柱色谱法的上样方法的介绍

上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入。然后用少量溶剂洗涤后,再加入。湿法较方便,熟手一般采用此法。 上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。......阅读全文

薄层色谱的上样技术

上样是薄层色谱分析开始操作的第一步,也是最关键的一步。它既关系到能否得到可以重现的分离度好的可鉴别性的薄层色谱,更关系到定量测定结果的准确,因为上样是最主要的误差来源。(一)如果在上样后和分离前不对原点的样品采取“浓集”处理,在薄层板上样品容积的负荷量是极为有限的,工作范围很窄(表一)。如上样容积过

高效液相色谱法色谱柱的拖尾因子的介绍

  为保证测量精度,特别当采用峰高法测量时,应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。拖尾因子计算公式为:  T(拖尾因子)=W0.05h/2d1式中 W(0.05h)为0.05峰高处的峰宽;  d1为峰极大至峰前沿之间的距离。除另有规定外,T应在

柱色谱法

1.吸附柱色谱色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,通常多采用直径为0.07~0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各品种项下的规定。(1) 吸附剂

柱色谱法

1.吸附柱色谱色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,通常多采用直径为0.07~0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各品种项下的规定。(1) 吸附剂

柱色谱法

1.吸附柱色谱色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,通常多采用直径为0.07~0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各品种项下的规定。(1)

柱色谱法的装柱方式是什么?

装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱。

高效液相色谱法仪器的进样装置介绍

  ⑴注射器进样装置:进样所用微量注射器及进样方式与 GC法一样。进样压力150×10^5Pa时,必须采用停流进样。  ⑵高压定量进样阀:与GC法用的流通法相似,能在高压下进样。

实验室分析方法气相色谱法的进样方式介绍

气相色谱分析主要有填充柱进样和毛细管进样两种方式。1.填充柱进样填充柱进样口是目前最为常用,也是最简单、最易操作的GC进样口,该进样口的作用就是提供一个样品气化室,所以气化的样品都被载气带入色谱柱进行分离。进样口可连接玻璃或不锈钢填充柱,进样口温度应接近于或略高于样品中待测高沸点组分的沸点。内径为2

WB-上样前如何制样

WB 是实验室常见实验之一,蛋白定量后,上样之前,还需要哪些步骤制样呢?1. 蛋白含量测定后,Invent 建议大家把各个样品稀释到某一固定浓度(稀释可使用 PBS,水或裂解液),等体积等质量上样,计算上样体积时需包含 loading buffer 的体积。例如:把所有蛋白浓度都稀释到 2ug/ul

固相萃取装置正压上样和负压上样

  固相萃取装置是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的(即样品的分离,净化和富集),目的在于降低样品基质干扰,提高检测灵敏度,其应用于各类食品安全检测、农产品残留监控、医药卫生、环境保护、商品检验、自

柱色谱法的技术原理

柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

TLC柱层析上样的技巧

上样的技巧上样也有湿法和干法之分: 湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要破坏硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,再充分地吸

色谱柱的再生方法介绍

1、正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺序,不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20-30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大,冲洗过程中请随时注意调整冲洗的流速),用甲醇冲洗完后,再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。2、反相柱的再生。采用以

实验室分析方法色谱法色谱柱的保存方法

  如果色谱柱不使用,又该如何进行保存呢?下列方法可供参考:  在柱二端包起来,放到盒子里室温避光保存。毛细管柱可以用废旧的隔垫裁成二块,分别插在毛细管二段。填充柱用小塑料袋套住,再用细金属丝扎起来。因为分析室有许多化学试剂,特别在橱内会有些气味,这样能较好保管色谱柱。放置时也要有序放置,毛细管柱还

色谱法常见的方法介绍

  柱色谱  柱色谱法是最原始的色谱方法,这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中,将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端,以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种,一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱,一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法,一种方法是在柱尾直接

常用色谱法介绍柱色谱技术

柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

填充柱的老化方法的介绍

  老化方法  老化的方法多采用气体流动法,将柱入口与进样室相连,出口勿接检测器,通小流量(一般为5~ 10 ml/min)的载气,以(2~ 4)℃·min -1程序升温至低于固定液最高使用温度20~ 30℃ ,老化12~ 24 h,获得平稳基线,则表明老化已合格。具体的老化方法是:  对于工业纯固

