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蛋白质沉淀反应的几个反应现象

蛋白质沉淀反应有两种反应现象:(1)盐析:在蛋白质水溶液中加入足量的盐类(如硫酸铵),可析出沉淀,稀释后能溶解并仍保持原来的性质,不影响蛋白质的活性。这是一个可逆的过程,可用于蛋白质的分离与提纯。(2)变性:在重金属盐、强酸、强碱、加热、紫外线等作用下,引起蛋白质某些理性质改变和生物学功能丧失。这是一个不可逆过程。......阅读全文

蛋白质沉淀技术

在过去的 100 年里,虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法,但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用,尤其对于酸性蛋白质。此外,PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来,将会对这两种方法进行详细的讨论, 随后对其他几种沉淀方法做简单概述,并针对沉淀过程中沉淀的处理和纯化效率的最大化提出一般性建议。实

蛋白质沉淀技术

蛋白质沉淀技术             实验步骤 一、AS 沉淀 1.原理 虽然有些其他盐类也可以用做沉淀剂,但是 AS

蛋白质沉淀技术(一)

一、AS 沉淀1.原理虽然有些其他盐类也可以用做沉淀剂,但是 AS 的特点突出,故而最具有应用价值。AS 可很好地稳定蛋白质的结构、可溶性极好、相对价廉、纯物质容易获得,且 25℃ 时其饱和溶液的密度 (4.1InoVU1O=I.235 g/cm3) 低于另一种盐析剂磷酸氢二钾(3mol/L,(0=

蛋白质沉淀浓缩方法

在生化制备中,沉淀主要用于浓缩目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂:  1.盐析法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。  2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。  3.等电点沉淀法 用于氨基酸、

蛋白质沉淀技术(三)

3.策略 C 的基本操作程序(1) 配制 10%(V/V)[5%(m/V)] 的 PEI 储存液。PEI(WV) 常以 50%(m/V) 的黏稠液体状态存在(来自于 MPBiochemicals 的 PEI, 其相对分子质量 Mw=50000?100000, 也可采用其他来源,如 Sigma 和

蛋白质沉淀技术(二)

(4) 小心倒出上清液,并测量其体积。依据表 20.1 所示的以百分饱和度从低到高的顺序加入 AS 以确定所需 AS 的质量。继续伴以快速的搅拌并缓慢加入 AS,以避免局部形成较高盐浓度,之后静置 30 min, 使其形成沉淀。(5) 如步骤 (3) 中所示进行离心。尽量去除上清液, 若之前已经仔细

什么是蛋白质沉淀?

  蛋白质沉淀(precipitation)是蛋白质分子凝聚从溶液中析出的一种现象,变性蛋白质一般易于沉淀,但在一定的条件下,变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸(如三氯醋酸)沉淀等。

Porviar P3蛋白质沉淀板独特的蛋白质沉淀技术

Porvair Sciences蛋白质沉淀板(P3),也称为蛋白质碰撞板。专-利设计,样品制备之前有效去除不需要的蛋白质。 P3微孔板具有良好的流速、低非特异性结合和出色的去除效率。此外,孔板的清洁系统可确保工作流程中无泄漏。 P3蛋白质沉淀技术如何工作?P3板通过添加诸如甲醇或乙腈之类的溶剂来使溶

蛋白质的沉淀方法及常见沉淀剂

名称  上清液 0.5ml血浆中不同沉淀剂使蛋白沉淀的% PH值 0.20.4 0.60.8 1.0 1.5  2.03.0   4.0 10%三氯醋酸 1.4-2.0 99.7 99.3 99.6 99.5 99.5 99.7 99.8 99.8 99.8 6%高氯酸 

蛋白质沉淀方法-等电点沉淀法介绍

  此法单独应用较少,多与其它方法结合使用  两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离。如工业上生产胰岛素时,在粗提液中先调PH8.0去除碱性蛋白质,再调PH3.0去除酸性蛋白质。利用等电点除杂蛋白时必须了解制备物对酸碱的稳定性,不然盲目使用十