华人夫妇颠覆性发现,桥接不同代谢通路的酶

Salk研究所的科学家通过拟南芥研究,发现了生物直接调控化学反应以快速协调器官生长的机制,颠覆了机体各部分如何协调生长的传统观点,为增加农作物产量和开发代谢疾病新疗法带来了重要启示。 代谢是驱动机体内所有基础生命过程(生长、繁殖、消化、感知等)的化学反应,这些反应由酶控制着。迄今为止,人们一般认为各个代谢功能依赖着完全不同的酶通路,而且主要关注的是调节这些通路的基因开关情况。 而这项研究显示,本被认为是完全由基因开关控制的两条不同通路,其实通过一种酶桥接起来,可以实现协同调控。机体通过这两条通路对环境改变进行应答,合成不同激素以快速调整相应部分的生长。由此,单个环境事件通过两种激素同时快速调节了不同组织的生长。该研究发表在本周的Nature Chemical Biology杂志上。 “基因是细胞合成特定酶的指南,但对于应答光照等环境改变来说,要等多种基因来协调基本激素合成就有点太慢了,” 霍华德......阅读全文

单胺氧化酶A基因的功能

  单胺氧化酶A的一个重要作用是平衡大脑中5-羟色胺的分泌。5-羟色胺的浓度水平会影响到人用来控制愤怒情绪的脑部活动区域。因此,MAOA基因表达量的高低,直接影响个体的情绪水平,进而对其行为产生影响。  MAOA基因能够调节大脑中一种分解多巴胺和其他神经传导物质的酶的活性,类似于抗抑郁药含有的“感觉

基因突变致酶活性异常

  由于基因突变导致酶活性降低或增高所引起的疾病称为遗传性酶病(hereditary enzymopathy)。遗传性酶病与分子病的区别在于后者引起机体功能障碍是蛋白质分子变异的直接后果;而前者则由于合成酶蛋白结构异常或调控系统突变后导致酶蛋白合成数量减少,通过酶的催化作用间接导致代谢紊乱所

植物酯酶同工酶基因的染色体定位

一、原理酶和蛋白质是基因表达的产物,基因位于染色体上。当某一对同源染色体缺失时,位于这对染色体上的基因和它们所编码的酶或蛋白质也就随之丢失。以正常小麦及其缺体系为材料,通过蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳和同工酶分析,即可确定编码这些酶或蛋白质的基因在基因组中的定位(位于哪对染色体上)。酯酶是催化酯类化合物

蛋白质提取过程中常用蛋白酶和磷酸酶抑制介绍

在与蛋白相关的检测中,最关键的一步便是蛋白质的提取。在提取的过程中,我们要经常加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的。 本文详细总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF、Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin胃蛋白酶抑制剂

蛋白质提取过程中常用蛋白酶和磷酸酶抑制介绍

 在与蛋白相关的检测中,zui关键的一步便是蛋白质的提取。在提取的过程中,我们要经常加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的。        本文详细总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF、Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepsta

蛋白质结构显示肿瘤抑制基因开合

  据美国物理学家组织网报道,美国加州大学圣克鲁兹分校癌症研究人员最近观察到细胞内生化反应分子机制,解释了肿瘤抑制基因是如何控制细胞生长分裂周期的,有助于开发癌症治疗新途径。研究发布在8月《自然结构与分子生物学》上。   目前已知,眼癌肿瘤抑制基因蛋白质就像一扇门,其打开还是关闭控

关于基因转录的蛋白质的分类介绍

  真核生物在转录时往往需要多种蛋白质因子的协助。一种蛋白质是不是转录机构的一部分往往是通过体外系统看它是否是转录起始所必须的。一般可将这些转录所需的蛋白质分为三大类:  (1)RNA聚合酶的亚基,它们是转录必须的,但并不对某一启动子有特异性。  (2)某些转录因子能与RNA聚合酶结合形成起始复合物

限制酶在基因工程和基因诊断中的应用

限制酶的上述特性在基因工程和基因诊断中具有重要用途:①首先不论DNA的来源如何,用同一种内切酶切割后产生的粘性末端很容易重新连接,因此很容易将人和细菌或人和质粒任何两个DNA片段连接在一起,即重新组合,这是重组DNA技术的基础。②人类的基因组很大,不切割无法分析其中的基因。限制酶能把基因组在特异的部

关于锌蛋白酶促进蛋白质代谢的作用

  锌与蛋白质代谢有密切关系,缺锌时蛋白质合成受阻。因为锌是蛋白质合成过程中多种酶的组成成分。如蛋白质合成所必需的RNA聚合酶中就含有锌。缺锌会影响大豆蛋白态氮的含量,同时也反应在鲜重上。植物缺锌的一个明显特征是植物体内RNA聚合酶的活性提高。由此可见,缺锌植物体内蛋白质含量降低是由于RNA降解加快

酶活性分析法检定蛋白质的方法步骤

表现出來的酶GUS可以水解其基质衍生物pNPG,所产生的黄色生成物p-nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986);仪器用具:ELISA光度计 (Dynatech);微量滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 4424

蛋白质工程对治癌酶改造的应用介绍

  癌症的基因治疗分二个方面:药物作用于癌细胞,特异性地抑制或杀死癌细胞;药物保护正常细胞免受化学药物的侵害,可以提高化学治疗的剂量。疱症病毒(HSV)胸腺嘧啶激酶(TK)可以催化胸腺嘧啶和其他结构类似物如GANCICLOVIR和ACYCLOVIR无环鸟苷磷酸化。GANCICLOVIR和ACYCLO

