Antpedia LOGO WIKI资讯

一种快速简便的进行线粒体膜电位检测的方法

背景简介: 线粒体是细胞新陈代谢的主要细胞器,起着“能量工厂”的作用。线粒体内部通过一系列的氧化反应去氧化丙酮酸和NADH,以产生储存能量的ATP分子。而这一系列反应的驱动力是线粒体膜上电化学质子的梯度差,也叫做膜电位。由于这种质子的梯度差为磷酸化和氧化反应提供了“驱动力”,因此它也被当作一个衡量细胞的整体健康状态的指标,同时也可作为研究环境毒性对细胞新陈代谢影响的一个定量监测的指标。 那么该如何来监测线粒体的膜电位呢? 今天介绍一个简单的方法,即Moxi GO II新一代流式细胞分析仪结合TMRE染料法。 TMRE(四甲基罗丹明高氯酸乙酯)是一种线粒体特异的具有红橙色荧光(540/595nm Ex/Em)的阳离子染料,具有膜通透性,会在带负电荷的线粒体膜中迅速积累。线粒体的膜电位越高,TMRE的积累量越多,荧光值越高,因此可以通过检测TMRE荧光值的强度来定量地评估线粒体膜电位,从而评估细胞的健康状态。 在该应用......阅读全文

检测细胞凋亡的实验方法比较

◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法   细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3

细胞凋亡检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多

细胞凋亡检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多

细胞凋亡检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多细胞

常用细胞凋亡检测方法(图)-2

细胞凋亡的图片5细胞凋亡的图片6细胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察(普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜)进行定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。二、区分凋亡和坏死可将二

细胞活力检测方法

细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标,如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件变化等。细胞活性检测方法有很多种,如台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、、ATP含量测定法、荧光染色法、比色法(MTT法)等。一、ATP含量测定法---生物发光检测有研究表明内源性三磷酸腺苷 (AT

线粒体损伤与检测方法研究进展

作者:左钱飞,张海献,鲁鹏飞  摘 要:线粒体是细胞活动的“能源工厂”,在各种致病因素作用下线粒体极易出现各种结构和功能损伤,这在疾病的发展中起着十分重要的影响,文章就线粒体结构和功能损伤及其检测方法作一综述。   关键词:线粒体损伤;mtDNA;凋亡   Abstract:Mi

细胞凋亡早期是能通过实验检测的

人体内的细胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡则是病理性的,有关细胞死亡过程的研究,已成为生物学、医学研究的一个热点。人们已经知道细胞的死亡起码有两种方式,即细胞坏死与细胞凋亡(apoptosis)。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式,而细胞凋亡则是逐渐被认识的一种细胞死亡方式。在细

细胞凋亡(Apoptosis)检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多

线粒体对机体健康到底有多重要?

  我们都知道,线粒体是机体的细胞能量工厂,近年来随着科学家们研究的深入,他们渐渐开始发现线粒体对机体健康非常重要,本文中,小编就对相关研究进行了整理,分享给大家!  【1】EMBO J:单一的线粒体蛋白缺失或会诱发全身性的炎症反应  doi:10.15252/embj.201796553  目前研

源自肿瘤的TGF-β抑制人CD4+T细胞抗肿瘤免疫反应机制

  肿瘤中的转化生长因子β(TGF-β)产生与肿瘤转移和患者预后不良有关。这与TGF-β的促肿瘤作用和免疫抑制作用有关。然而,TGF-β的肿瘤抑制活性也已有报道。因此,尽管TGF-β是一种有希望的癌症治疗靶标,但是如果想要充分利用它的潜力,那么需要对它的细胞效应进行确切的了解。  在一项新的研究中,

细胞凋亡的早期检测方法有哪些?

1、PS(磷脂酰丝氨酸)在胞外膜分布的检测PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS,使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白(如Annexin V-FITC)即可检测细胞凋亡。由于这是一种凋亡早

细胞凋亡的早期检测方法

1、PS(磷脂酰丝氨酸)在胞外膜分布的检测PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS,使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白(如Annexin V-FITC)即可检测细胞凋亡。由于这是一种凋亡早

细胞生物学实验中细胞增殖的检测方法

1.检测细胞代谢活性检测细胞的代谢活性也可以反映细胞增殖的情况。在细胞增殖过程中乳酸脱氢酶的活性会增加,而活性的脱氢酶可以使得外源性的四唑盐或者阿尔玛蓝(Alamar blue)还原成为带有颜色还原产物。通过分光光度计或者酶标仪来读取含染料培养基的吸光度,从而衡量细胞的代谢活性,检测细胞增殖的情

细胞活性检测的多种方法应用

做细胞实验的亲们,经常需要对细胞的活性进行验证,如何知道自己研究的细胞是否还活着,活性怎么样? PCR、抗体IHC染色等细胞分析方法进行活性检测,由于只能反映某个时间点的细胞行为而具有局限性。当传统细胞分析方法无法获得预期结果时,使用实时细胞分析方法通常会得到很多新的生物学发现,因此活细胞分析技

