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胶体金免疫层析试纸条技术及缺点

将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果(胶体金红色)。有三种反应模式:夹心法,间接法,竞争抑制法。 1、双抗体夹心法(测抗原)胶体金试纸原理 以新型冠状病毒为抗原,试纸上有两种针对新型冠状病毒的抗体存在,在试纸不同的位置上。而胶体金标记的抗体是其中一种针对抗原的抗体,在试纸的结合垫上。 (1)当咽拭子、鼻拭子、肺泡灌洗液的样本滴上加样孔之后,再滴加几滴流动介质,当临床样本里面有特异性病毒抗原(Antigen)时,在结合垫处的金标抗体(比如识别冠状病毒单抗和胶体金偶联)会识别并结合病毒抗原,形成“新型冠状病毒-金标抗体”复合物; (2)样品在层......阅读全文

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)

(一)  原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)大总结

(一) 原理免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原 抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分

免疫金标记技术在体外诊断领域的应用

生产企业必须能够克服大量的技术难题才能制备出能应用于诊断领域的免疫金复合物。免疫金标记技术是一种将胶体金颗粒与包括抗原、抗体在内的许多蛋白质标记形成免疫金复合物的技术。虽然这种免疫金标记技术呈 现出多种多样的应用方式,但目前主要应用是以快速检测试纸盒的形 式使用于疾病的诊断和监测。1在过去的十年里,

免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用

  摘要免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一,问世二十多年来发展十分迅速,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。本文从胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术和实际应用等几个方面对胶体金技术作了较系统介绍。  1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此

胶体金及金标检测技术研究进展

继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)之后,一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique, ICG)逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物,利用抗原抗体特异性反应,对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来,该技术因其操作简

免疫胶体金(Immune colloidal gold)

原理  免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸( HAuCl4 )在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

免疫金标记检测方法标准操作程序

  【目的】  保证免疫金标技术检验准确性  【本SOP适用范围】  免疫金标技术  【原理】  氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒,颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥,使其保持一个比较稳定的胶体状态,故称作胶体金。利用胶体金颗粒的高电子密度及其表面能结合生物大分子(如抗体、SPA、植物血凝素和

胶体金标记实验的操作方法与步骤

胶体金标记实验的实验过程主要包含以下步骤:胶体金标记蛋白的制备及其与胶体金之间的用量比例的确定、胶体金和蛋白的结合、胶体金标记蛋白的纯化与质量检测等。1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的p

白话胶体金系列——第一话<烧金> (二)

3.电镜:直观,能看到颗粒形状是否规则,大小是否均一,有无聚集等情况,设备成本高,我没做过,没啥好说的。4.粒径分析仪:可以看出粒径大小和CV,可以通过PDI判断金子是否聚集,比分光光度计有用,比电镜实惠,但是价格也不便宜。第一话——烧金(一)基本概念:1.金子大小:常用20、40、60nm的胶体金

白话胶体金系列——第一话<烧金> (一)

01基本概念1.金子大小:常用20、40、60nm的胶体金颗粒(粒径大小),另外,在说金子大小的时候,有些人还用λ525、530表示,这个是指胶体金最大吸收峰位置,理论上这个值比说40nm要准确,因为40nm是估的,这个是实实在在测的,但是他与颗粒大小仅仅有“一定的“关系,而且这个”一定的“很不一定

免疫胶体金技术的基本知识

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

雌二醇的免疫胶体金试纸法检测

雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体〔1,2〕

胶体金标记实验步骤

1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。(1)待标记蛋白溶液

胶体金标记实验操作步骤

1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 (

雌二醇的免疫胶体金试纸法检测

雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分,为防止儿童性早熟等问题,食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显变化,所以它可以取代酶标记抗体〔1,2〕

混凝沉淀技术全解析

混凝澄清处理投加化学药剂(混凝剂)使得胶体分散体系脱稳和凝聚的过程称为化学混凝。在混凝过程中,含有微小悬浮微粒和胶体杂质被聚集成较大的固体颗粒,使颗粒性的杂质与水分离的过程,称为混凝澄清处理。1.混凝澄清处理的机理(1)胶体的稳定性和ξ电位胶体在水溶液中能持久地保持其悬浮的分散状态的特性叫做稳定性。

