柱层析的装柱和上样方法
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂 “走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。虽然产生的气......阅读全文
固相萃取柱如何装柱
用异丙醇浸泡填料，在柱下端放微孔滤膜，开动真空泵抽，这样填料均匀分布，上面再加一层筛板压实。外面买的成品柱两头都有筛板，将填料夹在中间，这样不会散。如果没有条件可以试试棉花，但是这只用于大体积的制备柱。小柱还是不适合。
高效液相色谱柱怎么装柱
一般来说是这样：1. 色谱柱应该是可以直接接在匀浆罐上的，如果不能，则需要一个转换接头。这个转换接头的尺寸很重要，既要能防止漏液，又要避免过硬或尺寸不合适而导致色谱柱接口螺纹的损坏；2. 具体装柱过程一般来说是①先以合适的匀浆液（多为有机溶剂，刘国诠老师的《色谱柱技术》一书中列的比较全，可供参考）将
层析法介绍
一、纸层析纸层析创立于1944年，和薄层层析一样，纸层析不仅可以用来分离、检识、测定中药中复杂的有效成分，而且可以于少量成分的提取精制。它是一种以滤纸上吸附的水为固定相，滤纸作为支持剂的分配层析法。纸层析应用较广，其主要用途是为分配薄层及分配柱层析摸索条件。虽然纸层析比较费时，易产生拖尾、不耐腐蚀性
柱色谱法的装柱方式是什么？
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱。
关于柱层析的实验方法和技巧
(注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！！)常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 1、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的
过柱子操作问题——装柱
柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气
离子交换层析的预处理和装柱的相关介绍
对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒，以保证有较好的均匀度，对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理，使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理，使最终转为-OH-型或盐型交换剂；对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理，使
层析技术概述（三）
柱层析的基本装置及基本操作目前，最常用的层析类型是各种柱层析，下面就简述柱层析的基本装置及操作方法，薄层层析的装置和操作将在后面详细讨论。1. 柱层析的基本装置柱层析的基本装置示意图如图3－3 所示：2. 柱层析的基本操作柱层析的基本操作包括以下一些步骤：⑴ 装柱柱子装的质量好与差，是柱层析法能否成
树脂柱和层析柱一样吗
层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。凝胶过滤层析是利用一定大小孔隙的具有网状结构的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)而树腊吸附柱；通俗的说，就是一种装载(阳、阴)离子交换树脂的设备，简称离子交换(柱)器，目的是离子交换树脂“吸附”水中阳离子或阴离子等盐类
干湿上样法对柱色谱分析效果的影响
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。（G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质）2.利用离子交换法，选取DEAE-阴离子纤维素DE5
干法装柱法的技术细节
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。干法装
实验室装柱的注意要点
空柱的准备准备步骤：空柱中筛网需要定期用 0.5 M 的 NaOH 超声清洗，并且用 20 % 乙醇排除气泡，内部接一定要确保拧紧，各个部件组装完成后用水检查气密性。将空柱用柱夹固定，连接到层析仪中，保证水平和垂直，对于凝胶过滤填料的装填，需要用水平仪检查。 填料匀浆的准备反复使用的填料：需要对填料
层析填料装柱的注意事项
装柱前要仔细看填料的使用说明书，每种填料都有自己的特性，以及特殊的装柱方法，针对不同的空柱，也要注意方法可能不同。 1、装柱前要仔细看填料的使用说明书，每种填料都有自己的特性，以及特殊的装柱方法，针对不同的空柱，也要注意方法可能不同; 2、填料要加水搅拌成均匀悬液，悬液浓度依填料而不同，一般70-8
SPE上样
目的：以适当的流速上样，最大限度地提高分析物在固定相中的保留率。典型流速为 1mL/min。高流速会导致萃取不一致。
人造沸石装柱注意事项
人造沸石装柱注意事项如下：1、使用前要清洗去除粉尘，否则这些的粉尘可能暂时会影响水质的清洁度。但建议不要直接用新鲜的自来水冲洗，因为沸石的多孔隙一旦吸附大量自来水中的氯以及漂白粉，在随后放置到过滤器中使用时对水质造成的破坏，因此在使用前需要对其冲洗。2、一般来说，简单清洗难以将沸石多孔隙中的杂物清洗
柱色谱中，分离液体混合物和固体混合物，如何装柱？
应该采用干法装柱，先在柱底塞上少许玻璃纤维，再加入一些细粒石英砂，然后将准备好的吸附剂用漏斗慢慢加入干燥的色谱柱中，边加入边敲击柱身，务必使吸附剂装填均匀，不能有空隙。吸附剂用量应是被分离混合物量的30～40倍，必要时可多达100倍。加够以后，在吸附剂上覆盖少许石英砂。
