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如何使蛋白质和脂肪酸化学交联

指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。......阅读全文

蛋白质的蛋白质的提取技术

选择材料及预处理    以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用

蛋白质转印法检定蛋白质

蛋白质转印法检定蛋白质      蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经?素洗去SDS,并使蛋白质回?原态抗原性,可使用抗体进?免疫染色 (Towbin et al, 1979)。 仪器用具:电泳转印槽 (Hoefe

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—蛋白质激酶C

试剂、试剂盒 PKC 分析缓冲液组蛋白 HI 储存液磷脂酰丝氨酸甘油二油酸脂 实验步骤 1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物: 5X PKC 分析缓冲液                                        4 μl 10 mg/

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析—凝胶蛋白质激酶分析

试剂、试剂盒 Tris-HClDTT盐酸胍尿素激酶分析缓冲液 仪器、耗材 SDS-PAGE 实验步骤 1. 准备下列材料: SDS-PAGE 要用到的所有试剂 50 mmol/L Tris-HCl,室温(pH 8.0),1 mmol/L DTT 6 mol/

蛋白质分离和分析——凝胶蛋白质染色

实验步骤 基 本 方 案 1 考马斯亮蓝染色检测范围为〇.3〜lMg 每蛋白质条带。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)聚丙烯酰胺凝胶(单 元 12. 3)考马斯亮蓝、银染用固定液考马斯亮蓝染液甲醇/乙酸脱色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 滤 纸(可选)干 胶 仪(可选

蛋白质组和蛋白质组学分析

 随着人类基因 组计划研究成果的公布,人们对基因的认识逐渐清晰,但基因数量的有限性和基因结构的相对稳定性,与生命现象的复杂性和多样性之间存在巨大反差。如何了解众多的基因与危害人类身心健康的疾病之间的关系,对生命科学研究者来说仍是一项长期而艰巨的任务。因此,作为生命活动的直接承担者――蛋白质,成为后

蛋白质分离实验_分离未知 pI 蛋白质

用 CE 进行 IEF分离是选择随后用于在非衍生毛细管柱上分离蛋白的缓冲液系统的有效的第一步。如果没有检测到蛋白质,可能是被吸收到柱的硅表面。在离子去垢剂如 SDS 存在的情况下重复分离过程,这样就会用负电荷包被蛋白质从而阻止吸收。但是,这意味着蛋白质只能依据大小的不同而进行分离。知道蛋白质的 pI

蛋白质染色

  二维凝胶电泳(2-DE)是广为蛋白质组学科学家们应用的经典技术之一,蛋白混合物在两个维度上被分离。第一步是常规的等电聚焦,此过程中蛋白质根据其等电点被分离。接着,第二维使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),将蛋白质按分子量进一步分离。上述两步操作在互相垂直的两个方向上,使分离的蛋

蛋白质纯化

  蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。   一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。用于分离蛋白质的最重要特性有大小、电荷、疏水性和对其他

蛋白质测序

  进行蛋白质测序的方法包括:   埃德曼降解   肽质量指纹图谱   质谱分析   蛋白酶水解法   如果编码蛋白质的基因是已知的,那么目前测序和推断蛋白质序列要容易得多。通过上述方法之一确定蛋白质氨基酸序列的一部分(通常是一端)可能足以鉴定携带该基因的克隆。