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简述亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大提高ELISA的敏感度。 亲和素-生物素系统在ELISA中的应用有多种形式,可用于间接包被,亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素,原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合,通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量,而且......阅读全文

简述亲和素-生物素系统在ELISA中的应用

  亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小

生物素-亲和素系统介绍

生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素(biotin,B)

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验

检测未知抗原 检测未知抗体             实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非

标记亲和素生物素法(BA-ELISA)实验

实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原

生物素-亲和素系统的基本类型及原理

基本类型有两种,一类以游离亲和素为中间物,分别连接包含生物素大分子的待检反应体系和标记生物素,称为BAB法;后来又在此基础上发展了亲和素-生物素化酶复合物技术(ABC)。另一类是直接用标记亲和素连接生物素化大分子反应体系进行检测的BA法,或称标记亲和素-生物素法(LAB)。此外,依据待检反应体系中所

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

亲和素-生物素系统:如何减少干扰更好地应用于免疫...

亲和素-生物素系统:如何减少干扰更好地应用于免疫检测-1-什么是亲和素-生物素系统(链霉)亲和素-生物素是免疫检测中常用的信号放大系统。亲和素是蛋清中常见的糖类蛋白,由四个相同的亚基组成。每一个亚基都包含一个生物素结合位点,因此一个理论上正常的亲和素能够结合4个生物素。亲和素与生物素具有非常强烈的亲

生物素亲和素酶联免疫吸附试验(BAS-ELISA)

生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotinavidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放

生物素-链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(二)

       注意:        Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1)。       FQY = 在水性缓冲液(pH 7.2)中的荧光量子产率。        2.生物素化二抗       我们提供生物素化的二抗,可与基于链霉亲和素的扩增技术