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酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多,非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术,其中以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent aay,ELISA)最常用,它可用于测定抗体,也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下着重介绍ELISA(包括双抗体夹心法、细胞ELISA和斑点ELISA)和免疫酶组化技术(APAAP法)。 基本原理:先将以知的抗体或抗原结合在某种固相载体上,并保持其免疫活性。测定时,将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应,再用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离成分,然后加入酶的作用底物催化显色,进行定性或定量。 细胞ELISA 该方法将细胞视为固相载体。多用于检测细胞表面的抗原或受体或筛选细胞表面抗原的特异性抗体。 【试剂及配制】 (1)洗涤液(pH 7.4 ) KH2PO4 ......阅读全文

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多,非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术,其中以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent aay,ELISA)最常用,它可用于测定抗体,也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于斑点ELISA(dot-ELISA)

操作简便,不需要特殊仪器(酶联检测仪)。【试剂及配制】(1) 稀释液:为1%A的0.01mol/L pH7.4的。(2) 封闭液:为2% A的0.01mol/L pH7.4的。(3) 洗涤液:为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。(4) 底物溶液:见附录。【操作方法】(1)

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于双抗体夹心法ELISA

该法多用于检测多价大分子抗原,但不能用于检测半抗原等小分子物质。 【试剂及配制】 (1) 包被液(pH 9.6 碳酸盐缓冲液) Na2CO3 0.16g NaHCO3 0.29g 蒸馏水加至 100ml (2)稀释液(pH 7.4 -Tween 20) KH2PO4 0.

酶标抗体结合物的纯化

在酶标记的溶液中,出现的是各种交联物的混合物,有酶-抗体、酶-抗体-酶、抗体-抗体、酶-酶,甚至还有游离的酶和抗体。在这中间,除了抗体-酶和酶-抗体-酶外,其它都应该给予除去。1、50%饱和硫酸铵沉淀法。此法只能除去游离的酶及酶-酶聚合体。而不能除去其它不需要者。但是此法对酶标抗体的损耗少。2、过S

酶标抗体的质量鉴定与保存

1. 酶活性和抗体效价测定 采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2. 酶量和IgG量 酶量(mg/ml)=OD403´0.4 IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402´0.42)´0.94´0.62

酶标抗体的质量鉴定与保存

1. 酶活性和抗体效价测定采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。2. 酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403 ′0.4IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.42)′0.94′0.62其中,0.42为酶蛋白本身

酶标抗体的质量鉴定与保存

1.酶活性和抗体效价测定: 采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2.酶量和IgG量: 酶量(mg/ml)=OD403 ′0.4 IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.42)′0.94

人抗胰岛细胞抗体(AICA)酶联免疫分析(ELISA)

人抗胰岛细胞抗体(AICA)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗胰岛细胞抗体(AICA)的含量。 实验原理:   本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗胰岛细胞抗体(AICA)水平。用纯化的抗原包

人抗中性粒细胞抗体(ANA)酶联免疫分析(ELISA)

人抗中性粒细胞抗体(ANA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗中性粒细胞抗体(ANA)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗中性粒细胞抗体(ANA)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相

ELISA检测试剂盒—酶标板分类

一、根据孔数,可分为96孔、48孔等,由于酶标板主要是配合酶标仪用,目前市面上的酶标仪最多为96孔,因此酶标板最为常用的也是96孔。二、根据其底部的不同,又分为平底的,U型底、V型底等。平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,方便加样、吸样、混匀等操作,可以不用放在酶标仪上,直接