用于提取RNA新鲜组织如何保存

市场上有一种非冰型RNA样品保存液.有些公司叫RNAwait,或者还有别的名称,你可以了解一下.很多公司都有的.非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。产品特点1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。3.RNA完整,因RNAwait能迅速抑制组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。5.反复冻融,经RNAwait处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。6.结果准确,RNAwait进入细胞十分快......阅读全文

植物组织RNA提取的要点与技巧

从植物组织中提取RNA 是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA 以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学研究,都需要高质量的RNA 。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA 是顺利进行上述研究的关键所在。从文献报道上看

植物组织RNA提取的难点及对策

植物组织RNA提取的难点及对策  从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学研究,都需要高质量的RNA。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究

病毒-DNA-的提取实验——新鲜或冷冻组织中病毒-DNA-的提取

实验材料新鲜或冷冻组织试剂、试剂盒匀浆缓冲液裂解液仪器、耗材剪刀匀浆器离心机实验步骤1. 取新鲜或刚解冻的组织去除血水和结缔组织,在冰浴上剪成小碎块。2. 将组织碎块移入预冷的匀浆器中,按 10 ml/g 加入匀浆缓冲液,混匀,制成匀浆液。3. 将匀浆液移人 Ep 管, 5000 r/min 离心1

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

下述方案是经修改过的 Trizol 方案,用于从植物组织中分离 RNA,其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤,以选择性地沉淀 RNA,而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态

动物组织/细胞总RNA的制备及检测

实验目的:使学生掌握采用Trizol抽提法从动物新鲜组织或细胞制备总RNA的实验技术,以及用紫外分光光度法检测RNA的纯度及定量、用琼脂糖电泳法检测RNA的完整性及质量。实验原理:Trizol是一种新型的总RNA即用型制备试剂,适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA。Trizol 试剂是由苯酚

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇

哺乳动物组织样品RNA的抽提

哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液

如何从脂肪组织中高效提取RNA?

前言RNA 的提取是肿瘤研究的重要内容。在乳腺癌的研究中,乳腺癌样品通常含有较高含量的脂肪组织和结缔组织,而脂肪组织由于密度小,通常漂浮于液面,使样品难以被充分研磨。若研磨不充分,会导致样品离心后不能得到明确清晰的分层,多数老师都会选择牺牲提取量以保证提取效果。深圳大学医学院的老师们正是遇到了上述的

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA-实验

以下概述的是 ConcertPlant 试剂(Invitrogen) 所附带的方案。该方案不是以酚为基础的,但需要加氯仿。该试剂用于多种植物的组织中分离 RNA, 包括蓝叶云杉针、马铃薯块茎、玉米种子和棉花叶。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 实验材料

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA-实验

实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂NaCl氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水 实验步骤 一、材料 1.缓冲液、溶液和试剂 ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen),4°C预冷 NaCl,5mol/L(无RNA酶)

从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验

实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水消化缓冲液(lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇

从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验

            实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖

从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验

该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒甲酰胺

用于检测植物组织RNA的原位杂交法

用于检测植物组织RNA的原位杂交法(一)组织切片制备l      植物组织的甲醛固定和包埋1.将植物组织切成小块,立即放入一个装有10~50ml固定剂溶液的烧杯中,把烧杯放到真空脱水机内。调节真空度以形成一个温和的真空,然后慢慢恢复常压。微量便于固定剂渗入组织,必须反复真空和非真空状态。待固定剂充分

组织和细胞RNA的制备——(异硫氰酸胍法)

[试剂主要]1.CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2.变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存备用。3.2 M乙酸钠:pH 4

从富含多糖的植物组织中提取和纯化-RNA

实验方法原理 硫氰酸胍能溶解细胞并使蛋白变性. 当用于抽提缓冲液时,可产生无 RNase 的环境□组织抽提后,以中等转速离心匀浆液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿将上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白质位于苯酚相和两相交界面。用乙酸钾将位于水相的多糖选择件的沉淀出来,然后用氯化锂选