柱层析分离实验方法和技巧
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 一：柱子可以分为：加压，常压，减压 1.压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其
顶装式磁翻柱液位计防护等级提升的方法介绍
顶装式磁翻柱液位计防护等级提升的方法介绍 顶装式磁翻柱液位计的主要安装方式有顶装方式和侧装方式两种。顶装式磁翻柱液位计的工作原理与侧装磁翻板液位计大体来说别无二致。由于安装于容器顶部，当容器内的液位升降时，浮筒内的磁性浮子也随之升降，而浮球的升将又会引发磁性翻片反转变色，以指示出实际的液面
关于离子交换层析的预处理和装柱的相关介绍
预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒，以保证有较好的均匀度，对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理，使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理，使最终转为-OH-型或盐型交换剂；对于阳离子交换剂则用“酸-
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。（G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质）2.利用离子交换法，选取DEAE-阴离子纤维素
硅胶柱层析的操作技术
硅胶柱层析的原理利用吸附原理，即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异，而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。硅胶柱层析的操作方法及注意事项 ：装柱 操作要点：装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。 有干法装柱和湿法装柱两种方法（1）干法装柱：将硅胶通过漏斗装入柱内，中间不应间断，形成一细流
TLC柱层析中硅胶的使用
硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了，有时还会有大量的硅胶剩余，浪费硅胶，这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是 100-200 目，100 毫升硅胶的质量在47 克左右，如果装一个直径是 2.8 厘米的柱子，可以装 18 厘高。为了避免浪费硅胶和溶剂，最初学习装
镍柱上的咪唑
为什么咪唑可以把镍柱上的组氨酸蛋白洗脱下来?(1) 发布时间：2018-11-09 蛋白纯化 分子筛。 随着分子生物学的发展，越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术，并研制成套试剂盒，使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的，分子克隆与表达的
装柱机的动力是压缩空气
1.装柱机工作压力较高，管路衔接螺丝如有松动，则有液体渗出，并经过机箱底部排液口流出，因而需求定时查看各管路衔接螺丝是不是松动，将危险因素降至zui低。2.装正相柱时，运用的活动相通常都对错极性很强的试剂，这些试剂对装柱机内部的密封圈腐蚀性很强，因而，在装完柱以后，应立即将体系换成对密封圈无损害的乙
装柱机的动力是压缩空气
1.装柱机工作压力较高，管路衔接螺丝如有松动，则有液体渗出，并经过机箱底部排液口流出，因而需求定时查看各管路衔接螺丝是不是松动，将危险因素降至zui低。2.装正相柱时，运用的活动相通常都对错极性很强的试剂，这些试剂对装柱机内部的密封圈腐蚀性很强，因而，在装完柱以后，应立即将体系换成对密封圈无损害的乙
干法装柱中气泡的解决办法
解决的办法是：第一、硅胶一定要压结实；第二、 一定要用较多的溶剂"走柱子"，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。 也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂(我一般垫张滤纸，撒上石英砂，再放些棉花)，防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个
干货贴之「载量和上样量」
在做层析实验的时候可能时常会遇到一个问题：一次实验可以上多少样品呢？多也不是少也不是，上样多了会造成一部分样品损失或者达不到预期的分离效果，上样少了无法充分使用层析柱还要增加重复实验或者使用更大层析柱，真是件纠结的事情。我们今天要来给大家介绍的就是不同的层析柱应该如何确定上样量。 层析柱上样量由
色谱装柱机应用及工作原理
以填装5um 硅胶 4.6×250 分析柱为例连接装柱所需空压机和色谱装柱机，确保装柱机工作时机身稳固；称取填料3.0-3.5g （4.6×250 分析柱标准需要2.8g，经验3.2g比较合适）；用40-50ml异丙醇（或异丙醇与乙腈比例1：1）溶解填料，用玻璃棒搅拌均匀后用超声波超3分钟， 以确保
层析技术(色谱法,Chromatography)概念、分类和操作(3)
柱层析的基本装置及基本操作目前，最常用的层析类型是各种柱层析，下面就简述柱层析的基本装置及操作方法，薄层层析的装置和操作将在后面详细讨论。(1)柱层析的基本装置柱层析的基本装置，如图2－21 。(2)柱层析的基本操作柱层析的基本操作包括以下一些步骤：①装柱柱子装的质量好与差，是柱层析法能否成功分离纯