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生物大分子的色谱纯化方法

一、生物大分子色谱纯化方法的选择思路通常在做纯化前对自己的目标物质特性了解越多对纯化将会越有利,如果不太了解,也可以通过电泳知道目标物质和杂质的情况,找到一种简单的鉴定方法,此外在纯化前必须先建立可靠的活性测定的方法。如果是未知的蛋白,那么通常可以有几种简单的摸索:1. 凝胶过滤色谱。这个方法很常用,但是效率不高,对低浓度的样品没有富集作用,上样量小。2. 离子交换色谱。此法很常用,但是样品必须没有高浓度的盐。3. 疏水色谱。此法较好,它分离效率高,上样量大,特别适合分离盐析沉淀的样品。4. 亲和色谱。是最有效的手段,关键了解目标物质的特性以便选择合适的亲和色谱填料。二、主要用途介绍1. 去除内毒素内毒素也叫热源,一般是磷脂 A ,糖类和蛋白,在中性条件下带有负电荷。内毒素的磷脂部分有很强的疏水性,一般的在高盐情况下它们会聚合,所以不能用疏水色谱,如果蛋白本身......阅读全文

纳微推出全系列单分散聚合物层析介质

  随着生物制药的快速发展及监管部门对生物药的要求越来越高,使得生物制药的分离纯化难度越来越大。层析技术由于具有极高的分离纯化效率且应用条件温和,在分离纯化过程中容易保持目标分子的生物活性,因此层析技术已成为生物制药最重要的纯化工具。层析介质制备技术难度大、门槛高,目前主要由美国GE、日本Tosoh

生物色谱

生物色谱在新药研究中,药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄与它和体内血浆蛋白如白蛋白、糖蛋白、脂蛋白和球蛋白的结合有着密切的关系。由于仅有游离药物才具有特异位点并与产生药理作用的受体结合,因此药物和血浆蛋白的相互作用直接影响到药物的药理活性。色谱法生物色谱是将生物分子间相互作用原理与色谱过程相结合的色

第三届生物制药分离纯化学术技术论坛暨实验培训班

  【本届论坛特点】  前沿学术交流与实验技能培训班有机的结合在一起,让生物制药科研人员在了解新技术、新工艺、新材料等行业前沿动态的同时,有机会在国内外一线专家的指导下亲自上机操作,切实提高一线技术人员在研发和生产过程中解决实际问题的水平和动手操作能力。  强大的演讲嘉宾阵容,本次论坛将邀请近30位

【最新通知】第三届生物制药分离纯化技术学术论坛

  【本届论坛特点】  前沿学术交流与实验技能培训班有机的结合在一起,让生物制药科研人员在了解新技术、新工艺、新材料等行业前沿动态的同时,有机会在国内外一线专家的指导下亲自上机操作,切实提高一线技术人员在研发和生产过程中解决实际问题的水平和动手操作能力。  强大的演讲嘉宾阵容,本次论坛将邀请近30位

亲和层析法概述

亲和层析法是利用生物大分子与某些对应的专一分子特异识别和可逆结合的特性而建立起来的一种分离生物大分子的色谱方法,也叫做生物亲和或生物特异性亲和色谱。这种特异可逆结合的物质很多,见表6–3。如抗原与抗体、底物与酶、激素与受体等,他们间的这种特异亲和能力又叫亲和力。亲和色谱中,一对互相识别的分子互称对方

生物大分子样品的保存

生物大分子制成品的正确保存极为重要,一旦保存不当,辛辛苦苦制成的样品失活、变性、变质,使前面的全部制备工作化为乌有,损失惨重,全功尽弃。影响生物大分子样品保存的主要因素有:⑴空气:空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化。空气中微生物的污染可使样品腐败变质,样品吸湿后会引起潮解变性,同时也为微生物

常用的色谱分离方法

在生物大分子纯化分析特别是蛋白质纯化分析中,色谱是非常重要而且常用的一种技术。    一、凝胶过滤  凝胶过滤又叫分子筛色谱,其原因是凝胶具有网状结构,小分子物质能进入其内部,而大分子物质却被排除在外部。当一混合溶液通过凝胶过滤色谱柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开

