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细胞核酸DNA和RNA是唯一一类可以携带信息的大分子。由于所有的细胞都含有这种分子，可以利用它作为检测的标靶。标靶通常是一个特异性核酸序列，它可通过以补体核酸分子作为探针来检出。与免疫学方法相似，探针也需要加附适当的标记，如放射性同位素、酶或发光的标识物。Fitts等人在食品沙门氏菌检测中引入了第一代DAN—RNA杂交技术，此法应用的探针含有用放射性同位素标记的伤寒沙门氏菌DNA片段，其敏感性高，经大约48h的增菌步骤后，检测极限可达108个细菌/ml，但由于要使用放射性同位素，只能在专门的实验室应用，此方法的优点都被抵消了。为此，以核酸杂交为基础的第二代技术—比色计目前已发展起来。这种方法依赖于沙门氏菌核糖体RNA(rRNA)—核糖体发育过程中储存的核酸成分的检测。核糖体是细胞蛋白质合成器的一部分，每个细菌细胞中存在5000～20000个复制体，而相比之下染色体DNA复制体仅2～10个。这种天然富含rRNA标靶序列的情况使......阅读全文
细胞核酸DNA和RNA是唯一一类可以携带信息的大分子。由于所有的细胞都含有这种分子，可以利用它作为检测的标靶。标靶通常是一个特异性核酸序列，它可通过以补体核酸分子作为探针来检出。与免疫学方法相似，探针也需要加附适当的标记，如放射性同位素、酶或发光的标识物。Fitts等人在食品沙门氏菌检测中引入了
利用抗原-抗体反应的显著特异性，来进行细菌的鉴别和血清学定型，已有半个多世纪的历史。细菌菌体或鞭毛抗原的特异性抗体的存在，使得人们可以建立一些快速方法来检测以食品为载体的病原。已经建立的沙门氏菌免疫学检测方法有许多种，大致可分为以酶标抗体(ELISA)，荧光抗体染色(免疫荧光法)，同位素标记抗体
自19世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类的一种病原以来，检测方法学都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基础上。此后的60年间，用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。但至少有三个因素限制了用于临床病料的方法应用在食品分析上。第一，通常，沙门氏菌的含量水平
用于沙门氏菌分析的传统方法是食物样品分步增菌，以增加病原的可检出率，这种培养方法总体可分4个不同阶段或步骤。第一步(预增菌)，将样品加到一种高营养、无选择性的培养基中，温度37℃，使那些“致伤”的细菌复苏及使所有微生物生长。虽然缓冲胨水被建议常规使用(由于其可保持溶液pH值稳定)，但对培养基的选
第一，PCR反应是快速的。整个DNA提取，扩增和检测的过程通常少于6小时，如果反应利用嵌套的引物，过程可能长些。对于一些样本来说，比如来自粪便和表皮，就需要在DNA提取中增加步骤，这样就延长了整个检测的时间到14小时。 用购买的核苷酸提取工具就能缩短检测时间，同时机械进行提取，使PCR方案最优化或
（一）巢式PCR 定义： 是对靶基因进行二次扩增，第二次扩增用的模板就是第一次的扩增产物。 应用： 可以得到足够和特异性的扩增产物，在靶基因表达量比较低或者一些其他原因导致的，使用常规的PCR无法得到理想的产物得时候。 注意事项： （1）第二次扩增的时候，必须至少有一条引物是另外设计
肠炎沙门氏菌（Salmonellaenteritidis ）属于无宿主特异性而有侵害性的病原菌之一，宿主包括人和各种动物。该菌不仅能引起家禽发病死亡造成严重的经济损失，而且被污染的家禽产品作为肠炎沙门氏菌的携带者，还严重危害人类健康。 据报道，日、美等发达国家发生的食物中毒事件中40%～80%是
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Wizard SV96 PCR 纯化系统提供了一个以膜为基础，用于从 96 孔板中进行高产率 PCR纯化的方法。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品 仪器、耗材 真空装置真空泵真空废物收集装置真空管PCR 纯化系
试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品 仪器、耗材 真空装置真空泵真空废物收集装置真空管PCR 纯化系统 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 乙醇，80%(75 ml/板；使用前配制） 2. 核酸和寡核苷酸 在 96 孔板中的 PCR 样品（每样品 20?