酶联法检测人类免疫缺陷病毒

[测定方法] ELISA法 [方法学原理] 在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型十Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型+Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。 [标本准备] 静脉抽血2ml,不抗凝 [试剂] 1.预包被微孔反应板条 2.酶标试剂 3.阴性对照 4.阳性对照 5.洗涤液 6.显色剂A、B [仪器设备] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。 [测定步骤] 1.将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照3孔,阳性对照2孔,空白1孔。 2.每孔加人酶标试剂100~1,空白孔除外。 3.分别在相应孔中加入待测样品或阴性对照、阳性对照20ul,振荡混匀。37℃环境中温育60min。 4.弃去孔内液体,用洗涤液充分洗涤6遍,最后一次尽量拍干。 5.每孔加人显色剂A、B液各5......阅读全文

酶联免疫法的原理介绍临床检验

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。医学教育|网搜集整理用洗涤的方法使固相载体

酶联法检测人类免疫缺陷病毒HIV

实验概要本实验用ELISA法检测了人类免疫缺陷病毒HIV。实验原理在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型加Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。主要试剂1.预包被微

酶联免疫法检测黄曲霉毒素

  ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。  该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理

酶联免疫法的基本原理

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合

酶联免疫(ELISA)法的注意事项

1、操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,是否符合要求。2、正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样

酶联法检测人类免疫缺陷病毒HIV

实验概要本实验用ELISA法检测了人类免疫缺陷病毒HIV。实验原理在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型加Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。主要试剂1.预包被微

酶联法检测梅毒螺旋体抗体

[检测方法] ELISA法 [方法学原理] 用精制的基因工程表达的梅毒螺旋体特异性抗原包被固相载体,加患者血清后,如患者血清中有相应抗体,可形成抗原抗体复合物。在此基础上加入酶标记抗原,即可形成抗原—抗体—酶标记复合物。再加入酶底物,底物经酶分解后显色,即为阳性反应。反之,若患者血清中

农残检测中酶抑制率法与酶联免疫法的比较

农残检测中酶抑制率法与酶联免疫法的优劣势比较酶抑制法检测适用于现场的定性和半定量测定,该方法检测时,蔬菜中物质(水份、碳水化合物、蛋白质、脂)等不会对农药残留物的检测造成影响,节省了大量预处理时间,不必进行复杂的分离去杂工作,仪器不需要使用或使用的仪器相对简单,无须大型设备和专业人员,成本较低。 免

酶联免疫电泳转移分析法

该法是分析蛋白质的一种新方法,由southern blot衍化而来,后者是由Southern E.M. 所创建,即将在琼脂糖凝胶中电泳后的DNA,原位吸附于硝酸纤维素膜上,再用放射性同位素如32P等标记的单链RNA或DNA探针,与板上的核酸分子杂交,从而达到分析DNA中基因位置和顺序的目的。以后

酶联免疫法的原理及注意事项

  原理  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形

概述酶联免疫法实验的注意事项

  ⒈正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。  ⒉在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:  ⑴固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚

酶联免疫法的基本原理简介

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原

新型间接酶联免疫法检测磺胺类药物

实验原理62.5mgTS,34.5mgN-羟基琥珀酰亚胺酯和45.3mg 1,3-二环己基碳二亚胺在1.5ml的干燥的N,N-二甲基酰胺中反应18h, 4o C,通过滤过作用移除生成的二环乙基脲沉淀物,得到滤液。滤液被加到含有65mgLPH 2ml的PBS中,用NaOH调节PH到7.6。

酶联免疫法检测硝基呋喃类抗菌剂

  硝基呋喃类(Nitrofurans)抗菌剂是一种广效性抗生素,因价格较低廉且疗效佳,广泛用于畜禽及水产养殖鱼类,用以治疗由大肠杆菌或沙门式杆菌所引起之肠炎,养殖鱼之疥疮、赤鳍病、溃疡病等,于饲料中添加或养殖药浴使用。   硝基呋喃类抗菌剂常见有以下四种药物———呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃

乳铁蛋白的酶联免疫法检测介绍

  酶联免疫法是一种基于抗原抗体特异性反应的检测方法,具有反应灵敏、特异性强等优点。在微孔板中包被抗乳铁蛋白抗体(一抗),加入目标物乳铁蛋白后,乳铁蛋白与一抗结合,再加入乳铁蛋白抗体(二抗)与之形成夹心结构,最后加入显色剂,利用酶标仪测定特定波长的吸光度值,其吸光度值与乳铁蛋白含量成正比,可绘制标准