江必旺:中国色谱与世界PK的时机已到

  【导语】一位高分子材料专业博士,离乡十余载,却突然选择回国;从未有过色谱分析和分离技术的经历,却填补了国内色谱填料这一关键领域的空白;从一位科学家向企业创业者进行转变,为的是什么?江必旺说:“中国色谱领域的学术论文已位居世界榜首, 可用于色谱的最核心材料-色谱填料却几乎空白。 创业八年

生物大分子的分离纯化技术概述

生物大分子是指蛋白质(包括酶)、多聚糖和核酸类化合物,分子量从几千到几百万,广泛存在于各种生物体内,与各种生命活动息息相关。生物大分子具有十分重要的生理功能和应用价值,研究生物大分子的结构、功能和应用已成为生命科学的一个关键问题。不论是从动植物和微生物体内提取的生物大分子产品,还是用生物工程制备的生

生物大分子的分离纯化技术概述

      生物大分子是指蛋白质(包括酶)、多聚糖和核酸类化合物,分子量从几千到几百万,广泛存在于各种生物体内,与各种生命活动息息相关。生物大分子具有十分重要的生理功能和应用价值,研究生物大分子的结构、功能和应用已成为生命科学的一个关键问题。不论是从动植物和微

蛋白质提取与纯化技术

 选择材料及预处理  以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到

第19届全国色谱大会特邀报告(一)

  2013年4月1日,第19届全国色谱学术报告会及仪器展览会在福州西湖宾馆召开,来自中国科学院大连化学物理研究所的张玉奎院士、南京大学陈洪渊院士、中国科学院生态环境研究中心的江桂斌院士和国家自然科学基金委员会化学科学部庄乾坤主任等多名色谱界专家分别做了特邀报告。各专家

蛋白质提取与纯化技术(二)

2、等电点沉淀法 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用。3、低温有机溶剂沉淀法 用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分辨

Agilent发布生物惰性液相色谱

安捷伦科技发布生物惰性液相色谱用于鉴定生物大分子和新的生物实体     2010年6月18日,北京——安捷伦科技公司(NYSE:A)今日在美国马萨诸塞州波士顿市召开的HPLC2010会议上推出1260 Infinity 生物惰性四元泵液相色谱(Bio-Inert

高性能微球在多肽药物分离纯化中的应用(二)

  01 「 多肽分离纯化色谱填料的选择 」一个理想的多肽药物分离纯化色谱填料必须满足以下特性:(a)高选择性,高分离度;(b)柱效高,分辨率高;(c)载量大;单位体积填料处理多肽样品的能力大(d)化学性能稳定,适用pH范围宽(1-14);可在线清洗

亲和层析(affinity chromatography)的应用

亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。1.抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(十一)

3.4.5 亲和层析的应用亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白

CBPT生物制药分离纯化技术论坛

  作为中国领先的生物制药技术推广平台,由中国生物工程学会《生物产业技术》杂志社主办,北京中航环宇国际文化交流中心承办的“CBPT生物制药分离纯化技术论坛”在生物医药行业专家领导和朋友们的支持下,已连续成功举办了两届。是生物医药技术领域规模最大、学术水平最高、科研成果最新和专业性最强的年度行业盛会,

GPC凝胶色谱净化基本信息

  凝胶色谱是以多孔凝胶为固定相,利用凝胶孔的空间尺寸效应,使不同大小的分子达到分离的一种高效液相色谱(HPLC)方法。其分离机理类似于分子筛效应,大体积分子只能渗入少量大孔,在固定相中所经历的路径较短,先流出。所有孔隙都不能进入的大体积分子,不被保留,在死体积处流出。因此,溶质按分子体积从大到小依

赛分科技推出填料新品-MabPurix亲和层析填料

  近日,赛分科技成功开发了首款亲和层析填料—— MabPurix™ Protein A,该填料以琼脂糖凝胶为基质,表面键合配体Protein A,主要应用于生物制药领域——抗体的纯化。作为全球色谱产品最为完善的企业之一以及生物分离色谱的领航者,赛分科技十分重视新产品研发,目

如何破局“赢者通吃”的高端新材料?

