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菌脂多糖的制备

实验方法原理 原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。实验材料 细菌浓悬液试剂、试剂盒 热酚盐水仪器、耗材 离心机培养箱透析膜实验步骤 1. 细菌浓悬液用盐水经2500转/分,20分钟离心洗涤一次。2. 将沉淀的菌混匀于蒸馏水中,放66℃水浴,然后滴加等量的90%热酚溶液(预热至66℃),边加边摇,而后在66℃水浴中搅拌25分钟3. 在水浴中冷却,于4℃冰箱过夜4. 以2000转/分离心15分钟5. 将上层水溶液吸到另一试管中6. 剩下的酚层及残渣组分可再加上述同量水在热水浴中搅拌30分钟,冷却,离心,取上层水溶液。将两次提的水溶液混合,置透析袋中于生理盐水中透析2天,其间换几次盐水,以除去酚。7. 透析后......阅读全文

扼住超级细菌的“命门”

   中科院生物物理所研究生乔帅,博士毕业延期了一年。让他始料未及的是,自己的科研生涯在这段难熬的日子里居然柳暗花明了。  不久前,《自然》杂志刊登了其导师黄亿华领导的研究小组对细菌脂多糖转运组装膜蛋白复合体(LptD-LptE)的结构解析,为设计抗击“超级细菌”药物铺平了道路,乔帅是论文第一作者。

细菌的结构(二)

  2.革兰氏阳性菌细胞壁特殊组份细胞壁较厚,约20~80mm。肽聚糖含量丰富,有15~50层,每层厚度1nm,约占细胞壁干重的50~80%。此外,尚有大量特殊组份磷壁酸(Teichoic acid)。 (图2-6)磷壁酸是由核糖醇(Ribitol)或甘油(Glyocerol)残基

细菌脂多糖转运组装膜蛋白复合体结构解析取得重要成果

  6月18日,Nature 杂志在线发表了中国科学院生物物理研究所黄亿华研究员研究组对细菌脂多糖转运组装膜蛋白复合体结构解析重要成果。  脂多糖又称内毒素,最早由德裔著名微生物学家Richard F. J. Pfeiffer于十九世纪末发现。一百多年后,美国科学家Bruce Beutler 因发现

代谢综合征与肠道菌群的研究进展

  导读:现代社会生活方式的改变及高脂饮食的摄入是导致全世界代谢综合征(metabolic syndrome, MS)人群数量激增的重要原因,与此同时肠道菌群对宿主代谢具有不容忽视的影响,环境与宿主自身因素结合显著影响肠道菌群的组成比例及多样性。近年来越来越多的证据表明肠道菌群作为重要的串联因素调节

热原和细菌内毒素的概念及研究情况

一、热原(progon)医院临床在使用药品注射剂时,常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡,这种症状称为热原反应。为提高药品质量和用药安全,人们对热原进行了广泛的研究,直到1923年Seibert提出了用家兔检测热原的方法。在1942年美国药典首先将家兔热原检查项

热原和细菌内毒素

一、热原(progon)医院临床在使用药品注射剂时,常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡,这种症状称为热原反应。为提高药品质量和用药安全,人们对热原进行了广泛的研究,直到1923年Seibert提出了用家兔检测热原的方法。在1942年美国药典首先将家兔热原检查项

PLOS ONE惊人发现:血凝块能吸收细菌毒素

  在脊椎动物和节肢动物中,血液凝结包括聚集的血小板血栓的形成(细胞凝块)和由凝块的结构蛋白聚合形成的细胞外纤维状凝块,即哺乳动物中的纤维蛋白、甲壳类动物中的血浆脂蛋白和马蹄蟹(Limulus polyphemus)中的凝固素。这些凝块的功能是止血,另外,细胞外凝块还通过提供一种消极的抗菌障碍和

细菌内毒素的概念

细菌内毒素,英文称作Enolotoxin,是G-菌细胞壁个层上的特有结构,内毒素为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为脂多糖中的类脂A。细菌内毒素这个概念在1890年的时候就已被提了出来,它是在研究发热物质过程所引成的,1

细菌内毒素的概念

细菌内毒素,英文称作Enolotoxin,是G-菌细胞壁个层上的特有结构,内毒素为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为脂多糖中的类脂A细菌内毒素这个概念在1890年的时候就已被提了出来,它是在研究发热物质过程所引成的,19

纯化水与注射用水的区别

纯化水和注射用水二者的区别还在于制水工艺,纯化水的制备工艺可以有各种选择,但各国药典对注射用水的注射工艺均有限定条件,如美国药典明确规定注射用水的制备工艺只能是蒸馏及反渗透,中国药典则规定注射用水的生产工艺必须是蒸馏。这些是各国根据本国的实际情况用以保证注射用水质量的必要条件。现有不少人把注射用水与

关于内毒素你知道多少?

