Antpedia LOGO WIKI资讯

样本抽提中RNA降解的解决方法

从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常…… 降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不准确。 遇到RNA降解了怎么办? 有条件的话,重新收样一定是更佳选择。样本取材时注意操作迅速稳定,尽快液氮速冻。也可以选用RNAlater等RNA保存试剂,但也需要严格按照此类试剂的操作规范进行,否则也达不到对RNA的保护效果。比如浸泡RNAlater前,组织样本尽量切割成任一方向小于0.5cm的小块,以保证浸泡尽可能充分。 但是珍贵样本怎么可能轻易重新取到呢?降解的珍贵样本真的只能扔了么?No! 针对降解样本Affymetrix官方推出了一款表现优秀的降解RNA扩增标记试剂盒:SensationPlus™ F......阅读全文

样本抽提中RNA降解的解决方法

  从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常……   降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不

样本抽提中RNA降解的解决方法

从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常……降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不准确。遇到R

RNA抽提经验

对大部分实验人员来说,RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢?   组织 RNA 抽提失败的两大现象是: RNA 降

血与泪的RNA抽提抽提经验

对大部分实验人员来说,RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢?组织 RNA 抽提失败的两大现象是: RNA 降解和组

WB生物样本总蛋白抽提

一、贴壁细胞蛋白提取A1..将水浴锅的温度调至100℃,等水浴锅达到100℃温度后,取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。2.将缓冲液(1Xloading buffer)置于100℃水浴锅中预热10min。(loding buffer: 是5Xloding buffer用纯水稀释到1Xlodingbu

RNA抽提指南(TRIZOL法)

RNA抽提指南(TRIZOL法)注意事项:* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。* 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA,避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探针的实验室

罗氏FFPET组织样本抽提RNA试剂盒实验结果分析

High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理,在柱上直接进行高效DNase消化,在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。图1:抽提获得宽泛的RNA片段范围,FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp 使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um 

RNA抽提和标记实验

            实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞 在组织培养中的细胞 冻存的整个组织

RNA抽提和标记实验

实验材料从组织培养收获的细胞在组织培养中的细胞冻存的整个组织试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液(PBS)TRIzol 试剂乙醇乙酸钠EDTANaOHTris-ClTE 缓冲液固定化的 oligo-dT 引物仪器、耗材组织匀浆器热循环仪荧光扫描仪实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1a.

RNA抽提和标记实验

实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞在组织培养中的细胞冻存的整个组织试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液(PBS)TRIzol 试剂乙醇乙酸钠EDTA NaOHTris-ClTE 缓冲液固定化的 oligo-dT 引物仪器、耗材 组织匀浆器热循环仪荧光扫描仪实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材