WIKI资讯
WIKI资讯
有很多，比如酸类的：醋酸，磷酸，TFA等缓冲液；碱类的：三乙胺，二乙胺。还有盐类的：磷酸二氢钾，酸酸氢二钾等。作用主要就是调节PH，防止样品解离，便于分离，峰型更好。......阅读全文
实验步骤 一、机制 从 1971 年（Bernardi，1971;Gorbunoff，1990) 就已经幵始定期发表关于 HA 对蛋白质吸附与解吸附的综述。最近的一篇文献 (Kandorietal.，2004) 引用了较早阐述的
羟基磷灰石 (hydroxyapatite,HA) 是一种以磷酸钙为原料的羟基化物, 其大量地用于蛋白质的层析分离主要是在 1991?2009 年，并且最初只是用于重组蛋白的纯化。HA 的使用方法参照 Tiselius 等（1956) 的论述和 Gorbunoff(1985) 的综述。实验步骤一、机
实验材料感兴趣的细胞或组织试剂、试剂盒糖原EDTA缓冲液SDSBSATween 20连接子T4 DNA 连接酶BsmFIPC8SeeDNA乙酸钠乙醇DMSOPCR引物乙酸铵DNA ladder聚丙烯酰胺 TBE凝胶DNA参照pZErO-1 质粒TE缓冲SOC培养液Tris · Cl仪器、耗材微量离心
1、三羟甲基氨基甲烷缓冲液 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8.0）：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800mL，搅拌溶解，并稀释至1000mL，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8.1）：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基
实验方法原理 剪接体 ( spliccosome ) 是真核生物中从初级转录物中切除内含子的催化单位。剪接体包含 U1、U2、U4/U6、U5 snRNP 等 4 种小核糖核蛋白颗粒
剪接体 ( spliccosome ) 是真核生物中从初级转录物中切除内含子的催化单位。剪接体包含 U1、U2、U4/U6、U5 snRNP 等 4 种小核糖核蛋白颗粒（snRNP ) 和大量的非 snRNP 蛋白。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理剪接体 ( splicc
实验方法原理 剪接体 ( spliccosome ) 是真核生物中从初级转录物中切除内含子的催化单位。剪接体包含 U1、U2、U4/U6、U5 snRNP 等 4 种小核糖核蛋白颗粒（snRNP ) 和大量的非 snRNP 蛋白。实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 PBS-Earle缓冲液磷酸盐缓
HPLC/53种缓冲液配制 乙醇—醋酸铵缓冲液（PH3.7） 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60 ml和水20 ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节PH值至3.7，用水稀释至1000 ml即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（PH8.0） 取三羟甲基氨基甲烷12.
一、RNA 制备 模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人
实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非
寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合
实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。实验材料 蛋白酶 KAMV 反转录酶试剂、试剂盒 缓冲液DNase ⅠDNase Ⅰ 缓冲液酚氯仿溶液乙酸钠R
实验方法原理 离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，晶型塑料或超明亮型吊桶式离心管，聚丙烯管，刀片，预设到 30°C 的振荡水浴，预设到 4°C 和 65°C 的水浴
实验方法原理 离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，晶型塑料或超明亮型吊桶式离心管，聚丙烯管，刀片，预设到 30°C 的振荡水浴，预设到 4°C 和 65°C 的水浴实验材料 非重组质粒载体含感兴趣 cDNA 或基因的重组质粒培养细胞或新鲜组织试剂、试剂盒 氯仿DNA变性溶液乙醇甘油贮
实验材料mRNA 显示蛋白翻译反应产物试剂、试剂盒Oligo 纤维素Oligo（dT）结合缓冲液Oligo 洗涤缓冲液Ni-NTA 琼脂糖NI-NTA 结合缓冲液Ni-NTA 洗脱缓冲液鲑精 DNABSADNA splintSuperscript Ⅱ 逆转录酶缓冲液DTT脱氧核苷三磷酸Supersc