丙型肝炎病毒的酶联免疫试验法检测介绍

  即:放射免疫诊断(RIA)或酶联免疫试验(ELISA)检测血清中抗HCV1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫试验方法(RIA),随后 Ortho公司又研制成功酶联免疫试验方法(ELISA)检测抗-C-100。这两种方法均用重组酵母表达的病毒抗原(C-100-3,为NS4编码的蛋白,含

酶联免疫法(ELISA)检测黄曲霉的方法介绍

ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

酶联免疫法在农药残留检测中的应用

  摘 要:酶联免疫法(ELISA)是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术,其结合了抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用,具有灵敏度高、特异性强、准确性好、检测成本低、迅速等优点,该方法近年来被广泛应用于食品安全中农药残留的检测。   古语有云:“民以食为天”,随着人们生活水平的

黄曲霉毒素检测方法酶联免疫法(ELISA)

ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法酶免疫测定

①试剂条上标注有所需编码(1是食品测试样品)。试剂盒提供每一系列测试所需的阳性对照(C1),阴性对照(C2)和抗原标准液(S1)。试剂条需恢复至室温。②混合均匀每一阳性对照、阴性对照和抗原标准液。③各吸取0.5mL 阳性对照、阴性对照、抗原标准液和按(5)④步骤煮沸的M肉汤加入到试剂条的测试孔中。④

化学发光法和酶联法检测HIV哪个准确率高

化学发光法敏感度略高于酶联,但特异性略低于酶联,说简单点就是化学发光法假阳高一点点,但都是很成熟的检测技术!不用纠结!一楼完全不懂,化学发光法几乎就是全自动,怎么可能会有人工误差!

改进的间接酶联免疫法检测磺胺类药物

实验概要磺胺类药物是抗菌药,被广泛应用于动物和人。各种检测磺胺类药物残留的方法已经被应用。本试验利用酶联免疫吸附方法,检测磺胺类药物的浓度,为实际应用提供参考。本实验用四只兔子制备抗体,兔子被TS-LPH和TS-BSA免疫,间接ELISA检测血清,在每两只兔子上,使用TS-OV作为诱导原,产生高滴度

改进的间接酶联免疫法检测磺胺类药物

实验概要磺胺类药物是抗菌药,被广泛应用于动物和人。各种检测磺胺类药物残留的方法已经被应用。本试验利用酶联免疫吸附方法,检测磺胺类药物的浓度,为实际应用提供参考。本实验用四只兔子制备抗体,兔子被TS-LPH和TS-BSA免疫,间接ELISA检测血清,在每两只兔子上,使用TS-OV作为诱导原,产生高滴度

酶联免疫法基本原理及注意事项

 酶联免疫法基本原理及注意事项    这类反应的定性结果可以用肉眼判断。目视标本也无色或近于无色者判为阴性,显色清晰者为阳性。但在ELSIA试剂盒中,正常人血清反应后常可出现呈色的本底,此本底的深浅因elisa试剂盒的组成和实验的条件不同而异,因此实验中必须加测阴性对照。阴性对照的组成应为不含受检物

酶联免疫斑点实验(ELIspot)_PVDF-Elispot法

实验方法原理细胞受到刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后, 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF孔板出现"紫色"的斑点表明细胞产生了细胞因子,通过ELISPOT酶联斑点分析系统对斑点的分析后得出

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法介绍

  自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法   VIDAS 和 mini-VIDAS 是一种全自动免疫分析仪,如下图所示,它集合计算机、键盘、打印机于一身,应用酶联免疫分析原理,应用夹心技术,最终检测蓝色荧光(4-甲基伞形基磷酸盐,ELFA),所测的荧光与抗原成正比。此方法已通过 AOAC

酶联免疫法的检测方法双抗体夹心法简介

  在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的

化学发光法检测乙肝核心抗体阳性率相较酶联免疫法

前言:    HBV感染呈世界性流行,但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染HBV,其中2.4亿人为慢性HBV感染者,每年约有65万人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化和肝细胞癌(HCC)。全球肝硬化和HCC患者中,由HBV感染引起的比例分别为30%和4

什么是酶联免疫

酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控

什么是酶联免疫

酶联免疫法简介  酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。   它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤  ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范