如何测定抗体亲和力

在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法,如平衡透析、竞争结合、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、ELISA和固相放射免疫测定法(SPRIA)等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。如果有条件用SPR方法,这是目前国际上流行的方法,该方法灵敏,客观。另外测亲和力之前最好先测定抗体的有效浓度,方法是夹心法,用标准免疫球蛋白做标准品。因为在作OD-抗体浓度曲线时如果抗体浓度不够,做不出来好的S形曲线,达不到最高值。所以建议你先测定抗体的浓度。如果浓度较低的话,你可以浓缩一下,方法很多,如PEG法,真空冷冻干燥,超速离心等等。......阅读全文

美国研究所基于冷冻电镜揭示新冠病毒的恐怖亲和力

   美国国家过敏和传染病研究所疫苗研究中心最近提交的一篇论文对新冠病毒结构进行了研究,并验证了一个结论:新冠病毒 S 蛋白与细胞 ACE2 的亲和力是 SARS 的 10 到 20 倍。  这可能意味着新冠病毒肺炎(COVID-19)的传染性相比 SARS 要高出很多。  这篇最新论文目前被发布在

KinExA分子与完整细胞相互作用系统的原理与应用(二)

结果表明,CAR-T细胞与抗原的亲和力Kd为45.41pM,T细胞表面CAR的表达水平为1.368e+5,Kd与EL的95%置信区间均较窄,数据非常准确可信。 应用二、KinExA在高亲和力检测上应用对于抗肿瘤药市场,目前精准医疗最为成熟的领域还是以靶向药物为代表的抗肿瘤药物。由于单克隆抗体类抗癌药

如何诊断妊娠期-CMV-初次和复发感染?

人体初次感染 CMV 后,病毒进入休眠期并潜伏在人体内。这种病毒可以在人体内被重新激活,称为复发(继发)感染。此外,具有免疫力的个体暴露于外源性新的病毒株可出现再感染。因此,复发或再感染被定义为宿主免疫状态下病毒的间歇性分泌。这可能是由于内源性病毒的重新活化或宿主暴露于外源性新病毒株。复发感染和

TORCH感染的临床常见征象与感染检测方法

近年来,国内外均发表了与TORCH感染相关的临床实践指南,但仍有内容需要加以补充和明确。国内部分专家就TORCH感染筛查、诊断及干预的临床路径进行了专题研讨,达成共识如下:(1)不是所有的TORCH病原体都需要孕前或孕期筛查;对围孕期妇女不需要进行单纯疱疹病毒抗体分型检测,若无临床症状,不需要等待其

ELISA试剂盒中的抗体

在ELISA试剂盒中运用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。多抗取白免疫动物的抗血清,制备较简略,但抗血清成分凌乱,除含针对抗原(多个表位)的抗体外,还含有多种其他抗体,亲和力和特异性相对要低于单抗,且制备周期长,批间差异较大。而单抗仅针对抗体的单一表位,ELISA试剂盒亲和力和特异

KinExA分子和细胞相互作用仪与SPR的技术对比(二)

四、案例案例一:完整细胞的相互作用检测:单克隆抗体XMetA是胰岛素受体(IR)变构部分的激动剂,其激活代谢Akt激酶信号通路,而对有丝分裂胞外信号调节激酶(ERK)信号通路几乎没有影响。为了研究这种选择性信号通路的性质,作者验证了XMetA对CHO细胞中IR,Akt和ERK的特异性磷酸化和活化的影

抗体

抗体是有机体在抗原刺激下产生的,并能与抗原发生特异性结合的一类球蛋白的总称。抗体存在于血清、淋巴液、粘膜分泌物和组织中,但以血清中含量最高,制备抗体也常从血清中获得,所以抗体又常称为抗血清。

杂交瘤和噬菌体展示筛选方法开发

Part 1前言ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法,其实质是亲和力测定方法的一种变种,其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法,用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点,1.待测