实验室分析方法气相色谱法的进样系统结构介绍

就气相色谱样品的状态而言,气体、液体和固体都有。气体和液体样品可用不同规格的注射器、进样阀以手动或自动方式进样。注射器和气体量管进样的优点是:进样量可以改变,操作简便;缺点是:若非自动进样,则进样量难以达到重复。图16-1是气体量管进样装置。进样前将样品从储气瓶取入量管中,关闭活塞3,记下量管中样品

色谱柱配柱时在担体上涂渍固定液采用的常规方法

一般配常用的色谱柱,大都采用“常规”涂渍法,其简要操作为:取所需量的固定液,用适量(能浸过担体)的溶剂溶解,将担体缓缓倒入其中,随到随搅,而后用红外灯照射(或用水浴蒸发)以赶走溶剂,则固定液就附着于担体上了。

岛津GC2010进样注意及进样口色谱柱的安装方法

岛津GC-2010进样注意事项手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡(吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器,金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1-2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10μl注射器,带芯子注射器平感觉)进样速度要快(但不易特

快速柱色谱法

快速柱色谱法是1978年发展起来的一种替代长柱色谱法的方法。该方法旨在从混合物中分离组分,从而纯化它。它是从现有的长柱色谱技术建立起来的,耗时且常常不令人满意。简而言之,快速柱色谱法使样品通过填充有凝胶的柱,凝胶将样品分离。快速柱色谱的创始人Still和同事一直在使用中压色谱和短柱色谱来替代长柱色谱

湿法上样改进综述

工业级大规模正相硅胶纯化制备生产上现在大多是干法拌样上样,每天需要处理大量的粗品,费时费力,产量提不上去,同时会产生大量的粉尘影响身体健康和造成环境的污染,导致各方面的损失和伤害。本文采用工业级的中低压制备液相色谱仪(利穗科技(苏州)有限公司)可以优化干法上样为湿法上样,将样品通过合适的纯化系统和层

关于湿法、干法上样

湿法省事,一般用淋洗剂溶解样品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等。。。但溶剂越少越好,不然溶剂就成了淋洗剂了。很多样品在上柱前是粘乎乎的,一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会出现,是因为硅胶对样品的吸附饱和,而样品本身又是比较好的固体才会发生,这就应该先重结晶,得到大

柱色谱法分离条件的探索

柱色谱法分离条件的探索柱色谱法的实验条件,例如选用什么吸附剂和洗脱剂较好,各个组分按什么顺序从柱中洗脱出来,每一分洗脱液中是含单一组分或就含几种没有分开的组分等,都可以在薄层上进行探索和检验。薄层上所有的展开剂虽不完全照搬柱色谱法上,但仍有参考价值。

6×蔗糖凝胶上样液的配制

成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA40%聚蔗糖水1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)4g 补足到10ml

6×甘油凝胶上样液的配制

成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA50%甘油水1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)3ml 3.9ml

6×碱性凝胶上样液的配制

6×碱性凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3 N 氢氧化钠6 mmol/L EDTA18%聚蔗糖(400型)0.15%溴甲酚绿0.25%二甲苯青FF水300ul 10N 氢氧化钠120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)1.8g15mg25mg补足到10ml

DNA测序技术的上样及电泳

  关闭电泳仪,用移液枪吸缓冲液清洗样品孔,去除在预电泳时扩散出来的尿素,然后立即用毛细管进样器吸取样品,加入样品孔中。上样顺序一般为G、A、 T、C。加样完毕后,立即电泳。开始可用30V/cm进行电泳,5分钟后可提高至40-60V/cm,并保持恒压状态。一般来说,一个55cm长, 0.2mm厚的凝

柱层析的上样方式及其特点

上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴

治疗股骨髁上骨折的方法介绍

  以非手术疗法为主。复位不佳、有软组织嵌顿及血管神经损伤者,则需开放复位及内固定(或复位后采用外固定)。  1.非手术疗法  一般采用骨牵引及石膏固定:  (1)骨牵引 与股骨干骨折牵引方法相似,惟牵引力线偏低以放松腓肠肌而有利于复位。如胫骨结节牵引未达到理想对位,则改用股骨髁部牵引使作用力直接作