内毒素,革兰氏阴性菌的菌体中存在的毒性物质的总称。是多种革兰氏阴性菌的细胞壁成分,由菌体裂解后释出的毒素,又称之为“热原”。单位Eu/ml。其化学成分有磷脂多糖-蛋白质复合物,其毒性成分主要为类脂质A。内毒素位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内毒素的毒性作用较弱,大致相同,可引起发

于内毒素你知道多少

内毒素,革兰氏阴性菌的菌体中存在的毒性物质的总称。是多种革兰氏阴性菌的细胞壁成分,由菌体裂解后释出的毒素,又称之为“热原”。单位Eu/ml。其化学成分有磷脂多糖-蛋白质复合物,其毒性成分主要为类脂质A。内毒素位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内毒素的毒性作用较弱,大致相同,可引起发

构成病原菌毒力的主要因素

(一)侵袭力侵袭力(Invasiness)是指细菌突破机体的防御机能,在体内定居、繁殖及扩散、蔓延的能力。构成侵袭力的主要物质有细菌的酶、荚膜及其他表面结构物质。1.细菌的胞外酶:本身无毒性,但在细菌感染的过程中有一定作用。常见的有:(1)血浆凝固酶(Coagulase):大多数致病性金黄色葡萄球菌

多篇研究直击影响阿尔兹海默病发病风险的诸多因素

  近年来,随着科学家们大量的研究和不懈的努力,他们在治疗阿尔兹海默病领域中取得了突破性的成果,比如,刊登在Lancet Neurol杂志上的研究报告中,科学家报道开发出首个治疗阿尔兹海默病的疫苗;又有研究人员利用青光眼药物对阿尔兹海默病进行了有效治疗;尽管研究者取得了不错的成就,但不可忽视的是,还

液晶状态的细菌外膜对抗生素敏感性至关重要

  1929年,亚历山大·弗莱明首次发表了关于抗生素的《论青霉菌培养物的抗菌作用》的文章,因此这一年被称为“抗生素元年”。1944年,青霉素首次在美国生产出来,随后立即被投入到二战中治疗因伤感染的战士,拯救了难以数计的生命。因此人们把青霉素同原子弹、雷达并列为第二次世界大战中的三大发明。由此人们认识

中科院Nature发表微生物研究新成果

  来自中科院生物物理研究所的研究人员在新研究中揭示出了,细胞壁成分脂多糖被传递并插入到细菌外膜中的分子结构机制,相关论文“Structural basis for lipopolysaccharide insertion in the bacterial outer membrane”发表在6月1

血凝因子或能通过水解脂多糖来杀灭多种多重耐药细菌!

  日前,一项刊登在国际杂志Cell Research上的研究报告中,来自中国四川大学的科学家们通过研究发现,凝血因子或有望帮助开发抵御多重耐药细菌的新型疗法,凝血因子主要参与了机体损伤后的凝血过程。图片来源:CC0 Public Domain  多重耐药细菌所诱发的感染是如今全球所面临的重要公众健

细菌分解代谢

1.蛋白质的分解:蛋白质分子在细菌分泌的蛋白质水解酶的作用下,在肽键处断裂,生成多肽和二肽。多肽和二肽在肽酶的作用下水解,生成各种氨基酸。二肽和氨基酸可被细菌吸收,氨基酸在体内脱氨基酶的作用下,经脱氨基作用生成氨。不同种细菌在不同的条件下所进行的脱氨基作用的方式(氧化脱氨基、水解脱氨基、还原脱氨基)

细菌的分解及合成代谢

1.糖类的分解:细菌分泌胞外酶,将菌体外的多糖分解成单糖(葡萄糖)后再吸收。各种细菌将多糖分解为单糖,进而转化为丙酮酸,这一过程是一致的。丙酮酸的利用,需氧菌和厌氧菌则不相同。需氧菌将丙酮酸经三羧酸循环彻底分解成CO2和水。厌氧菌则发酵丙酮酸,产生各种酸类(如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、琥珀酸等)

