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从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE 缓冲液异丙醇无水乙醇乙醇 DEPC 水实验步骤 一 材料与设备1)RNA 消化液:每 100ml 包含 40ml 4mol/L 硫氰酸胍,3mllmol/L Tris-HC(PH7.6),2.4ml 30% N-十二烷基肌氨酸钠,DEPC处理水(54.6ml)2)β-巯基乙醇:用前必须将其加入到消化液中,每 l00ul 溶液加 0.28ul 4℃ 储存3)蛋白酶 K(20mg/ml):溶于 DEPC 水(50%)和甘油(50%),储存于 一20℃4)水平衡苯酚:对光和氧化作用非常敏感,为了减少酚的氧化速率,在储存液中加入8-羟喹啉(0.1%)酚/水使用液可放于深色瓶中 4℃ 保存,储存液必须放于 一20°C保存,有效期 2 年5)氯仿6)糖原:1.0 mg/ml 溶于水,分装储存 一20℃7)TE缓冲液:10 mmol/......阅读全文

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织样本提取出高质量DNA/RNA的难点和注意事项

从石蜡包埋组织本中提取可用于下游应用的高质量的生物分子是比较困难的,存在的主要难题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。那么如何从石蜡包埋的组织样本中提取出高质量的DNA/RNA就成了关键问题,这里推荐专用的BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒。BIOG石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(BIOG DNA

石蜡包埋组织样本提取出高质量DNA/RNA的难点和注意事项

从石蜡包埋组织本中提取可用于下游应用的高质量的生物分子是比较困难的,存在的主要难题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。那么如何从石蜡包埋的组织样本中提取出高质量的DNA/RNA就成了关键问题,这里推荐专用的BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒。BIOG石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(BIOG DNA

2.1.8 从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

从病理科取来的经福尔马林固定、石蜡包埋的组织可用于RNA 表达分析.常规固定和石蜡包埋后,从活组织、手术、尸体组织中分离出来的 RNA 并不完全降解.并且即使在切除后未立即固定,富含 RNase 的器宫如胰腺内仍存在大约 100 个碱基或更长的 RNA碎片。下面介绍一种从 6〜8 um 组织切片中提

基础知识:福尔马林固定石蜡包埋组织DNA提取

本篇文章是关于一个我们很少被问问题的题目,因为太简单,方法很常规结果也很少出错。我想说的是:福尔马林固定石蜡包埋组织的DNA提取。什么是FFPE组织?FFPE指的是为维持细胞核蛋白结构,先用福尔马林固定然后固体石蜡包埋,以便使用超薄切片机切成5-10微米厚的薄片的组织样品(通常是疑似肿瘤组织)。福尔

临床样本核酸提取全攻略

¤ 临床检验样本RNA的提取人和动物全血、血清、血浆、脑脊液、人淋巴细胞中提取总RNA或病毒RNA——血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)货号:RP4001  700元/50次血清、血浆、全血(或其他含病毒的液体)中同时提取病毒基因组和RNA——病毒基因组DNA/RNA快速提

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

生物样品的常温保存

摘要: 高质量的生物样品是组学研究和个性化医疗过程中临床检验顺利实施的前提。生物样品的保存方式关系到待检样品的质量和检测的结果。样品的适当的处理、保存方式是最终获取准确测定结果必不可少的一环。常温保存能耗少,环保,效费比较高,是一种有潜力的生物样品保存方式。 正文: 生命科学领域高通量技术的发展促进

Nat Rev Genetics | 环状RNA的合成与功能

  环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种新兴的内源性非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),是继microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非编码RNA家族中极具研究潜力的新成员。越来越多的研究表明,环状RNA具

常用的分子生物学基本技术1

DNA重组技术(或基因工程)是20世纪生物学的伟大成就,并已渗透到生命科学包括医学 各个领域,为肿瘤的实验研究和临床诊断及治疗提供了崭新的技术和有用的工具。本附录扼要介绍在分子肿瘤学领域中常用的分子生物学基本技术及其在肿瘤研究中的应用,着重介绍它们的原理和应用。至于具体的技术方法和操作步骤可参阅《分

采用 RNA ScreenTape 分析法进行 DV200 评估

  Eva Graf   安捷伦科技有限公司   Waldbronn, Germany   摘要   RNA 测序文库制备工作流程的成功与否在很大程度上取决于 RNA 起始材料的质量。采用 Agilent RNA ScreenTape 分析法获得的 RNA 完整值当量 (RINe) 是一种评

打破铁律的方法只有一个

  高效率尽显技术优势   “近年来,虽然国内外生命科学领域的研究发展很快,但由于缺乏与海量候选基因再筛查和功能分析相配套的、性能可靠的、多用途高通量的下游检测技术,同时也没有一种利用一个组织块同时完成上述全部实验内容的技术方法,从而很难保证用于上游检测和下游核实的组织样本来源于(基本)相同的

采用 RNA ScreenTape 分析法进行 DV200 评估(一)

摘要RNA 测序文库制备工作流程的成功与否在很大程度上取决于 RNA 起始材料的质量。采用 Agilent RNA ScreenTape 分析法获得的 RNA 完整值当量 (RINe) 是一种评估标准 RNA 测序的样品完整性的可靠且可重现的指标。由于 RNA 降解以及样品体积有限,从福尔马

