免疫组化中抗体选择要求

免疫组化中抗体选择要求 1、一抗选择要点 (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对较低;而多克隆抗体特异性稍弱,抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等有所避免)。 (2)种属来源。一般家兔来源的抗体多是多克隆;而小鼠来源的抗体多是单克隆,但也有另外。这条主要要与后面的二抗来源相匹配。 (3)实验目的是检测什么种属的抗原,即species reactivity。这一点很重要,一般说明书上都有注明,如小鼠Ms、大鼠Rat、人Hum等等。 (4)能否做免疫组化。一般一......阅读全文

免疫组化中抗体选择要求

1、一抗选择要点 (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,

免疫组化中抗体选择要求

  免疫组化中抗体选择要求   1、一抗选择要点   (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗

免疫组化中抗体选择要求

  免疫组化中抗体选择要求   1、一抗选择要点   (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗

免疫组化抗体选择要点及流式抗体选择常识

一抗的选择要点1.选择单克隆还是多克隆抗体?由一种B细胞产生的单一特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就像导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种B细胞产生抗体,形成抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆

免疫组化试验抗体选择及常用染色方法

一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性

Western-Blot中抗体的选择

Western Blot又称为蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。基本原理:聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同分子量的蛋白质样品分离,分离后的蛋白被转移到固相支撑物(杂交膜)上,抗体特异性识别目标蛋白,通过酶促反应或者化学发光等

实验过程中抗体选择指导

检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素: (1) 分析或应用的类型 (2)样本蛋白的结构性质 (3)样本的种属 (4)抗体宿主的种类 (5)抗体的标记和检测 1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,

淋巴瘤病理诊断中的抗体选择

  常常有人问我,在淋巴瘤诊断中如何选择抗体?选择多了会造成浪费,增加患者经济负担,甚至引发纠纷;选择少了不能满足诊断需要。这确实是一个很实际的问题, 也很难有一个统一和固定的标准。因为每个病例都不同,每个医生的形态学诊断和鉴别诊断水平也不一样,对抗体数量和种类需求也就有差异。一般来讲,对抗

抗体选择指南

抗体亲和层析原理是蛋白 A和蛋白 G对不同来源的IgG的Fc-区具有高度亲和性和特异性。这些蛋白被固定在我们的许多填料上,产生了从腹水、细胞培养上清液和血清中分离IgG和IgG亚类的极好方法。关于抗体亲和纯化的全部产品系列,见下页抗体亲和填料和层析柱选购指南。     蛋白A (Protein

流式抗体选择

很多朋友面对各种各样颜色的流式抗体,在选择及搭配上就犯了难,在此我们需要了解下流式细胞仪的各个激发光及各个接收通道是如何工作的、常见的荧光素有哪些、这些荧光的特性是什么样的。了解了这些,选择抗体和搭配不同的颜色就变得非常简单了。我们再回过头来看看流式细胞仪的原理,熟悉一下流式细胞仪的光路系统。从这张

如何设定抗体实验中各种样品选择的条件

一、如何选择合适的一抗请先确定您要检测的种属和使用的实验方法,然后查找相关产品,根据说明书上描述的“适用种属和实验方法”来确定合适的抗体。如果说明书中有明确您要检测的种属和实验方法均经过检测,则您可以放心地购买该产品。二、如何选择合适的二抗二抗的选择原则:针对一抗Ig亚型的(比如一抗是IgM,二抗就

怎么选择流式抗体?

我们开始流式实验时,首先要选择抗体,必然要涉及到荧光的选择,尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1,我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施(激光,滤光片)  2,选择合适的荧光染料,尽量利用到你的仪器上的所有激光,这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FI

怎么选择流式抗体

我们开始流式实验时,首先要选择抗体,必然要涉及到荧光的选择,尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1,我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施(激光,滤光片)  2,选择合适的荧光染料,尽量利用到你的仪器上的所有激光,这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FI

怎么选择流式抗体?

我们开始流式实验时,首先要选择抗体,必然要涉及到荧光的选择,尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1,我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施(激光,滤光片)  2,选择合适的荧光染料,尽量利用到你的仪器上的所有激光,这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FI

关于抗体的选择

对于国内的大多数实验室来讲,做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单,买进口抗体捉襟见肘,买国产抗体得需要大无畏的勇气。在我们实验室western blot实验历程里,我们用过进口抗体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。 进口抗体一般不会出现闪失:Abca

简述免疫组化实验所用的抗体

  免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

双重染色抗体的选择

用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

抗体的选择和保存

当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候,如何选择适合我们实验需要的抗体,并恰当保存使用,是每个科研人员需要细心考虑的。抗体种类繁多,品牌众 多,技术参数不一,价格和质量更是相差甚大,如何购买到高质量价格合适的抗体,并准确地做出我们想要的结果,其中有很多细节需要注意。一、怎样选择适合你实验需要的抗

免疫组化实验中常用的抗体是什么?

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体,单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

酶标记抗体免疫组化染色知识点

  (一)直接法:将酶直接标记在特异性抗体上,与组织细胞内相应的抗原进行特异性反应,形成抗原-抗体-酶复合物,最后用酶底物显色。直接法的优点在于操作简便及特异性强,缺点是敏感性低,制备的抗体种类有限。  (二)间接法:将酶标记在第二抗体上,先将第一抗体(特异性抗体)与相应的组织抗原结合,形成抗原抗体

如何选择合适的GST抗体?

  GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到,也可以直接被位点特异性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的优点,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛

如何选择合适的GST抗体?

  GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到,也可以直接被位点特异性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的优点,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛

如何选择合适的GST抗体?

GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到,也可以直接被位点特异性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的优点,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用

免疫组化买回来的抗体原液如何稀释

IHC 一抗稀释比例可以参考说明书,抗体稀释液的成分都大同小异,主要就是BSA+PBS/TBS,所以一般的抗体稀释液就能用了。

HA抗体推荐—选择合适HA标签抗体的因素

HA标签系统利用一个HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA 标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签

SPA-在免疫组化中的应用

实验方法原理 由于 SPA 能结合 IgG 的 Fc 段,因此就成为天然的抗 IgG,酶标记的 SPA 可代替酶标记的 IgG 抗血清,从而测定和定位组织内的 IgG 或免疫复合物。实验材料 石蜡切片试剂、试剂盒 H2O2TBS第一抗体SPA-HRPDAB二甲苯乙醇树胶实验步骤 1. 石蜡切片常规脱

免疫组化中一抗与二抗有什么要求

比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的

电子天平选择与环境要求

一.电子天平的选择。用户根据自己称量的准确度和量程要求,选择合适的分度值、量程、准确度级别的电子天平。1.准确度要求选择电子天平,首先应从相应天平的分度值是否符合称量的准确度要求考虑。在选择电子天平的分度值时,应参考厂家给出的检定分度值e ,而不是实际分度值d 。 目前国家计量检定规程规定,判断天平

选择指示生物的要求有哪些?

1、有足够的敏感性;2、有广泛的地理分布和足够的数量;3、是生态系统的重要组成;4、实验室易于繁殖和培养;5、具有丰富的生物学背景资料;6、对毒物或因子的反应能够被测定;7,具有重要的经济价值和旅游价值。

选择质控品的基本要求

  一、良好的稳定性   质控品的稳定性分两方面,一是不开瓶稳定性,一是开瓶稳定性。不开瓶稳定性决定了质控品每个批次的效期,实验室在绘制质控图的时候需要计算靶值和标准差,而想保证这两个参数准确需要有长期大量的质控数据,要覆盖实验室的各项实际变化,比如试剂的批间差,校准品的批间差等等,才能绘制符合检测