细菌内毒素检查法所用试剂的基础知识

  细菌内毒素   医院临床在使用药品注射剂时,常有发生冷感、寒战、发热、头痛、恶心、呕吐、肤色灰白、休克、严重时导致死亡,这种症状称为热原反应。   什么是热原?目前国内外仍未有统一的认识,但从国内外文献报道中,一个共同的意见,都普遍认为:它是指细菌内毒素。欧洲药典委员会副主席J

菌脂多糖的制备

实验概要脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成成分,所以抗脂多糖抗体的制备可用革兰氏阴性细菌菌体抗原来制备,因此这里只介绍几种细菌脂多糖提取的方法。实验原理热酚提取法的原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也

菌脂多糖的制备

实验概要脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成成分,所以抗脂多糖抗体的制备可用革兰氏阴性细菌菌体抗原来制备,因此这里只介绍几种细菌脂多糖提取的方法。实验原理热酚提取法的原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也

128聚糖全化学合成有望实现难治性肠炎药物研发

  细菌表面的脂多糖(简称LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的重要成分,其多糖大都具有诱导炎症的效应,是细菌内毒素的主要成分。近年来,意大利科学家Molinaro等人通过研究在欧美人群中常见的一种肠道共生菌——普通拟杆菌(Bacteroides vulgatus mpk),发现该拟杆菌表面的脂多糖起到调节

中科院最新成果 使铲除"超级细菌"成可能

  长期以来,由于滥用抗生素导致细菌耐药,产生所谓的“超级细菌”,已成为一个全球医疗卫生难题。中科院生物物理研究所研究员黄亿华团队的一项最新研究成果,为研发能够攻克“超级细菌”的新型抗生素铺平了道路,使铲除“超级细菌”成为可能。《自然》近日在线发表了这项重要成果。  此前研究发现,有超过半数的抗药菌

高压灭菌法

  高压蒸汽灭菌的原理  高压蒸汽灭菌用途广,效率高,是微生物学实验中最常用的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时,水蒸气的温度升高到121℃,经15~30min,可全部杀死锅内物品上的各种微生物和它们的孢子或芽孢。一般培养基

高压灭菌锅的使用注意事项

  高压蒸汽灭菌的原理  高压蒸汽灭菌用途广,效率高,是微生物学实验中最常用的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时,水蒸气的温度升高到121℃,经15~30min,可全部杀死锅内物品上的各种微生物和它们的孢子或芽孢。一般培养基

革兰阴性杆菌感染患者血浆内毒素测定的临床意义

   徐修礼,张建芳,樊新,孙怡群(第四军医大学西京医院检验科,陕西 西安 710032)摘要:目的 探讨革兰阴性杆菌感染患者和正常健康人群血浆内毒素水平及临床意义。方法 分别用定量动态比浊法和鲎试剂定性凝胶法检测革兰阴性菌感染患者和正常健康对照血浆内毒素含量。结果 正常对照组血

细菌内毒素工作标准品振荡15分钟的理论依据

细菌内毒素(Endotoxin),是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有结构,它在细菌生长、繁殖过程中,并不分泌到介质中,也不能从外壁层上自然脱落,它不是细菌的代谢产物,当细菌死亡解体后,才显示出一系列的内毒素生物活性。细菌内毒素的化学结构是脂多糖和微量蛋白的复合物,脂多糖由三部分组成:O-特异性链、

军团菌快速检测卡使用说明

用于尿液样品中军团菌脂多糖的体外检测实验原理此快速检测卡为即用型,基于胶体金技术,用于尿液样品中军团菌脂多糖的检测.快速检测卡采用抗军团菌多克隆抗体和抗军团菌单克隆抗体,具有很高的特异性和灵敏度.其中一些抗体与胶体金微粒联结,并置于吸附垫上干燥.每条快速检测卡都有1条上层线(检测线)含有高灵敏度的抗

细菌内毒素工作标准品振荡15分钟的理论依据

细菌内毒素(Endotoxin),是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有结构,它在细菌生长、繁殖过程中,并不分泌到介质中,也不能从外壁层上自然脱落,它不是细菌的代谢产物,当细菌死亡解体后,才显示出一系列的内毒素生物活性。细菌内毒素的化学结构是脂多糖和微量蛋白的复合物,脂多糖由三部分组成:O-特异性链、