原位杂交中的放射自显影技术

            实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料

方案27.8 原位杂交中的放射自显影技术

            实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料

方案27.8 原位杂交中的放射自显影技术

实验方法原理将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。实验材料糖原琼脂糖二硫苏糖醇二硫苏糖醇试剂、试剂盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-异戊醇乙酸钠无水乙醇层析柱流动相缓冲液苯酚氯仿-界戊醇闪烁液组织洗涤液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K缓冲液蛋白酶

科学家尝试破解一小撮异常反应造福广大癌症患者

   如果X与大部分晚期膀胱癌患者一样,她可能现在已经死了。在第一次确诊后,她接受了标准化疗。结果失败了。然后,她参加了一个药物临床试验,该药物最初被批准用于治疗其他肿瘤,但科学家希望知道,它是否能作用于转移性膀胱癌。结果似乎不行——参与试验的其他患者进展情况均不好。  但X却好于预期。美国纽约纪念

DNA提取仪应用领域

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样

解读《肿瘤个体化治疗检测技术指南》:9大检测技术

  肿瘤的个体化治疗基因检测已在临床广泛应用,实现肿瘤个体化用药基因检测标准化和规范化,是一项意义重大的紧迫任务。  为进一步提高肿瘤个体化用药基因检测技术的规范化水平,7月31日,国家卫生计生委个体化医学检测技术专家委员会,在广泛征求意见的基础上,制订了《肿瘤个体化治疗检测技术指南(试行)》。  

核酸纯化仪应用领域/核酸纯化仪

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样

生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...(四)

FFPET 样本特异性RealTime ready qPCR检测潜在生物标志物假设检验我们使用的第一套临床样本来自于各种用于人类研究的福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织。肿瘤来源的 FFPE  组织是临床试验或生物标志物研究中,治疗复合物研发最具有相关性的样本材料。使用 High

原位PCR技术基本原理、类型、步骤和应用-2

标本的制备原位PCR技术可应用于细胞悬液、细胞涂片、冰冻切片以及石蜡切片。相比较而言,以悬浮的完整细胞做原位PCR效果最好,石蜡切片效果最差。随着技术方面的一些问题被解决,近年也有从石蜡切片中得到满意的PCR效率的报道。效果不好的原因是多方面的,如:玻片上做PCR,热传导较差,热对流不均匀,TaqD

显微切割技术

  一、显微切割技术出现的背景   在分子病理学研究中,常常遇到两个比较棘手的问题:   一是选取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同质性。我们人体的各种组织绝大多数是由多种不同细胞组成的异质性的细胞群,这种选取同质性的研究材料问题在对人体组织的深入研究中常常遇到却又不易解

显微切割技术

  一、显微切割技术出现的背景   在分子病理学研究中,常常遇到两个比较棘手的问题:   一是选取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同质性。我们人体的各种组织绝大多数是由多种不同细胞组成的异质性的细胞群,这种选取同质性的研究材料问题在对人体组织的深入研究中常常遇到却又不易解

从1966年保存的淋巴结样本中提取出HIV-1基因组

  在一项新的研究中,来自美国、比利时和刚果民主共和国的研究人员从一种已在石蜡中保存了50多年的淋巴结组织中提取出近乎完整的HIV-1基因组。这种样本是迄今为止发现的最早的HIV-1基因组,比此前最古老的样本早了十年。相关研究结果近期发表在预印本服务器bioRxiv上,论文标题为“A near-fu

bioRxiv:从1966年保存的淋巴结样本中提取出HIV-1基因组

  在一项新的研究中,来自美国、比利时和刚果民主共和国的研究人员从一种已在石蜡中保存了50多年的淋巴结组织中提取出近乎完整的HIV-1基因组。这种样本是迄今为止发现的最早的HIV-1基因组,比此前最古老的样本早了十年。相关研究结果近期发表在预印本服务器bioRxiv上,论文标题为“A near-fu

【硬菜】分子诊断工具介绍

  因分子技术具有内在准确性、敏感性、特异性和周转迅速的特点,带来了分子诊断行业的快速发展。此外,因为分子诊断技术具有准确性、敏感性和特异性,实验室人员能够从很小量的样本中就可获得有效的结果。这对法医检测领域来说是非常有用的,但同时该技术也可以检测到目标物质的极低浓度,从而使临床医生在极早期阶段就能

2019年8月HIV研究亮点进展

  人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV),即艾滋病(AIDS,获得性免疫缺陷综合征)病毒,是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1983年,HIV在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(lentivirus),属逆转录病毒的一种。HIV通过

核酸提取仪应用领域

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。磁珠自动核酸提取纯化系统是使用磁珠法技术,可广泛应用于基因组学、疾控医疗、食品安全、法医

四款主流的激光捕获显微切割平台(下)

  目前市场上主要有四家公司提供激光显微切割的平台,他们分别是Arcturus/Life Technologies、徕卡、蔡司和MMI。在上一篇文章中,我们介绍了前两个,这回则带您看看MMI和蔡司的产品,以及新手该如何选择。   MMI   瑞士MMI公司的单细胞获取平台有两大旗舰产品:Ce