ELISA方法学

ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是最为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法,其实质是亲和力测定方法的一种变种,其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法,用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点:待测样本极具多样性,且

抗体发现过程中常见的工程化技术与策略

   在单克隆抗体发现过程中,通过抗体库的筛选,得到能够与靶点特异性结合的优秀候选分子后,就需要通过一定的工程化技术来增强其药理学和其他方面的功能。多种策略可以改善抗体药物的动力学功能,包括亲和力成熟、嵌合或人性化和Fc修饰。为了提高抗体的成药性和稳定性,需要提高抗体的稳定性和聚集性,以及降低免疫原

关于人源化抗体的改型抗体的介绍

  改型抗体也称CDR植入抗体(CDRgraftingantibody),抗体可变区的CDR是抗体识别和结合抗原的区域,直接决定抗体的特异性。将鼠源单抗的CDR移植至人源抗体可变区,替代人源抗体CDR,使人源抗体获得鼠源单抗的抗原结合特异性,同时减少其异源性。然而,抗原虽然主要和抗体的CDR接触,但

乙肝核心抗体的抗体类别

  抗—HBc可分为三型:抗—HBcIgM、抗—HBcIgA、抗—HBcIgG,在HBV感染中这几个型依次出现,也会依次消失,只有IgG这一型可长期存在。在化验室报告的化验单中,如果只标明“抗—HBc”,没有分型,那么它应当是这三型的总和,不过大部分医院化验室报告的都分为IgM和IgG二型。  抗—

多克隆抗体的抗体分类

抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决

乙肝e抗体的抗体阳性

  乙肝e抗体阳性,是指乙肝两对半检查中,第四项呈现阳性,乙肝e抗体阳性说明乙型肝炎病毒复制不活跃,传染性低或很少,是乙型肝炎病毒感染时间已较长久的标志。但如果HBV-DNA阳性,说明血中仍存在乙肝病毒或病毒已变异,不仅有传染性,而且对机体的危害可能更大。  乙肝e抗体阳性在急性自限性感染的恢复期出

抗核抗体的抗体意义

抗核抗体谱包括抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体、抗核内可溶性抗原抗体(ENA)。ENA又包括抗史密斯抗体(Sm)、抗核糖核蛋白体(RNP)抗体、抗干燥综合征A(SSA/Ro)抗体、抗干燥综合征B(SSB/La)抗体、抗硬皮病-70(Scl-70)抗体。临床意义为:[1]ANA:ANA为一系列抗细胞核

抗核抗体的抗体分类

抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗单链(ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随疾病的活动度而升降,病情好转者其滴度多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非自身

常用内参抗体和标签抗体

Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生产高品质的对特定表位有特异性的小鼠单克隆抗体,与其他公司生产的同类产品相比,具有最高的灵敏度和最高的特异性,并且性价

抗核抗体的抗体分类

抗核抗体的分类,由于核抗原不同,有多种不同的ANA 。 抗DNA抗体有抗双链DNA(ds DNA)和抗单链(ss DNA)抗体之分。抗ds DNA抗体与SLE的关系密切,且随疾病的活动度而升降,病情好转者其滴度多下降甚或转阴。抗ss DNA抗体则与抗ds DNA不同,可在多种疾病出现,包括一些非自身

我国学者在人工智能辅助抗体设计领域取得新进展

图 研究成果MEAN与美国麻省理工学院RefineGNN的对比。(A)CDR-H3对比。图中灰色部分表示抗原,绿色和红色表示抗体的重链和轻链,左下角是真实的氨基酸序列以及算法生成的氨基酸序列,图中方框的地方是算法生成的CDR-H3的3维结构。(B)亲和力对比。图中绿色区域是数据集中原始抗体针对目标抗