细胞活性检测的多种方法应用 2

做细胞实验的亲们,经常需要对细胞的活性进行验证,如何知道自己研究的细胞是否还活着,活性怎么样? PCR、抗体IHC染色等细胞分析方法进行活性检测,由于只能反映某个时间点的细胞行为而具有局限性。当传统细胞分析方法无法获得预期结果时,使用实时细胞分析方法通常会得到很多新的生物学发现,因此活细胞分析技

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

监控细胞状态,你有很多选择

  如果你在真核系统上开展生物学研究,那么你有很大的机会要培养细胞。作为实验的原材料,细胞的状态很重要。不过,如今的实验室中有无数的细胞系,每一种都有其独特的生长特性,研究人员如何才能确定细胞培养物是健康的?  各大厂商已开发出一系列工具来监控细胞培养物。一些是专门的检测,来监控药物筛选等应用中的细

《Cell Reports》:治疗线粒体疾病的潜在靶标

  线粒体是细胞内氧化磷酸化和形成ATP的主要场所,有细胞“动力工厂”之称,ATP对于正确的细胞功能必不可少。线粒体病 (mitochondrial disorders)是遗传缺损引起线粒体代谢酶缺陷,致使ATP合成障碍、能量来源不足导致的一组异质性病变。线粒体是密切与能量代谢相关的细胞器,无论

细胞色素c活力测定方法概况

  细胞色素c氧化晦 (Cytochrome e oxidase,COX)亦称细胞色素氧化酶,存在于真核生物细胞的线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量,是线粒体电子传递链末端氧化。COX单体为2-亚铁血红素,23)铜蛋白,相对分子质量为150~200kuKD)COX的每个单体由至少13条不同的

揭开线粒体的另一阴暗面

  线粒体在我们体内扮演着多重角色,这个结构能完成不同的细胞间功能,受到多种复杂的信号途径的动态调控。近年来科学家们对于这个总是带来惊喜的细胞器兴趣多多,这主要是因为一些研究表明,线粒体不仅能作为细胞的能量库,而且还执行着多种功能。2015年5月,国际著名杂志Cell就推出了特辑:多面线粒体。  线

细胞凋亡检测方法总览(早期检测、晚期检测和mRNA水平)

细胞凋亡的检测方法,从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。一、早期检测1、PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测2、细胞内氧化还原状态改变的检测3、细胞色素C的定位检测4、线粒体膜电位变化的检测二、 晚期检测1、TUNEL2、LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测)当

Caspase活化、核染色质固缩及DNA片段化

Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础,具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证,包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选,能够实现各种细胞功能的分析:细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞

多功能酶标仪测定荧光强度

  HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸铁(Fe-NTA, Sigma);其余为国产分析纯试剂。G

线粒体呼吸链复合物I、II、III、IV、V活性检测试剂盒原理

线粒体呼吸链复合物I (NADH氧化酶)、线粒体呼吸链复合物II(琥珀酸脱氢酶)是电子进入线粒体电子传递链(ETC)的主要元素。复合物I催化NADH氧化,复合物II催化琥珀酸氧化为延胡索酸。随后,辅酶Q(Q)形成辅酶(QH2),最终导致终端的电子受体O2减少。线粒体呼吸链复合物III(细胞色素c

科研新发现:线粒体疾病最新研究进展!

  线粒体是细胞中的“动力工厂”,细胞生命活动所需能量的80%都是由线粒体提供的。线粒体形态对于细胞维持正常生理代谢和机体发育起着重要的作用,如果线粒体结构和功能发生了异常,就会导致疾病的发生。近年来,线粒体研究已经成为生命科学及医学领域的研究热点,线粒体的基因突变、呼吸链缺陷、线粒体膜的改变等因素

检测细胞凋亡的实验方法比较-4

六、Caspase-3活性的检测 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个

选择性杀死癌细胞的新策略

  本周在《Cell Reports》杂志发表的一项研究中,宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人员指出,抑制钙离子到细胞动力室——线粒体的转移,可特异性地对癌细胞产生毒性。  本文资深作者、生理学系主任Kevin Foskett博士指出:“这表明,线粒体的钙依赖性,是癌细胞的一种新特征。这种对‘钙离

兰州化物所在荧光探针与成像分析研究中取得进展

  线粒体是一种广泛存在于动物和植物细胞中的亚细胞器,是细胞有氧呼吸和制造能量的主要场所。过氧化氢(H2O2)是一种重要的活性氧类物质,主要产生于细胞线粒体有氧呼吸电子传递链。H2O2参与了生物体内氧化还原和信号转导过程,但H2O2在细胞内过量积聚会引起生物体代谢紊乱,导致一系列疾病,如癌症、糖尿病

【盘点】衰老与疾病的关联性研究进展

  人为什么会变老?对于人类来说,如何才能长生不老真的是一个令人着迷的问题。但是至今为止都没有一个让人满意的答案。衰老一直是生命过程中的核心环节,也是影响整个人类社会健康发展的重要问题。目前世界各国均面临着严重的人口老龄化,数据显示到2050年约三分之一的中国人口年龄将超过60岁。因此,深入了解衰老