基因重组胰蛋白酶与传统胰酶的消化对比

胰蛋白酶(Trypsin)是一种丝氨酸蛋白水解酶。其前体为无生物活性的胰蛋白酶原(trypsinogen),产生于胰脏。随胰液分泌到小肠中,被小肠中的肠肽酶激活后,能将蛋白质分解为多肽,进而分解成为氨基酸。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端。故在体外细胞培养中,胰蛋白酶被用于消化贴壁细胞

等位基因酶的基本信息

中文名称等位基因酶英文名称allozyme定  义由等位基因产生的一组酶,其氨基酸序列不同,因此在性质上有差异。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

荧光素酶基因是怎样产生的

用作报告基因的荧光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物,在还原型黄素单核苷酸参与下,使脂肪醛氧化为脂肪酸,同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素,同时放出光

荧光素酶基因是怎样产生的

用作报告基因的荧光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物,在还原型黄素单核苷酸参与下,使脂肪醛氧化为脂肪酸,同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素,同时放出光

双萤光素酶报告基因检测

  萤光素酶报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究,包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单萤光素酶报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双萤光素

荧光素酶基因是怎样产生的

用作报告基因的荧光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物,在还原型黄素单核苷酸参与下,使脂肪醛氧化为脂肪酸,同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素,同时放出光

双荧光素酶报告基因测试

在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因

荧光素酶基因是怎样产生的

用作报告基因的荧光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物,在还原型黄素单核苷酸参与下,使脂肪醛氧化为脂肪酸,同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素,同时放出光

等位基因酶的基本信息

中文名称等位基因酶英文名称allozyme定  义由等位基因产生的一组酶,其氨基酸序列不同,因此在性质上有差异。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

基因工程常用的工具酶1

一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)1.定义:凡能识别和切割双链DNA分子内特定核苷酸序列的酶,也称为限制酶(restriction enzyme,RE)。2.类型:来自原核生物,有三种类型。Ⅰ型:兼具甲基化修饰和ATP参与的核酸内切酶活性,随机切割。Ⅱ型:大多能

基因工程常用的工具酶2

①增加限制酶的用量,平均每微克底物DNA可高达10单位甚至更多。②增加酶反应体系的体积,以使潜在的抑制物被相应的稀释。③延长酶解反应的保温时间。④向反应体系中添加亚精胺(spermidine)(终浓度为1~2.5mmol/L),亚精胺与负电性的杂质结合。注意,亚精胺在4℃时会沉淀DNA,因此最好在反

荧光素酶基因是怎样产生的

用作报告基因的荧光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物,在还原型黄素单核苷酸参与下,使脂肪醛氧化为脂肪酸,同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素,同时放出光

β半乳糖苷酶基因在基因工程中的应用

β-半乳糖苷酶基因被广泛地应用于包括作为报告基因、构建载体、转基因研究和基因治疗等多个分子生物学研究领域。具体介绍如下:1在载体构建中的应用β-半乳糖苷酶可催化X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷) 水解,产物呈蓝色,易于检测和观察,基于这一特点,β-半乳糖苷酶基因常作为载体组分,

蛋白质芯片对于基因表达的筛选的应用

从人胎儿脑的cDNA文库中选出92个克隆的粗提物制成蛋白质芯片,用特异性的抗体对其也进行检测,结果的准确率在87%以上,而用传统的原位滤膜技术准确率只达到63%。与原位滤膜相比,用蛋白质芯片技术在同样面积上可容纳更多的克隆,灵敏度可达到pg级。

蛋白质芯片技术应用与基因表达的筛选

基因表达的筛选AngelikaL.等人从人胎儿脑的cDNA文库中选出92个克隆的粗提物制成蛋白质芯片,用特异性的抗体对其也进行检测,结果的准确率在87%以上,而用传统的原位滤膜技术准确率只达到63%。与原位滤膜相比,用蛋白质芯片技术在同样面积上可容纳更多的克隆,灵敏度可达到pg级。

让基因沉默提高酵母中的蛋白质产量

  通过使基因沉默,研究人员成功地显著增加了酵母中的蛋白质产量。该方法可为制药蛋白和工业酶生产工业产出更好的工程化菌株。  来自丹麦科技大学诺和诺德基金会生物可生化性中心、查尔默斯技术大学和KTH皇家理工学院的研究人员已经鉴定出9个基因靶点,通过组合沉默使工程酵母细胞中的蛋白质产量提高了2.2倍。G

关于基因表达的机制蛋白质运输的介绍

  许多蛋白质定位于细胞质以外的其它细胞器,多种信号序列(信号肽)负责将蛋白质引导至它们应该在的细胞器。原核生物中,由于细胞的有限区室化,这通常是一个简单的过程。真核生物却存在多种不同的靶向过程以确保蛋白质到达正确的细胞器。  并非所有蛋白质都保留在细胞内,许多蛋白质如消化酶、激素和细胞外基质蛋白通

如何通过chip确定与基因结合的蛋白质

染色质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳

基因突变致蛋白质合成异常分析(一)

   蛋白质性质是由DNA分子上碱基数量和顺序决定的。如果DNA分子的碱基数量或顺序发生变化,由它编码的蛋白质结构就发生相应的改变。由于基因突变导致蛋白质分子质和量异常,从而引起机体功能障碍的一类疾病称为分子病(molecular disease)。  分子病种类很多,根据各种蛋白质的功能可将分子病