WIKI资讯
WIKI资讯
利用酶反应，分解破坏细胞壁上特殊的键，从而达到破壁的目的。优点：专一性强，发生酶解的条件温和，缺点:酶水解费用较贵，一般只适用于小规模的实验室研究。溶菌酶是应用最多的酶，它能专一地分解细胞壁上糖蛋白分子的α-1，4糖苷键，使脂多糖解离，经溶菌酶处理后的细胞移至低渗溶液中使细胞破裂。......阅读全文
利用酶反应，分解破坏细胞壁上特殊的键，从而达到破壁的目的。优点：专一性强，发生酶解的条件温和，缺点:酶水解费用较贵，一般只适用于小规模的实验室研究。溶菌酶是应用最多的酶，它能专一地分解细胞壁上糖蛋白分子的α-1，4糖苷键，使脂多糖解离，经溶菌酶处理后的细胞移至低渗溶液中使细胞破裂。
（1）实验过程中，需要轻摇试管，以使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果．（2）蜗牛以植物为食，所以唾液中含有果胶酶和纤维素酶，I、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组．其目的是排除无关变量的干扰．（3）离心后收集沉淀物，并用等渗溶液清洗，目的是保持细胞正常形态．（4）要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要
1. 机械法 1.1 组织捣碎 将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等，转速可高达10000rpm/M以上。由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用 1.2
机械法 主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法，常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。1. 组织捣碎机 将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至zui慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等，转速可高达1
样品前处理-细胞破碎技术细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术，由于细菌、酵母、真菌、植物都有细胞壁，但成分不同，且同类细胞结成的网状结构不同，因此其细胞壁的坚固程度不同，总体呈现递增态势。动物细胞虽没有细胞壁，但具有细胞膜，也需要一定的细胞破碎方法来
液体剪切压力：通过将样品从高压腔转入到低压腔时产生的快速压力落差来破碎细胞优点：破碎快速有效,适合大体积细胞破碎缺点：可导致样品温度升高（操作时需要冷却系统）超声：通过高频率的超声波破碎细胞粉碎优点：操作简单缺点：可导致样品温度升高,其很难通过冷却系统降温,剪切力有可能导致蛋白质受损,噪音较大,破碎
自溶作用 是酶解的另一种方法，所需溶胞的酶是由微生物本身产生的。影响自溶过程的因素有温度，时间,pH缓冲液浓度，细胞代谢途径等。自溶法在一定程度上能用于工业规模，但是，对不稳定的微生物容易引起所需蛋白质的变性，自溶后的细胞培养液过滤速度也会降低。 渗透压冲击 是较温和的一种破碎方法，将细胞
酶水解法又称酶消化法，它是在-记pH值及常温条 件下，用不同的酶使生物检材如组织、血液中呈结合状态的毒物解离和释放出来的过 程。由于一些毒物进入体内后与血液或组织 中的蛋白质等结合成为紧密的结合态，无法用有机溶剂直接提取到游离态的毒物，只有先采用一定方式促使结合态的毒物解离出来 后再用有机溶剂提
组织细胞的破碎方法很多，有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。在破碎前，材料常需要预处理，如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织，脂肪组织和血污等，植物种子需要除壳，微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。不同实验规模、不同实验材料和实验要求，使用的破碎方法和条件也不同。一些坚韧组织
组织细胞的破碎方法很多，有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。在破碎前，材料常需要预处理，如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织，脂肪组织和血污等，植物种子需要除壳，微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。 不同实验规模、不同实验材料和实验要求，使用的破碎方法和条件也不同