞,主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系,是一种具有骨吸收功能,在骨代谢方面起着关键性作用的细胞,因而机体对于破骨细胞的调控非常严格,在破骨细胞分化成熟的过程中,RANK /RANKL/OPG系统起着分化调控枢纽的作用,是调节破骨细胞分化成熟的关键信号途径。核因子κB

体细胞杂交实验

随着分子遗传学技术出现,体细胞杂交也取得了重要的进步:作为探针的 DNA 可以从用于体细胞杂交或 Southernblot 的细胞中获取,而来自相应基因的探针无论是杂交到滤膜,还是杂交到染色体的变性或非变性的片段上,都能被辨别。然而,由于人类与啮齿目动物在 DNA 和蛋白质水平上的相似性,作

植物组织培养与新品种复制

组织培养是克隆细胞和组织的过程。迄今,植物组织培养已取得了许多卓越的成果,并被广泛推广和利用。通过植物组织培养,我们可以从植物体的一部分体细胞快速培育出大量和母体植物相同的植株。另一方面,植物组织培养技术也为我们快速开发和培育新品种创造了条件。一、组织培养与植物快速繁殖组织培养是一种利用人工培养基(

细胞融合实验——聚乙二醇法

实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重

克隆技术(十二)

应用前景奇妙的克隆克隆技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面:(1)培育优良畜种和生产实验动物;(2)生产转基因动物;(3)生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法;(4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。以下就生产转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。克隆山羊转基因动物研究是动

细胞融合实验

实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用zui广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结

基因测序助力“液体活检”大放异彩

  2015年CSCO大会刚刚落下帷幕,精准医疗当仁不让的成为吸引近2万名与会者讨论的热门话题,而热门中的热门又当属“液体活检”。通过几天的大会观察发现,临床专家几乎是一边倒的看好液体活检在临床中的应用,其在肿瘤早筛、肿瘤用药、疗效评估和复发监测方面的研究进展无不让大家拍手叫好。本月24日,Cell

小小干细胞如何在生物医学“兴风作浪”

干细胞研究是在上世纪90年代后期开始热起来的。自上世纪80年代中期以来,发育生物学家一直都在实验室使用人类胚胎癌(EC)细胞,但是对小鼠胚胎干细胞(ESCs)和胚胎生殖细胞的研究,已经让研究人员看到了希望:他们能够制备来自人类的多能干细胞,而不会有EC细胞的异常基因组。在新的千年之前,一些研究人员正

中国学者Cell子刊解析细胞重编程分子机制

  报道 来自北京生命科学研究所、同济大学和中科院动物所等处的研究人员,在新研究中证实小鼠受精卵中的亲代原核(Pronuclei)具有不对称重编程的能力。这一研究发现发表在3月13日的《Cell reports》杂志上。   任职于北京生命科学研究所和同济大学的高绍荣(Shaorong G

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(二)

植物细胞转化         (系统:ECM630/830)      对植物原生质(玉米、烟草等)及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品

转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用

  自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展,迫切地需要

专家解读“人兽”之惑

布莱尔最后的“大礼” 6月27日,托尼·布莱尔卸任英国首相。尽管人们对于布莱尔执政10年来的表现毁誉参半,但布莱尔在卸任前实实在在地为英国科学家献上了一份“大礼”。5月17日,英国政府批准了一项法律草案,允许科学家进行人兽混合胚胎研究。布莱尔在离职演讲中说:“为了这个国家,我竭尽全力做了自

Ion Torrent新一代测序仪介绍

引言      整个或部分基因组测序的研究问题已解决,研究者的研究重点向着遗传密码如何编码调控细胞功能方向转移。同样,在分子水平了解人类健康状况,基因序列数据则显得更加重要。大多数的测序都是针对部分基因序列或是一段目标区域,提供必需的数据来解释给定假说。利用P

新药可治17种癌症有效率为75%基因检测公司23魔方获亿元B

  01 寻找创新靶点新基与Vividion达逾亿美元合作    药明康德:今日,位于美国圣地亚哥的Vividion Therapeutics公司宣布与Celgene(新基)公司达成战略研发合作协议。这一多年合作关系将着重利用Vividion的药物开发平台来开发靶向癌症、炎症和神经退行性疾病的创新

打破干细胞神话: 分化能力有限 人类无法再生

  尽管生老病死是自然界的规律,可是作为住在了自然数千年的人类,却似乎并不想屈从于这个无法规避的自然法则,一直在企图寻找让人类永生的“灵药”,古人寻长生不老药,现代人试图利用干细胞再造人类器官,弥补身体受到的损伤。可是,自然规律好像不那么容易被打破,即使在科技发达的今天,人们发明出了多种干细胞技术,

植物学技术:植物原生质体的制备

原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下,①具有再生细胞壁,进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力;②具有摄取外源大分子、细胞器,以及细菌,病毒的能力,因此是进行遗传操作,基因转移的好材料;③通过同种和异种植物的原生质体融合,可产生异核体,实现体细胞杂交,培育出新品种。