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免疫荧光的原理

免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应,使之形成抗原—抗体—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为第一抗体,其它步骤的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,同于血清球蛋白有种的特异性,如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应,因此,制备标记抗体适用于鸡任何抗原的诊断。......阅读全文

免疫荧光

Immunofluorescence Technique (Spector Lab) protocol for immunofluorescence on cells    Immunofluorescence Protocol (Walter Steffen) Methanol

间接免疫荧光

实验方法原理 固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。 实验材料 细胞培养在盖玻片                                                                  产生一抗种属的二抗                  

间接免疫荧光

方案16.11 间接免疫荧光 实验方法原理 固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。 实验材料 细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA 试剂、试剂盒 新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂 实验步骤 1

免疫荧光技术

基本原理   将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 l          磷酸盐缓冲盐

免疫荧光技术

免疫荧光技术 1)  直接法 1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.0.1%伊文氏兰复染。 5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。 6.缓冲甘油封片,镜检。   2)

间接免疫荧光

实验方法原理 固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。 实验材料 细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA 试剂、试剂盒 新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂 实验步骤 1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻

免疫荧光简介

  免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

免疫荧光概述

  免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。   用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体

免疫荧光原理

  免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。  直接法  将

免疫荧光技术

实验方法原理 直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在部位。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBS伊文氏兰仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;2. 加荧光素标记的抗体,湿