从富含多糖的植物组织中提取和纯化-RNA

            实验方法原理 硫氰酸胍能溶解细胞并使蛋白变性. 当用于抽提缓冲液时,可产生无 RNase 的环境□组织抽提后,以中等转速离心匀浆液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿将上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白质位于苯酚相和两相交界面

异硫氰酸胍酚法植物组织总RNA的制备

异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下:GIT与β-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性;GIT与 十二烷基肌氨酸钠 (Sarcosyl)作用使蛋白质变性,从而释放RNA;酸性条件下DNA极少发生解离,同蛋白质一起变性被离心下来,RNA则溶于上清中。该法所提 RNA纯度高完整性好较适合纯化mR

不同处理组织的方法对提取RNA产量的影响

            实验方法原理 RNA 提取过程中最应注意的是:组织或细胞在变性液中完全裂解的同时,如何抑 RNase 引起的 RNA 降解问题。在直接加工新鲜组织时,所有的细胞能尽可能快的接触变性剂以完全裂解这一步是相当重要的。一些难以加工的组织,例如:

植物组织总RNA的制备:异硫氰酸胍—酚法

异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下:GIT与β-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性;GIT与 十二烷基肌氨酸钠 (Sarcosyl)作用使蛋白质变性,从而释放RNA;酸性条件下DNA极少发生解离,同蛋白质一起变性被离心下来,RNA则溶于上清中。该法所提RNA纯度高完整性好较适合纯化mRNA,

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

            试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE

动植物组织总RNA提取(Trizol法)和mRNA提取

一、材料  水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备   研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽。    三、试剂   1、无RNA酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水,然后加入0.01%的DEPC(体积/体积),处理过夜后高

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE 缓冲液异丙醇无水乙醇乙醇 DEPC 水实验步骤 一 材料与设备1)RNA 消化液:每 100ml 包含 40ml 4mol/L 硫氰酸胍,3mllmol/L Tris-HC(PH7.6),2

不同处理组织的方法对提取RNA产量的影响

实验方法原理 RNA 提取过程中最应注意的是:组织或细胞在变性液中完全裂解的同时,如何抑 RNase 引起的 RNA 降解问题。在直接加工新鲜组织时,所有的细胞能尽可能快的接触变性剂以完全裂解这一步是相当重要的。一些难以加工的组织,例如:坚硬的肿瘤、细菌细胞、植物根部等,即使使用匀浆器一般也

输血并非越新鲜越好

包括部分临床医生在内的许多人都认为,在生病、手术等需要输血的情况下,输血越新鲜越好,以往甚至有输″热血″的事情发生,这些都是不正确的观念。首先,血液是否新鲜是一个相对概念,应视输血目的而定,并非越新鲜越好。如输血的目的是纠正贫血、改善血液携氧能力,输注保存期内一天红细胞均可;如为了补充粒细胞,用全血

输"新鲜血"更好吗?

    血液储存时间是否会影响输血患者的病情转归?这一直是颇具争议的临床输血问题,也是当前输血医学研究的热点之一。    什么是新鲜血?    对于什么是新鲜血, 输血业界并无明确标准,一般认为是储存时间少于1-2周的血液或血液成分。    血液能储存多久?    在现代采供血体系中,血液在

什么是新鲜全血?

新鲜全血的新鲜度很难下定义,目前尚缺乏公认标准。目的不同,新鲜全血的含义就不一样:输血目的为了补充红细胞,保存期内全血可视为新鲜血。例如,补充粒细胞,8小时之内的血视为新鲜血;补充血小板,12小时之内的血视为新鲜血;补充凝血因子,24小时之内的血视为新鲜血。

稻谷新鲜度测定仪——测稻谷新鲜程度的专用仪器

稻谷的新鲜与否是与其品质和营养价值密切相关的重要因素。新鲜的稻谷不仅味道更好,而且在加工和储存过程中也更能保持其营养成分的完整性。为了快速判断稻谷的新鲜程度,稻谷新鲜度测定仪,这台专业测稻谷新鲜度的专业仪器,为我们提供了更加详细及精确的数据。稻谷新鲜度测定仪的工作原理:稻谷新鲜度测定仪的工作原理既简