美国著名院士Science发布免疫学重要发现

  当病菌入侵之时,机体会调整自身适应及摧毁这一特定的靶标,这是免疫学的一个基本原理。然而目前对于免疫系统如何来精炼它的防御蛋白――抗体,从而最有效地瞄准入侵物的机制却仍不是很清楚。来自洛克菲勒大学的一项新研究提供了有关这一选择过程的一些重要新见解。他们的研究论文发布在7月16日的《科学》(Scie

上海交通大学医学院发布亲和力质谱公开招标信息

上海交通大学医学院近日发布亲和力质谱招标项目,预算价格在350万,具体内容如下:  项目概况  亲和力质谱 招标项目的潜在投标人应在微信公众号“东松投标”获取招标文件,并于2024年03月04日 16:00(北京时间)前递交投标文件。  一、项目基本情况  项目编号:0811-244DSITC000

上海交通大学医学院亲和力质谱等采购项目招标公告

上海交通大学医学院采购亲和力质谱、单细胞超高分辨3D快速质谱成像平台、空转原位转印仪,具体内容如下:序号项目编号申购部门项目名称网站链接1202300765生物信息学亲和力质谱https://www.zfcg.sh.gov.cn/site/detail?parentId=137027&article

噬菌体抗体库技术的特点介绍

  1.模拟天然全套抗体库 抗体文库可以达到或超过1011库容,所以能包含B细胞全部克隆。建库的外源基因来自人体外周血,骨髓或脾脏的淋巴细胞提取的mmDNA,mmDNA反转录形成cDNA,这些mRNA是人体多克隆细胞的总mRNA。使用的通用引物采自多个人体,具有人的种属普遍性。抗体的VH和VL基因的

Nature深入阐析免疫防御机制

  在致病微生物侵入后的数周里,人体免疫系统会微调其防御,生成更精确靶向入侵物的一些抗体。来自洛克菲勒大学Michel Nussenzweig分子免疫学实验室的一项新研究帮助解释了免疫系统是如何做到这一点的,并提出了一些可训练身体对抗疾病的新途径。研究结果发表在5月4日的《自然》(Nature)杂志

Cell:揭示身体中的B细胞如何确保多样化的免疫反应

  在生发中心(germinal center)中争夺位置的细胞面临着残酷的录取过程。作为一种免疫系统训练学院,生发中心在接触病原体或疫苗后形成,旨在帮助B细胞完善它们对威胁作出的反应。只有对病原体或疫苗具有最高亲和力的B细胞才能进入这些结构,在那里它们经历了一波又一波的突变,以产生更强的抗体。  

胶体金标记技术及其应用解析

   传统的同源建模技术对抗体进行人源化改造,主要是基于蛋白质一级结构的相似性同时结合已有的蛋白质晶体结构进行同源模拟。现有的多种同源建模技术大部分都没有对已有的抗体序列数据进行分析,在人源化改造过程中存在突变位点不确定的问题,同时抗体特性如表达水平、关键氨基酸的后期修饰预测等无法提前预知。  

HuTech—快速智能的抗体人源化解决方案

   传统的同源建模技术对抗体进行人源化改造,主要是基于蛋白质一级结构的相似性同时结合已有的蛋白质晶体结构进行同源模拟。现有的多种同源建模技术大部分都没有对已有的抗体序列数据进行分析,在人源化改造过程中存在突变位点不确定的问题,同时抗体特性如表达水平、关键氨基酸的后期修饰预测等无法提前预知。  

着丝粒蛋白抗体ZW10抗体的鉴定步骤

着丝粒蛋白抗体ZW10抗体的鉴定:1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体

HuTech——快速智能的抗体人源化解决方案

传统的同源建模技术对抗体进行人源化改造,主要是基于蛋白质一级结构的相似性同时结合已有的蛋白质晶体结构进行同源模拟。现有的多种同源建模技术大部分都没有对已有的抗体序列数据进行分析,在人源化改造过程中存在突变位点不确定的问题,同时抗体特性如表达水平、关键氨基酸的后期修饰预测等无法提前预知。 利用噬菌体展

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体的鉴定步骤

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体的鉴定:1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制