实验材料 mRNA 显示蛋白翻译反应产物 试剂、试剂盒 Oligo 纤维素
实验材料 mRNA 显示蛋白翻译反应产物试剂、试剂盒 Oligo 纤维素Oligo（dT）结合缓冲液Oligo 洗涤缓冲液Ni-NTA 琼脂糖NI-NTA 结合缓冲液Ni-NTA 洗脱缓冲液鲑精 DNABSADNA splintSuperscript Ⅱ 逆转录酶缓冲液DTT脱氧核苷三磷酸S
核连缀分析用于确定某个克隆的基因是否受转录调控。理论上，核连缀分析应该在检测稳定状态 mRNA 水平变化的杂交实验之后，而在启动子分析之前进行。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验方法原理离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，
实验步骤 一、化学法和酶法细胞裂解 微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况，而且应用这些
实验方法原理 实验材料 感兴趣的细胞或组织试剂、试剂盒 糖原EDTA缓冲液SDSBSATween 20连接子T4 DNA 连接酶BsmFIPC8SeeDNA乙酸钠乙醇DMSOPCR引物乙酸铵DNA ladder 聚丙烯酰胺 TBE凝胶DNA参照pZErO-1 质粒TE缓冲SOC培养液Tris · C
实验步骤一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况，而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进
实验方法原理 前体 mRNA ( pre-mRNA ) 剪接因子 SR（serine/argininc rich，富含丝/苏氨酸）蛋白家族是将剪接体组装到前体 mRNA 上的重要
实验方法原理 前体 mRNA ( pre-mRNA ) 剪接因子 SR（serine/argininc rich，富含丝/苏氨酸）蛋白家族是将剪接体组装到前体 mRNA 上的重要参与者。SR 蛋白是重要的剪接因子，该家族的不同成员可以在体外或体内指导选择性剪接位点的选择。实验材料 超纯硫酸铵
前体 mRNA ( pre-mRNA ) 剪接因子 SR（serine/argininc rich，富含丝/苏氨酸）蛋白家族是将剪接体组装到前体 mRNA 上的重要参与者。SR 蛋白是重要的剪接因子，该家族的不同成员可以在体外或体内指导选择性剪接位点的选择。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑
前接体是真核细胞核内剪接 mRNA 前体的大分子核糖核蛋白复合体，它由 5 种 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白组成，每一种 snRNP 由一个 snRNA 和几种蛋白质构成。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理前接体是真核细胞核内剪接 mRNA 前体的大分子核糖核蛋
实验方法原理 前接体是真核细胞核内剪接 mRNA 前体的大分子核糖核蛋白复合体，它由 5 种 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白组成，每一种 snRNP 由一个 snRNA 和
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪（PAGE）是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术，于1959年建立，1964年进一步从理论和实验技术上得到改进并推广应用。由于分辨率高，目前已广泛用于蛋白质等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理：
一、亲和纯化样品的前处理 1. 菌液体积-起始目的蛋白量 2. 细菌裂解获得可溶蛋白 · BugBuster Master Mix 蛋白抽提方法 · 机械破碎（如超声等）Ni-NTA 树脂纯化 二、亲和纯化步骤 1. Ni-NTA树脂的兼容性 2. 天然条件纯化 · 柱层析 ·
适用的凝胶总浓度：2%～5%（2）核酸相对分子量与凝胶总浓度的关系：1）核酸相对分子量范围：＜1×104适用的凝胶总浓度：15%～20%2）核酸相对分子量范围：1×104～1×105适用的凝胶总浓度：5%～10%3）核酸相对分子量范围：1×105～2×106适用的凝胶总浓度：2%～2.6%用于大分子
实验方法原理 SELEX 技术是一种利用随机寡核苷酸（DNA 或 RNA）文库筛选靶分子的特异性配基的组合化学技术。最常用的是随机 RNA 文库，因为 RNA 分子中除 G-C、