白话胶体金系列——第二话<标记>上篇

(一)基本概念为了方便新人与老司机交流,需要掌握一些基本名词和概念,以便准确的表述问题。这些知识不考试,写作时间也有限,关键还没有稿费,所以随便写写,没有咬文嚼字,如果意思表达错了请指正,形式上就不用对着教科书抠字眼了,谢谢。1.抗原、抗体,和二抗:抗原(半抗原):能够诱导产生抗体(免疫原性)并且和

化学混凝 混凝澄清处理的机理

投加化学药剂(混凝剂)使得胶体分散体系脱稳和凝聚的过程称为化学混凝。在混凝过程中,含有微小悬浮微粒和胶体杂质被聚集成较大的固体颗粒,使颗粒性的杂质与水分离的过程,称为混凝澄清处理。1.混凝澄清处理的机理(1)胶体的稳定性和ξ电位胶体在水溶液中能持久地保持其悬浮的分散状态的特性叫做稳定性。水中的胶体物

金免疫技术(斑点免疫层析试验)

一、原理金免疫技术是免疫标记技术之一,金盐被还原成原子金后形成金颗粒悬浮(胶体金),这种金颗粒呈红色,并能与蛋白质等大分子物质结合,因此,可用胶体金作为标记物来检测标本中的抗原或抗体。典型的测定方法有斑点买免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等。二、材料1 、HCG金标试纸条2、妊娠尿液 正常尿液三、方法

土壤酸碱度 详解

  土壤酸碱性是指土壤中存在着各种化学和生物化学反应,表现出不同的酸性或碱性。土壤酸碱性的强弱,常以酸碱度来衡量。土壤之所以有酸碱性,是因为在土壤中存在少量的氢离子和氢氧离子。当氢离子的浓度大于氢氧离子的浓度时,土壤呈酸性;反之呈碱性;两者相等时则为中性。  一、等级划分  土壤酸碱性划分为9等级。

蛋白质纯化胶体过滤法

实验概要本实验介绍了蛋白质纯化胶体过滤法,不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离。主要试剂1. 胶体Sephacryl S-300 (Pharmacia):a. 预先以缓冲液buffer A-150 平衡好,并且使完全沉降后的胶体体积,占全部体积的七至八成;要先预估好胶体

蛋白质的纯化实验——胶体过滤法

不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的蛋白质partition色析法 。实验材料Sephacryl S-300胶体试剂、试剂盒缓冲液buffer A-150仪器、耗材色析管柱铁夹试管铁架水平仪收集器浓缩用离心机 浓缩用离心管实验步骤一、仪器设备色析管柱

蛋白质的纯化实验

胶体过滤法             实验材料 Sephacryl S-300胶体

蛋白质的纯化实验

实验材料 Sephacryl S-300胶体试剂、试剂盒 缓冲液buffer A-150仪器、耗材 色析管柱铁夹试管铁架水平仪收集器浓缩用离心机 浓缩用离心管实验步骤 一、仪器设备色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(frac

蛋白质纯化胶体过滤法

不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的partition色析法 (Pharmacia操作手册, Gel Filtration)。仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(fraction

蛋白质纯化胶体过滤法

不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的partition色析法 (Pharmacia操作手册, Gel Filtration)。仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(fracti

蛋白质纯化胶体过滤法

蛋白质纯化胶体过滤法仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;分划收集器 (fraction collector, 需准备干净试管约100 支);浓缩用离心机 (低速5,000 rpm);浓缩用离心管Centriprep-30 (Ami

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶...

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶体金胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学

蛋白质纯化胶体过滤法

仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;分划收集器 (fraction collector, 需准备干净试管约100 支);浓缩用离心机 (低速5,000 rpm);浓缩用离心管Centriprep-30 (Amicon 4322)