新材料是支撑新一代信息,智能制造、航空航天、生物技术等国家战略性新兴产业发展的基础,高端新材料技术是实现产业升级和变革,提升装备制造的基础保障。一方面高端新材料对其性能和质量有极高的要求,且制造技术壁垒高,难以模仿,另一方面高端新材料是下游产品关键的核心组成部分,对下游产品质量和性能影响极大,有些甚

解析速览Protein A亲和抗体层析的突破性创新

导读:近期华人抗体协会发布一篇文章介绍到连续制造工艺被FDA推崇备至:连续制造工艺基于其稳定高效率的优势,已经在其它许多行业成为极其成功的生产模型。然而很长一段时间以来,制药行业以严格监管和法规要求过于保守而被行业所诟病,故多数仍以批次生产为主。近年来,随着业界对于产能效率和生产成本的不断重视,生物

东曹:矢志不渝专注生物制药 新冠疫情下逆势增长

  ——东曹(上海)生物科技有限公司副总经理潘明祥先生专访  分析测试百科网讯 2020年11月16日-11月18日,慕尼黑上海分析生化展(analytica China)在上海新国际博览中心如期举办,疫情之下,各展商均精心准备,今年的新技术新产品均得到集中展示。东曹(Tosoh Biosicenc

比较疏水作用层析与反向液相色谱分离疏水性蛋白质

疏水作用色谱是根据分子表面疏水性的差异,分离蛋白质、多肽等生物大分子的常用方法。疏水基团经常暴露在蛋白质、多肽等生物大分子的表面。我们称这些疏水基团为疏水斑块。疏水性斑块可以与疏水性色谱介质发生疏水性相互作用由于不同分子的疏水性不同它们与疏水色谱介质之间的疏水力是不同的疏水作用色谱是基于这一原理分离

基于高压制备液相的多维色谱技术在中药分离纯化中应用

  1 引 言   中药广泛应用于疾病的预防和治疗[1]。快速分离纯化技术对于理解中药复杂的物质基础、控制中药质量和发现潜在活性物质具有重要意义,也是目前中药研究的热点问题之一。作为分析型高效液相色谱系统的延伸,高压制备液相系统能够在保证样品分离度的前提下,大幅度提高载样量,从而快速获得高

蛋白质分离纯化的新技术及技术要点

浅述蛋白质分离纯化的新技术摘 要: 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术,综和近年来国内外的一些研究结果,结合实际应用的例子,分析了各种分离纯化方法的优点,同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化技术的发展趋势。&nbs

高效液相色谱之高效排阻液相色谱

高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方

高效排阻液相色谱

高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱( SEC),分子筛色谱,凝胶过滤等,生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法,填料具有一定范围的孔尺寸,大分子进不去而先流出色谱柱,小分子后流出。用于生物大分子分离的传统SEC填料主要是多糖聚合物软胶,只能在低压下作慢速分

东曹:药物分离纯化专家 大、小分子样样行

  【导语】2012第十二届世界制药原料中国展(CPhI)上,东曹(上海)生物科技有限公司盛装参展,众多展品和新品惹人注目:反相和亲水两款分析柱让利大促销;分离蛋白质的C4色谱柱新品亮相,吸引客户眼球;EcoSEC HLC-8320GPC凝胶渗透仪和IC-

BECIA2017新产品奖大盘点:赛默飞、安捷伦、岛津位居三甲

  分析测试百科网讯 2017年10月10日-13日,国内分析测试行业影响力最大的展会——BCEIA2017在北京国家会议中心开幕,展出当今国内外分析测试领域的前沿技术和先进仪器设备。本次展会上,组委会颁布了BCEIA 2017新产品奖,共计22家国产仪器厂商、74个产品。其中获奖最多的厂商是赛默飞